Duyuru

Collapse

Devamını görüntüle
See less

Astaksantin, Astaxantin

Collapse
X
  • Filtrele
  • Zaman
  • Göster
Hepsini Sil
new posts

  • #16
    Bağışıklık Sistemi Nasıl Güçlendirilir Antioksidan Nedir



    Yorum yap


    • #17
      Astaksantin'in mantar keratite karşı anti-inflamatuar etkileri

      Yu Huan , 1 Xu-Dong Peng , 1 Jing Lin , 1 Ying-Xue Zhang , 2 Lu Zhan , 1 Han Gao , 1 ve Gui-Qiu Zhao 1
      Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
      Git: Soyut

      AMAÇ

      Fare modelinde Aspergillus fumigatus ( A. fumigatus ) kaynaklı keratitte astaksantin (ASX) etkisini karakterize etmek . YÖNTEMLER

      İn vivo , fungal keratit fare modeli, A. fumigatus kullanılarak C57BL/6 farelerinde oluşturuldu , ardından ASX veya dimetil sülfoksit (DMSO) tedavisi yapıldı. Klinik yanıtlar, klinik skor ve miyeloperoksidaz (MPO) testi ile değerlendirildi. Enflamatuar sitokinler, ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR), Western blot, immünofloresan ve enzime bağlı immüno sorbent tahlili (ELISA) ile değerlendirildi. SONUÇLAR

      Hayvan modelinde, ASX kornea şeffaflığını ve klinik yanıtı iyileştirdi, IL-1β, TNF-α ve HMGB-1 gibi inflamatuar sitokin ekspresyonunu bastırdı. ASX ile tedavi edilen korneada, immünofloresan ve MPO ile nötrofil seviyelerinin düştüğü gösterilmiştir. ASX ile tedavi edilen grupta TLR2 ve TLR4 seviyeleri DMSO ile tedavi edilen gruptan daha düşüktü. ÇÖZÜM

      ASX, A. fumigatus keratitli fare modelinde inflamatuar yanıtı baskılayabilir ve inflamatuar sitokin üretimini azaltabilir .

      Anahtar Kelimeler: astaksantin, fungal keratit, Aspergillus fumigatus , iltihap önleyici, nötrofil
      Git: GİRİŞ

      Fungal keratit (FK) gelişmekte olan ülkelerde enfekte kornea hastalıklarının yaygın bir nedenidir [1][2] , Aspergillus fumigatus ( A. fumigatus ) ve Fusarium solani FK'de en yaygın patojenlerdir [3][4] . Viral veya bakteriyel kornea ülserleri ile karşılaştırıldığında, mantar kornea ülserleri, kontrol edilemeyen doğuştan gelen bağışıklık tepkisi ve zayıf geçirgenlik, sitotoksisite ve ilaç direnci gibi geleneksel ilaçların dezavantajları nedeniyle daha kötü bir prognoza sahip olma eğilimindedir [5][6] .

      Astaksantin (ASX), ilk önce bir ıstakozdan çıkarılan bir ketokarotenoiddir. Terpenlere aittir ve halobiyolardan izole edilebilir [7][8] . Bugüne kadar ASX, antioksidan, anti-inflamatuar, anti-apoptotik, nöroprotektif ve anti-tümör özellikleri dahil olmak üzere çeşitli biyolojik fonksiyonlara sahiptir [9][10] . Son zamanlarda ASX, su ürünleri yetiştiriciliğinde balıkların büyümesini ve üreme performansını destekleyen ve ayrıca balık ve kabuklu deniz hayvanlarında bağışıklık sistemini güçlendiren bir besin takviyesi olarak da kullanılmıştır [11][12] .

      Daha da önemlisi, ASX'in fare mastitis modeli üzerindeki terapötik etkisi Dolma ve arkadaşları tarafından bildirilmiştir [13] . Ayrıca ASX'in üveit patogenezinde inflamatuar yanıtı inhibe ettiğini gösterir [14] . Singh ve arkadaşları [10] ASX'in dermatit sürecinde inflamatuar faktörleri etkili bir şekilde azaltabildiğini, derideki hastalığın şiddetini hafifletebildiğini bildirmiştir. Bu sonuçlar, ASX'in inflamasyonu inhibe edebileceğini göstermektedir.

      Bağışıklık sisteminin ilk satırı olarak, doğuştan gelen bağışıklık, patojenlerdeki patojenle ilişkili moleküler kalıpları (PAMP'ler) tanıyan ve inflamatuar faktörlerin salgılanmasını destekleyen patern tanıma reseptörleri (PRR'ler) aracılığıyla mantarları tanır ve ortadan kaldırır [15] . Toll-like reseptörler (TLR'ler), FK'de yer alan önemli PRR'lerdir ve TLR2 ve TLR4 kornea epitel hücrelerinde ifade edilen ana PRR'lerdir [16][17] .

      Bununla birlikte, ASX'in FK'deki koruyucu etkileri hala belirlenmemiştir. A. fumigatus'un neden olduğu keratitte ASX'in etkisini araştırmak için . Bir A. fumigatus fare modeli oluşturduk, farklı gruplar belirledik ve karşılık gelen tedaviyi verdik . Korneanın klinik inflamatuar seviyesini araştırmak için, korneadaki nötrofil ve miyeloperoksidaz (MPO) aktivitesini, inflamatuar faktörleri (IL-1β, TNF-α ve HMGB1), TLR2 ve TLR4'ü analiz edin.

      Git: MALZEMELER VE YÖNTEMLER

      Etik Onay

      Fareler, Görme ve Oftalmoloji Araştırmaları Derneği (ARVO) tarafından Oftalmik ve Görme Araştırmalarında Hayvanların Kullanımına İlişkin Açıklamaya göre tedavi edildi. reaktifler

      ASX'i Sigma-Aldrich Chemical Co.'dan elde ettik. RNAiso Plus, TB Green™ Premix Ex Taq™ II ve ters transkripsiyon polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) kiti TaKaRa'dan (Dalian, Liaoning Eyaleti, Çin) elde edildi. Fosfat tamponlu tuzlu su (PBS), Bisin-koninik asit (BCA) protein tahlil kiti, fenilmetilsülfonil florür (PMSF) Solarbio'dan (Pekin, Çin) türetilmiştir. TNF-α, IL-1β ve HMGB-1 enzim bağlantılı immüno sorbent tahlili (ELISA) kitleri Elabscience'dandı. Β-aktin antikorlar Western blot için TLR2 ve TLR4 gelen edildi Abcam'dan(Cambridge, Birleşik Krallık). İmmünofloresan boyama için TLR2 ve TLR4 antikoru, Abclonal'dan (Wuhan, Çin) elde edildi. Tavşan anti-fare nötrofil antikoru, floresan izotiyosiyanat (FITC) etiketli eşek anti-tavşan ikincil antikoru, immünofloresan boyama için 4',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI) solüsyonu CST'den (Cell Signaling Technology, ABD) temin edildi. Birincil A. fumigatus Kültürü

      A. fumigatus suşu 3.0772, Çin Genel Mikrobiyolojik Kültür Toplama Merkezinden (Pekin, Çin) satın alınmıştır. Kültür ortamı sabouraud'du ve süre 3-4 gündü. Conidia yüzeyin her tarafında olduğunda, kazıyın ve PBS solüsyonuna koyun. Konsantrasyonunu 5×10 4 konidia/mL'ye ayarlayın. Hayvan Hazırlama

      Yetişkin (8 haftalık) dişi C57BL/6 fareleri [spesifik patojen içermeyen (SPF)] Jinan Pengyue Experimental Animal Co., Ltd.'den (Jinan, Shandong Eyaleti, Çin) satın alındı. % 8, kloral hidrat, bir anestetik olarak kullanıldığında, o zaman bu farelerin bir gözü arasında spor süspansiyonunun enjekte edilmesi ile enfekte edildi A. fumigatus (0.5 x 10 6 , kornea stromasına / mL) eklenmiştir. Tüm fareleri iki gruba ayırdı. Biri ASX (64 umol/L) ile tedavi edildi, başka bir grup kontrol olarak PBS içinde %1 dimetil sülfoksit (DMSO) ile tedavi edildi. Farklı gruplardaki farelere aynı anda günde üç kez göz damlası verildi. Ayrıca, fareler başka bir tedaviden geçmedi. Fareler enfeksiyondan sonra her 24 saatte bir incelendi (pi). Keratitin skorlama sistemi Wu ve ark [18] tarafından belirlendi.. Planlanan zamanda kornea üzerinde RT-PCR, Western blot, MPO testi ve immünofloresan boyama yapıldı. RNA İzolasyonu ve RT-PCR

      Fare korneasındaki çeşitli faktörlerin mRNA seviyeleri RT-PCR ile tespit edildi. Toplam RNA elde etmek için numuneyi RNAiso plus reaktifine koyun. Nicelemeden sonra, RNA, cDNA'ya ters kopyalandı ve daha sonra, her bir faktörün mRNA ifadesini elde etmek için cDNA'yı şablon olarak kullanarak PCR ile amplifiye edildi. β-aktin kontrol olarak kullanıldı. Primer çifti dizileri aşağıdaki gibidir: mβ-aktin (F-GAT TAC TGC TCT GGC TCC TAG C ve R-GAC TCA TCG TAC TCC TGC TTG C), mIL-1β (F-CGC AGC AGC ACA TCA ACA AGA GC ve R-TGT CCT CAT CCT GGA AGG TCC ACG), mTNF-α (F-ACC CTC ACA CTC AGA TCA TCTT ve R-GGT TGT CTT TGA GAT CCA TGC), mTLR-4 (F-CGC TTT CAC CTC TGC CTT CAC TAC AG ve R-ACA CTA CCA CAA TAA CCT TCC GGC TC), mHMGB-1 (F-TGG CAA AGG CTG ACA AGG CTC ve R-GGA TGC TCG CCT TTG ATT TTG G), mTLR-2 (F-CTC CTG AAG CTG TTG CGT TAC ve R-TAC TTT ACC CAG CTC GCT CAC TAC). Western Blotlama

      Numuneler önce öğütülmüş ve kalıntıyı uzaklaştırmak için santrifüjlenmiştir. Numunelerin protein konsantrasyonları ölçüldü. Bu proteinler PVDF membranlarına aktarıldı, ardından β-aktin, TLR-4 (Abcam, ABD) ve TLR-2'ye (Abcam, Cambridge, UK) karşı birincil antikorlarla 4°C'de 12-16 saat inkübasyon yapıldı. Daha sonra ikinci antikor eklendi (37°C 1.5 saat) ve görüntüleme ECL kiti ile banyodan sonra yapıldı. ELISA

      TNF-a, IL-1p ve HMGB-1'in ifadesi ELISA ile belirlendi. Kornealar 3. günde çıkarıldı ve 5 uL proteaz inhibitör kokteyli ile 495 uL PBS solüsyonunda çözündürüldü, daha sonra ultrasonik dispersiyondan sonra süpernatan gerçekleştirildi. Farklı gruplardan protein konsantrasyonlarını ölçmek için ELISA kitleri kullanıldı. Sonuçlar absorbans ile gerçekleştirildi. İmmünofloresan Boyama

      Farelerin göz küreleri uygun zamanda çıkarıldı ve sıvı nitrojen ile sabitlendi. Kesitler serum ile muamele edildi, birincil antikor ile kaplandı ve oda sıcaklığında 30 dakika inkübe edildi, yıkandı ve ikincil antikor ile inkübe edildi, FITC ile etiketlendi ve DAPI ile boyandı. Kapatıldıktan sonra görüntüleme yapıldı. Floresans, bir Zeiss HB050 ters mikroskop sistemi (Carl Zeiss, Oberkochen, Almanya) altında incelenmiştir. Miyeloperoksidaz Testi

      0,9 mL %5 doku homojenatı alın, 0,1 mL reaktif III ekleyin, karıştırın ve 37°C'de 15 dakika banyo yapın. Belirleme grubu ve kontrol grubu hazırlanmış, tamamen karıştırılmış, 30 dakika 37°C su banyosu, renklendirici reaktif ilavesi, 10 dakika 60°C su banyosu, çıkardıktan sonra hemen her numunenin OD değerini 460 nm'de 460 nm'de ölçün. optik çap (1 cm). Nötrofillerin aktivitesi, öngörülen formülle hesaplandı. İstatistiksel analiz

      Tüm sayısal veriler, ortalama ± standart ortalama hataları (SEM) olarak sunuldu. Tüm deneyler en az üç kez yapıldı. Üç veya daha fazla grup arasında karşılaştırma yapmak için tek yönlü varyans analizi (ANOVA) testi kullanıldı ve birden fazla grup arasındaki farkı belirlemek için eşleştirilmemiş iki kuyruklu t testi de kullanıldı. 0.05'ten küçük P değeri istatistiksel olarak anlamlı olarak tanımlandı.

      Git: SONUÇLAR

      A. fumigatus Keratitis Fare Modelinde ASX Tedavisi ile Klinik Yanıt

      A. fumigatus keratitli fare modelinde , kornealar ASX ile tedavi edilen grupta 3. günde kontrole göre daha şeffaftı (modelin kurulmasından 72 saat sonra;Şekil 1A). 3. günün seçilmesinin nedeni, A. fumigatus keratitis modelinin hastalık durumunun 3. günde en belirgin olması ve ardından yavaş yavaş hafifleyeceğidir. Genellikle beşinci günde kendi kendine iyileşebilir. ASX ile tedavi edilen gruptaki klinik skor, 1, 3, 5. günlerde kontrol grubundan daha düşüktü (Şekil 1B). Bu sonuçlar, ASX'in kornea şeffaflığını iyileştirebileceğini ve FK'de koruyucu etkiler gösterebileceğini gösterdi. Ek olarak, MPO canlılığı, ASX ile tedavi edilen farelerin kornealarında, 1. günde kontrol ( P <0.01) ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde azaldı (Şekil 1C), ASX'in A. fumigatus keratitinde anti-inflamatuar bir rol oynadığını düşündürür .
      Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı ijo-13-11-1681-g001.jpg
      Ayrı bir pencerede aç
      Şekil 1
      Fare A. fumigatus keratitis modelinde ASX tedavisi ile klinik yanıt ve MPO
      A: pi'nin 3. gününde (mantar sporu süspansiyonunun korneaya aşılanmasından 72 saat sonra, klinik yanıtın en önemli olduğu zaman) bir yarık lamba ile yakalanan görüntüler, DMSO'nun ASX ile tedavi edilen farelere karşı hastalık yanıtını gösterir; B: Hastalık yanıtı, ASX ile tedavi edilen farelere kıyasla DMSO grubu için daha yüksek olan bir klinik skorla ( n =12/grup veya n =6/grup) temsil edilir; C: ASX ile tedavi edilen farelerden alınan kornealar ( n =5/grup), DMSO ile tedavi edilen farelere kıyasla pi'nin 3. gününde MPO seviyesinde önemli bir düşüş sergiledi. a P <0.05, b P <0.01. ASX Tedavisi A. fumigatus Keratitis Fare Modunda Nötrofillerin Toplanmasını Azalttı

      Daha sonra ASX'in A. fumigatus keratitis farelerinde nötrofil infiltrasyonu üzerindeki etkilerini saptadık . İmmünofloresan, 3. günde DMOS ile tedavi edilen gruba kıyasla ASX ile tedavi edilen farelerde nötrofil sayısının önemli ölçüde azaldığını ortaya çıkardı (şekil 2), ASX'in inflamatuar yanıtta nötrofil infiltrasyonunu baskıladığını öne sürdü.
      Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı ijo-13-11-1681-g002.jpg
      Ayrı bir pencerede aç
      şekil 2
      Farelerde A. fumigatus keratitis modelinde immünofloresan sonuçları
      ASX ile tedavi edilen farelerin kornealarının pozitif boyanması (yeşil), 3d pi'de DMSO grubuna kıyasla nötrofil infiltrasyonunun azaldığını gösterir. ASX, A. fumigatus kaynaklı İnflamatuar Sitokinlerin Üretimini Engelledi

      A. fumigatus keratitis farelerinin korneasında, ASX tedavisinden 1, 3 ve 5. günlerde TNF-α, IL-1β ve HMGB-1 mRNA'nın mRNA ekspresyonları tespit edildi. IL-1β, TNF-a'nın ekspresyon seviyeleri, ASX ile tedavi edilen gruplarda, DMSO ile tedavi edilen gruptan 1., 3. ve 5. günlerde önemli ölçüde daha düşüktü (Şekil 3A, ​,3B).3B). HMGB1 sadece 3. günde istatistiksel olarak farklılık gösterirken (Şekil 3C). Ek olarak, ELISA, 3. günde ASX grubunda TNF-α, IL-1β ve HMGB-1'in azalmış ekspresyon düzeyini gösterdi (Şekil 3D-3F).
      Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı ijo-13-11-1681-g003.jpg
      Ayrı bir pencerede aç
      Figür 3
      ASX, farelerde A. fumigatus keratitis modelinde inflamatuar sitokinlerin üretimini inhibe etti
      AC: Fare modelinde 1, 3, 5 pi günlerinde ASX tedavisinden sonra IL-1β ve TNF-a'nın nispi ekspresyonu için önemli ölçüde aşağı regüle edildi HMGB-1 için, aşağı regülasyon günde gösterildi 3, ancak 1. günlerde gösterilmemiştir, 5 pi b P <0.01. DF: ELISA sonucunda gösterildiği gibi, IL-1β, TNF-α ve HMGB-1'in protein seviyesi, 3. günde DMSO ile tedavi edilen grupla karşılaştırıldığında ASX tedavi grubunda kayda değer bir şekilde aşağı regüle edildi. b P <0.01 . ASX, TLR4 ve TLR2'nin Yükseltilmiş İfadesini Engelledi

      TLR'lerin ASX aracılı anti-inflamatuar aktiviteye dahil olup olmadığını araştırmak için A. fumigatus ile enfekte keratit fare modelinde TLR2 ve TLR4 ekspresyonunu test ettik . 3. ve 5. günlerde TLR2'nin nispi mRNA seviyeleri, DMSO grubu ile karşılaştırıldığında ASX ile tedavi edilen grupta önemli ölçüde aşağı regüle edildi (Şekil 4A-4C) ve 1, 3 ve 5. günlerde TLR4'ün bağıl mRNA seviyeleri de ASX ile tedavi edilen grupta azaldı (Şekil 4D-4F). Ek olarak, Western blot, TLR2 ve TLR4 ekspresyon seviyelerinin A. fumigatus enfeksiyonu üzerine arttığını ve bunların 3. ve 5. günlerde ASX tedavisi ile önemli ölçüde baskılandığını gösterdi (Şekil 4G, ​,4H).4H). Bu sonuçlar, ASX'in nötrofil ve makrofaj infiltrasyonunu etkileyebilecek TLR'ler üzerindeki inhibitör fonksiyonunu doğruladı.
      Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı ijo-13-11-1681-g004.jpg
      Ayrı bir pencerede aç
      Şekil 4
      ASX, fare modelinde yükselen TLR4 ve TLR2 ekspresyonunu inhibe etti
      AC: ASX ile tedavi edildikten sonra, TLR2'nin nispi ifadesi fare modelinde 3/5d pi'de (B, C) önemli ölçüde aşağı regüle edildi, ancak fark 1. günde gösterilmedi (A; n =4/grup) . DF: Fare modelinde 1, 3, 5 pi günlerinde ( n = 4/grup) ASX tedavisinden sonra TLR4'ün nispi ifadesi için önemli ölçüde aşağı regüle edildi . G, H: DMSO ile tedavi edilen grupla karşılaştırıldığında, kornealardaki TLR2 ve TLR4 protein seviyeleri ASX tedavisi grubunda 3, 5 pi'de önemli ölçüde daha düşüktü. b p <0.01.

      Git: TARTIŞMA

      FK, oftalmolojik alanda, özellikle A. fumigatus [19][20] için muazzam bir zorluktur . FK için klinik sonuç, uygun bir zamanında tedavi ile bile kötüdür. En önemli nedenlerden biri, protein çökelmesini teşvik eden ve kornea şeffaflığını azaltan çeşitli inflamatuar sitokinleri ve bağışıklık hücrelerini toplayan aşırı doğal bağışıklık tepkisidir [21][23] . Bu nedenle, aşırı inflamatuar yanıtın neden olduğu doku hasarının koruyucu etkisinden daha büyük olduğu FK'nin orta ve geç evrelerinde inflamatuar yanıtı kontrol etmek çok önemlidir.

      FK'de ASX'in anti-inflamatuar işlevini araştırdık. ASX, hepatit, pankreatit, mastit ve üveitte birçok biyolojik rol oynayan güçlü bir antioksidan karotenoiddir [10] , [13][14] , [24][27] . ASX'in kornea şeffaflığını artırarak prognozu önemli ölçüde iyileştirdiğini gösterdik, bu da ASX'in FK'de koruyucu bir rolü olabileceğini düşündürdü. Başka bir deyişle, ASX, bağışıklık hücrelerinin toplanmasını azaltarak veya inflamatuar sitokinlerin salınımını baskılayarak korneada protein çökelmesini önleyebilir.

      Nötrofiller, nötrofillerin ve makrofajların enfekte dokulara hızla sızmasını ve mikropları fagosite etmesini teşvik eden kemotaksi ve fagositoz nedenlerine sahiptir [28][29] . Bununla birlikte, nötrofillerin ve makrofajların aşırı agregasyonu, kornea şeffaflığını korumanın anahtarı olan kornea stroması ve endotelinin bütünlüğüne zarar verebilir [30] . Çalışmamızda ASX tedavisi MPO seviyesini önemli ölçüde azalttı ve nötrofil infiltrasyonunu baskıladı, bu nedenle korneanın şeffaflığını korumak için protein çökelmesini azalttı. Dolma ve diğerleri [13]ASX'in, ASX ile tedavi edilen farelerin normal bir klinik skora sahip olduğu ancak meme dokusu bölümünde daha az nötrofil infiltrasyonuna sahip olduğu enfeksiyöz mastitis üzerindeki terapötik bir etkisini ortaya çıkardı. Bu nedenle, ASX'in A. fumigatus keratiti sürecinde nötrofillerin agregasyonunu etkili bir şekilde azaltabileceğine , böylece kornea dokusunu koruyup hastalık üzerinde terapötik bir etki elde edebileceğine inanıyoruz .

      TNF-α ve IL-1β gibi inflamatuar sitokinler, inflamatuar yanıtın şiddetini yansıtan önemli göstergelerdir. Önceki çalışmalar [31][33] , ASX'in akut inflamasyonda inflamatuar faktörlerin ekspresyonunu baskıladığını öne sürdü. Suzuki ve arkadaşları [14] , ASX'in sıçan üveitinde NF-KB'ye bağlı sinyal yolunu bloke ederek IL-1β, IL-6 ve TNF-α için inhibisyon etkisine sahip olduğunu bulmuşlardır. Zhou ve arkadaşları [34] , ASX'in farelerde sepsis modelinde IL-1β ve TNF-α'yı aşağı regüle ederek doku hasarını önlediğini buldu. Bu sonuçlar, ASX'in in vivo olarak IL-1β ve TNF-α ekspresyonlarını azalttığını gösteren sonuçlarımızla tutarlıdır.FK'nin şiddetini azaltabilir. HMGB1, inflamatuar sitokinlerin aşırı ekspresyonunu uyararak lokal inflamasyonu indükleyebilir, diğer yandan inflamatuar kaskad reaksiyonuna neden olarak şiddetini ağırlaştırabilir ve inflamasyon süresini uzatabilir [35] . FK'de önemli bir inflamatuar faktör olarak, HMGB1'in keratit hayvan modelinde kademeli olarak arttığı ve 3d pi'de zirveye ulaştığı bulundu. inflamatuar yanıtı etkili bir şekilde azaltabilir ve kornea dokusunu koruyabilir.

      Doğuştan gelen bağışıklık sistemi, FK'nin patogenezinde iltihaplanma ile yakından ilişkilidir, mantarları PRR'ler aracılığıyla tanır ve ortadan kaldırır [36][37] . PRR'ler patojendeki PAMP'leri tanır ve nötrofil alımına, kemokin üretimine ve fagositoza aracılık eder, mantar enfeksiyonuna karşı ilk savunma hattının oluşumuna katılır [38] . PRR'ler ayrıca, stresli hücreler tarafından alarminler olarak salınan ve inflamatuar yanıtı teşvik eden hasarla ilişkili moleküler paternleri (DAMP'ler) tanır [39] . TLR, PAMP'lerin ve DAMP'lerin erken tanınmasında en önemli PRR'lerden biridir [40][41] . TLR2 ve TLR4 hücre yüzeyinde mevcuttu ve birçok faktörü belirleme işlevi vardı.[15] . FK'de TLR4 ve TLR2'nin IL-6, IL-1β ve TNF-α [42][43] gibi kemokinleri tetiklemek için çok önemli olduğu gösterilmiştir . TLR'ler mantarları tanıdıktan sonra, birçok inflamatuar faktör farklı sinyal yollarıyla arttı [16][17] . Ve inflamatuar sitokinlerin artış derecesi, hastalığın şiddeti ile doğru orantılıdır [44] . Bununla birlikte, aşırı bir doğuştan gelen bağışıklık tepkisi, çeşitli bağışıklık hücrelerini toplamak için çok sayıda kemokin ve sitokin salgılar, bu da protein çökelmesine ve kornea saydamlığının kaybolmasına neden olur [45] . Bu nedenle, doğuştan gelen bağışıklık tepkisini kontrol etmek, kornea şeffaflığını korumak için önemlidir [46]. Birçok çalışma, ASX'in hepatit, mastitis ve sinir sistemi gibi çeşitli dokularda TLR'ler aracılığıyla akut inflamasyonu inhibe edebileceğini göstermiştir [47][49] . Ancak göz enfeksiyonları için ASX'in etkisi hala belirsizdir. Çalışmamız ASX'in in vivo olarak A. fumigatus tarafından indüklenen TLR2 ve TLR4 ekspresyonlarını baskıladığını ve kornea iltihabını önemli ölçüde azalttığını göstermiştir. TLR2 ve TLR4, fare modelinde DMSO grubuna kıyasla ASX ile tedavi edilen grupta aşağı regüle edildi. TLR2 ve TLR4 korneada mantar enfeksiyonundan sonra giderek arttı ve 3d pi'de yüksek bir seviyeye ulaştı, bu da A. fumigatus'ta en ciddi kornea inflamatuar reaksiyonun üçüncü günde gözlendiği klinik gözlemle aynı zamana denk geldi.enfeksiyon. 3d pi'den sonra, hastalığın klinik belirtileri yavaş yavaş hafifler ve beşinci gündeki sonuçlarla gösterilen TLR2 ve TLR4 seviyeleri azalır. Bu süreçte ASX, TLR2 ve TLR4'ün ifadesini önemli ölçüde inhibe etti. Bu nedenle ASX, FK'de aşırı inflamatuar yanıtın neden olduğu doku hasarını önlemek için TLR'lerin işlevini hedefleyen ve inhibe eden potansiyel bir ilaç olabilir. Daha ileri çalışmalar, ASX'in TLR'ler üzerindeki inhibitör etkilerinin altında yatan mekanizmaya ve aşağı akış yollarını nasıl düzenlediğine odaklanabilir.

      Bu nedenle ASX, FK'nin aşırı enflamatuar tepkisinin neden olduğu doku hasarını önlemek için TLR'leri inhibe etmek için potansiyel, hedeflenmiş bir ilaç olabilir. Verilerimiz ASX'in kornea dokusundaki TLR'lerde önemli bir rol oynadığını gösterse de, FK'de kornea dokusu üzerindeki koruyucu etkisi sadece TLR aktivasyonunun inhibisyonuna bağlı olmayabilir. Bu mekanizmanın karmaşıklığı, klinik ve deneysel farmakoloji araştırmalarında yaygın bir sorundur, çünkü ilaçlar nadiren tek bir moleküler hedef üzerinde hareket eder. Bu nedenle, ilaç işlevinin kapsamlı ve ayrıntılı mekanizması incelenmeye değer. Bununla birlikte, ASX'in FK'de inflamatuar faktörlerin üretimini etkili bir şekilde engelleyebileceği, kornea dokusunu koruyabileceği, kornea şeffaflığını artırabileceği sonucuna varılabilir.

      Özetle, ASX, bağışıklık hücrelerinin alımını azaltarak ve enflamatuar sitokinlerin salınımını baskılayarak farelerde A. fumigatus keratitinin klinik belirtilerini önemli ölçüde iyileştirebilir . Bu nedenle ASX, FK'de inflamasyonu inhibe etmek, kornea şeffaflığını korumak ve görme kaybını önlemek için kullanılan potansiyel bir ilaç olabilir. Klinik değeri hakkında daha fazla değerlendirme yapmak için, gelecekteki çalışma, ASX'in diğer mantar önleyici ilaçlarla kombinasyonunun etkisini araştırmalı ve ASX'in etkisini, FK tedavisinde yaygın olarak kullanılan yaygın anti-enflamatuar ilaçlarla karşılaştırmalıdır.

      Git: Teşekkür

      Yazarların katkıları: Zhao GQ deneyleri tasarladı ve tasarladı; Huan Y, Lin J, Zhang YX, Zhan L ve Gao H deneyleri gerçekleştirdi; Huan Y, Peng XD, Zhan L ve Gao H verileri analiz etti; Zhao GQ, Huan Y ve Peng XD makaleyi yazdı.

      Vakıflar: Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No.81870632) tarafından desteklenmektedir; Shandong Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı Gençlik Projesi (No.ZR2019BH004).

      Çıkar Çatışmaları: Huan Y, Yok; Peng XD, Yok; Lin J, Yok; Zhang YX, Yok; Zhan L, Yok; Gao H, Yok; Zhao GQ, Yok.

      Git: Referanslar

      1. Mahmoudi S, Masoomi A, Ahmadikia K, Tabatabaei SA, Soleimani M, Rezaie S, Ghahvechian H, Banafsheafshan A. Fungal keratitis: klinik ve laboratuvar yönlerine genel bakış. Mikozlar. 2018; 61 (12):916–930. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      2. Thomas PA, Kaliamurthy J. Mikotik keratit: epidemiyoloji, tanı ve yönetim. Clin Mikrobiyol Enfeksiyonu. 2013; 19 (3):210–220. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      3. Garg P, Roy A, Roy S. Fungal keratit ile ilgili güncelleme. Curr Opin Oftalmol. 2016; 27 (4):333–339. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      4. Kredics L, Narendran V, Shobana CS, Vágvölgyi C, Manikandan P, Indo-Hungarian Fungal Keratitis Working Group Korneanın ipliksi mantar enfeksiyonları: epidemiyoloji ve ilaç duyarlılığına küresel bir bakış. Mikozlar. 2015; 58 (4):243–260. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      5. Prajna VN, Prajna L, Muthiah S. Mantar keratiti: Aravind deneyimi. Hint J Oftalmol. 2017; 65 (10):912–919. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      6. Sun CQ, Lalitha P, Prajna NV, Karpagam R, Geetha M, O'Brien KS, Oldenburg CE, Ray KJ, McLeod SD, Acharya NR, Lietman TM. Association between the in vitro fungal keratit içinde natamisin ve vorikonazol ve klinik sonuçları için duyarlılık. Oftalmoloji. 2014; 121 (8):1495–1500.e1. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      7. Fakhri S, Aneva IY, Farzaei MH, Sobarzo-Sánchez E. Astaksantin'in nöroprotektif etkileri: terapötik hedefler ve klinik bakış açısı. Moleküller. 2019; 24 (14):E2640. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      8. Ambati RR, Phang SM, Ravi S, Aswathanarayana RG. Astaksantin: kaynaklar, ekstraksiyon, stabilite, biyolojik aktiviteler ve ticari uygulamaları - bir inceleme. Mart Uyuşturucu. 2014; 12 (1):128–152. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      9. Mao XZ, Guo N, Sun JN, Xue CH. Biyoteknolojik yöntemlere dayalı karides atıklarının kapsamlı kullanımı: bir inceleme. J Temiz Ürün. 2017; 143 :814-823. [ Google Akademik ]
      10. Singh KN, Patil S, Barkate H. Astaksantin'in cilt üzerindeki koruyucu etkileri: son bilimsel kanıtlar, olası mekanizmalar ve potansiyel endikasyonlar. J Cosmet Dermatol. 2020; 19 (1):22–27. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      11. Cui LL, Xu F, Wang MK, Li L, Qiao TY, Cui H, Li ZL, Sun CQ. Diyetle alınan doğal astaksantin, erken bir aşamada N -nitrozometilbenzilamin kaynaklı özofagus kanseri oksidatif stresini ve F344 sıçanlarında NFκB ve COX2'nin aşağı regülasyonu yoluyla inflamasyonu inhibe eder . Onco Ther'i Hedefler. 2019; 12 :5087–5096. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      12. Lee Y, Hu SQ, Park YK, Lee JY. Karotenoidlerin sağlığa faydaları: alkole bağlı olmayan yağlı karaciğer hastalığının önlenmesinde karotenoidlerin rolü. Önceki Nutr Gıda Bilimi 2019; 24 (2):103–113. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      13. Dolma T, Mukherjee R, Pati BK, De UK. Akut faz yanıtı ve nötrofiller: stafilokokal fare mastitis modelinde astaksantine yanıt olarak lenfosit oranı. J Veteriner Med. 2014; 2014 :147652. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      14. Suzuki Y, Ohgami K, Shiratori K, Jin XH, Ilieva I, Koyama Y, Yazawa K, Yoshida K, Kase S, Ohno S. Astaksantin'in NF-kappaB sinyal yolunu inhibe ederek sıçan endotoksin kaynaklı üveite karşı baskılayıcı etkileri . Exp Göz Arş. 2006; 82 (2):275–281. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      15. Muhammed I, Said Genel Müdürlüğü, Dua HS. Oküler yüzey savunmasında insan antimikrobiyal peptitleri. Prog Retin Göz Arş. 2017; 61 :1–22. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      16. Netea MG, Warris A, van der Meer JW, Fenton MJ, Verver-Janssen TJ, Jacobs LE, Andresen T, Verweij PE, Kullberg BJ. Aspergillus fumigatus, ücretli benzeri reseptör-4 aracılı sinyal iletiminin kaybı yoluyla çimlenme sırasında bağışıklık tanımadan kaçınır. J Infect Dis. 2003; 188 (2):320–326. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      17. Viriyakosol S, Fierer J, Brown GD, Kirkland TN. Patojenik mantar Coccidioides posadasii'ye karşı doğuştan gelen bağışıklık, Toll benzeri reseptör 2 ve Dectin-1'e bağlıdır. Bağışıklığı enfekte et. 2005; 73 (3):1553–1560. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      18. Wu TG, Wilhelmus KR, Mitchell BM. Bir fare modelinde deneysel keratomikoz. Ophthalmol Vis Sci'ye yatırım yapın. 2003; 44 (1):210. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      19. Wan L, Cheng J, Zhang J, Chen N, Gao Y, Xie LX. Şiddetli fungal keratit ile ilişkili endoftalmi risk faktörleri, tedavi stratejileri ve sonuçları. Retina. 2019; 39 (6):1076-1082. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      20. Khor WB, Prajna VN, Garg P, Mehta JS, Xie LX, Liu ZG, Padilla MDB, Joo CK, Inoue Y, Goseyarakwong P, Hu FR, Nishida K, Kinoshita S, Puangsricharern V, Tan AL, Beuerman R, Genç A, Sharma N, Tan DTH. Asya kornea toplumu enfeksiyöz keratit çalışması: Asya'da enfeksiyöz keratitin ileriye dönük çok merkezli bir çalışması. Ben J Oftalmol. 2018; 195 :161–170. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      21. Venkatesh Prajna N, Krishnan T, Mascarenhas J, Srinivasan M, Oldenburg CE, Toutain-Kidd CM, Sy A, McLeod SD, Zegans ME, Acharya NR, Lietman TM, Porco TC. Fungal keratitte sonucun tahmin edicileri. Göz (Londra) 2012; 26 (9):1226–1231. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      22. Ray KJ, Prajna NV, Lalitha P, Rajaraman R, Krishnan T, Patel S, Das M, Shah R, Dhakhwa K, McLeod SD, Zegans ME, Acharya NR, Lietman TM, Rose-Nussbaumer J. Tekrar etmenin önemi Şiddetli fungal keratit tedavisinde kültürler. Ben J Oftalmol. 2018; 189 :41-46. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      23. Sharma N, Sahay P, Maharana PK, Singhal D, Saluja G, Bandivadekar P, Chako J, Agarwal T, Sinha R, Titiyal JS, Satpathy G, Velpandian T. Fungal keratit için yönetim algoritması: TST (topikal, sistemik , ve hedefe yönelik tedavi) protokolü. Kornea. 2019; 38 (2):141–145. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      24. Austin A, Lietman T, Rose-Nussbaumer J. Enfeksiyöz keratit yönetimine ilişkin güncelleme. Oftalmoloji. 2017; 124 (11):1678-1689. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      25. Liu HL, Liu HM, Zhu LY, Zhang ZQ, Zheng X, Liu JS, Fu XQ. Karşılaştırmalı transkriptom analizleri, farelerde alkolik karaciğer hastalığına karşı korumada astaksantin moleküler mekanizmaları hakkında potansiyel bilgiler sağlar. Mart Uyuşturucu. 2019; 17 (3):E181. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      26. Zuluaga M, Gueguen V, Letourneur D, Pavon-Djavid G. İskemi ve reperfüzyon hasarının neden olduğu aşırı reaktif oksijen türlerinin oluşumu üzerinde Astaksantin-antioksidan etkisi. Chem Biol Etkileşim. 2018; 279 :145-158. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      27. El-Agamy SE, Abdel-Aziz AK, Wahdan S, Esmat A, Azab SS. Astaksantin, deneysel sıçan modelinde doksorubisin kaynaklı bilişsel bozukluğu (kemobeyin) iyileştirir: oksidatif, enflamatuar ve apoptotik makineler üzerindeki etki. Mol Neurobiol. 2018; 55 (7):5727-5740. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      28. Schreiber A, Rousselle A, Becker JU, von Mässenhausen A, Linkermann A, Kettritz R. Nekroptoz NET oluşumunu kontrol eder ve kompleman aktivasyonuna, endotelyal hasara ve otoimmün vaskülite aracılık eder. Proc Natl Acad Sci US A. 2017; 114 (45):E9618–E9625. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      29. Wang J. Doku hasarı ve onarımında nötrofiller. Hücre Dokusu Arş. 2018; 371 (3):531–539. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      30. Dickinson CM, LeBlanc BW, Edhi MM, Heffernan DS, Faridi MH, Gupta V, Cioffi WG, O'Brien X, Reichner JS. Leukadherin-1, kritik hastalardaki nötrofillerin aracılık ettiği endotelyal bariyer hasarını iyileştirir. J Yoğun Bakım. 2018; 6 : 19. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      31. Han JH, Lee YS, Im JH, Ham YW, Lee HP, Han SB, Hong JT. Astaksantin, sinyal dönüştürücünün ve transkripsiyon 3 yolunun aktivatörünün inaktivasyonu yoluyla lipopolisakkarit kaynaklı nöroinflamasyonu, oksidatif stresi ve hafıza fonksiyon bozukluğunu iyileştirir. Mart Uyuşturucu. 2019; 17 (2):E123. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      32. Tominaga K, Hongo N, Fujishita M, Takahashi Y, Adachi Y. Astaksantin'in cilt bozulması üzerindeki koruyucu etkileri. J Clin Biochem Nutr. 2017; 61 (1):33–39. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      33. Grimmig B, Kim SH, Nash K, Bickford PC, Douglas Shytle R. Astaksantin'in nöroprotektif mekanizmaları: yaş ve nörodejenerasyonda bilişsel işlevin korunmasında potansiyel bir terapötik rol. Gerobilim. 2017; 39 (1):19–32. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      34. Zhou LP, Gao M, Xiao ZM, Zhang J, Li XM, Wang AM. Bir sıçan sepsis modelinde astaksantin'in çoklu organ hasarına karşı koruyucu etkisi. J Surg Arş. 2015; 195 (2):559–567. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      35. Chu M, Zhou MY, Jiang CH, Chen X, Guo LK, Zhang MB, Chu ZY, Wang YD. Staphylococcus aureus fenolde çözünür modülinler a1-a3, HMGB1/TLR4/NF-κB sinyal yolunu inhibe etmek için yeni ücretli benzeri reseptör (TLR) 4 antagonistleri olarak işlev görür. Ön İmmünol. 2018; 9 :862. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      36. Whitcher JP, Srinivasan M, Upadhyay MP. Kornea körlüğü: küresel bir bakış açısı. Dünya Sağlık Örgütü Bülteni. 2001; 79 (3):214–221. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      37. Kvarnhammar AM, Cardell LO. İnsan eozinofillerinde model tanıma reseptörleri. İmmünoloji. 2012; 136 (1):11–20. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      38. Redfern RL, McDermott AM. Oküler yüzey hastalığında geçiş ücreti benzeri reseptörler. Exp Göz Arş. 2010; 90 (6):679-687. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      39. Pearlman E, Sun Y, Roy S, Karmakar M, Hise AG, Szczotka-Flynn L, Ghannoum M, Chinnery HR, McMenamin PG, Rietsch A. Oküler yüzeyde konak savunması. Int Rev İmmünol. 2013; 32 (1):4–18. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      40. Bourgeois C, Kuchler K. Mantar patojenleri-toll benzeri reseptörler için tatlı ve ekşi bir tedavi. Ön Hücre Mikrobiol Enfeksiyonu. 2012; 2 :142. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      41. Mnich ME, van Dalen R, Gerlach D, Hendriks A, Xia GQ, Peschel A, van Strijp JAG, van Sorge NM. C tipi lektin reseptörü MGL, benzersiz Staphylococcus aureus ST395 duvar teikoik asidinde N-asetilgalaktozamin'i algılar. Hücresel Mikrobiyol. 2019; 21 (10):e13072. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      42. Leal SM, Jr, Cowden S, Hsia YC, Ghannoum MA, Momany M, Pearlman E. Aspergillus fumigatus keratitinin patogenezinde Dectin-1 ve TLR4 için farklı roller. PLoS Patog'u. 2010; 6 :e1000976. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      43. Sun L, Chen C, Wu JY, Dai CY, Wu XY. TSLP ile aktive olan dendritik hücreler, Aspergillus fumigatus keratitinde T yardımcı tip 2 inflamasyonunu indükler. Exp Göz Arş. 2018; 171 :120–130. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      44. Weindl G, Wagener J, Schaller M. Mantar enfeksiyonu sırasında mukozal bariyerin aksesuar bağışıklık hücreleri ile etkileşimi. Int J Med Mikrobiyol. 2011; 301 (5):431–435. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      45. Mukwaya A, Lennikov A, Xeroudaki M, Mirabelli P, Lachota M, Jensen L, Peebo B, Lagali N. Zamana bağlı LXR/RXR yol modülasyonu, inflamatuar korneal neovaskülarizasyonda kapiller yeniden şekillenmeyi karakterize eder. Damarlanma. 2018; 21 (2):395–413. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      46. Cheng M, Lin J, Li C, Zhao WY, Yang H, Lv L, Che CY. Wedelolactone, Aspergillus fumigatus keratitinde IL-1β olgunlaşmasını ve nötrofil infiltrasyonunu baskılar. Int İmmünofarmakol. 2019; 73 :17–22. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      47. Li MY, Sun L, Niu XT, Chen XM, Tian JX, Kong YD, Wang GQ. Astaksantin, NF-κB ve MAPK sinyal yollarını inhibe ederek Channa Argus'ta lipopolisakarit kaynaklı inflamatuar yanıtı korur. Balık Kabuklu Deniz Ürünleri İmmünol. 2019; 86 :280–286. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      48. Zheng D, Li Y, He L, Tang YM, Li XP, Shen QY, Yin DL, Peng Y. Astaksantin'in farelerde fetal alkol spektrum bozukluğu üzerindeki koruyucu etkisi. Nörofarmakoloji. 2014; 84 :13–18. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
      49. Zhang XS, Lu Y, Wu Q, Dai HB, Li W, Lv S, Zhou XM, Zhang X, Hang CH, Wang J. Astaksantin, öncelikle sirtuin 1'i artırarak ve Toll benzeri reseptör 4'ü inhibe ederek subaraknoid kanama hasarını hafifletir. sinyal yolu. FASEB J. 2019; 33 (1):722–737. [ PubMed ] [ Google Akademik ]

      Yorum yap

      Hazırlanıyor...
      X