Duyuru

Collapse

Devamını görüntüle
See less

Sedir, Cedrus libani

Collapse
X
  • Filtrele
  • Zaman
  • Göster
Hepsini Sil
new posts

  • Sedir, Cedrus libani

    Antikanser aktiviteye sahip Cedrus deodara kök ağacından kimyasal olarak standartlaştırılmış izolatlar

    Shashank K Singh1, M Shanmugavel , Himani Kampasi , Reena Singh , DM Mondhe , J Madusudana Rao , MK Adwankar , AK Saxena , GN Gazi
    Bağlantılar genişletmekSoyut


    Cedrus deodara'nın gövde ağacından lignanları içeren bir izolat "CD lignan karışımı", (-)-wikstromal (%75 - 79), (-)-matairesinol (%9 - 13) ve benzilbütirolaktol (%7 - 11) içeriyordu ve insan kanser hücre hatlarına karşı in vitro sitotoksisitesi için incelenmiştir. CD lignan karışımının in vivo antikanser aktivitesi, farelerde Ehrlich ascites karsinoma ve kolon karsinomu (CA-51) modelleri kullanılarak incelenmiştir. Etkisi ayrıca, etki şekline ilişkin fikir edinmek için anneksin V bağlanması, hücre içi kaspazlar ve DNA parçalanması üzerinde de incelenmiştir. In vitro sitotoksisite çalışmaları, 10, 30 ve 100 mikrog/mL'de meme, serviks, nöroblastom, kolon, karaciğer ve prostat gibi farklı dokulardan çeşitli kanser hücre hatlarına karşı önemli doza bağlı etkiler göstermiştir. IC (50) değerleri 16.4 ng/mL ile 116 arasında değişmiştir. Hücre hattına bağlı olarak 03 mikrog/mL. CD lignan karışımının IC50 (50) değerlerinin karşılaştırmalı verileri, CD lignan karışımında mevcut olan (-)-matairesinol, (-)-wikstromol gibi tek tek moleküllere kıyasla sinerjistik bir etki gösterdi. CD lignan karışımı, CNS hücre hatları üzerinde en belirgin etkiye sahipti ve bunu kolon izledi. Ehrlich ascites karsinoma ve CA-51 ile gözlenen tümör regresyonu, CD lignan karışımı 300 mg/kg, Ehrlich ascites karsinom modelinde dokuz gün boyunca IP ve 400 mg/kg verildiğinde sırasıyla %53 ve yaklaşık %54 olmuştur, CA-51 modelinde aynı dönem için IP. Sırasıyla 22 mg/kg ve 20 mg/kg'da 5-florourasil ile karşılaştırılabilirdi. 10, 30 ve 100 mikrog/mL'de CD lignan karışımı, anneksin V pozitif HL-60 hücrelerinin yüzdesini kontrole (%1.04) kıyasla %1.9 - 17.18'e yükseltti. K562 hücrelerinde 10, 30 veya 100 mikrog/mL'de CD lignan karışımı ve staurosporin (1 mikroM) sırasıyla %9.13, %11.38, %17.22 ve %28.07 hücre içi kaspaz aktivasyonu gösterdi. 24 saatlik inkübasyondan sonra HL-60, K562 (30 mikrog/mL ve 100 mikrog/mL) ve MOLT-4 hücrelerinde (30 mikrog/mL) CD lignan karışımı ile tedavi için ayrı bir DNA merdivenleme modeli gözlemlendi. DNA hücre döngüsü analizi, 10, 30 ve 100 mikrog/mL'deki CD lignan karışımının, kontrol ile karşılaştırıldığında hipodiploid (alt G(1) fazı) hücrelerinin içeriğini arttırdığını gösterdi (%2.55, 5.4 ve 6.25'e karşı %0.27). Mevcut çalışma, CD lignan karışımının insan kanser hücre hatlarına karşı sitotoksik potansiyele sahip olduğunu göstermektedir. İn vivo olarak tümör regresyonunu indükleme yeteneğine sahiptir. Annexin V pozitif hücreler tarafından belirtildiği gibi apoptozu indükler, hücre içi kaspazların indüklenmesi,

    Fitokimyasal analiz ve laboratuvar ortamında biyolojik aktivitenin değerlendirilmesi
    Herpes simpleks virüsü tip 1'e (HSV-1) karşı Cedrus libani Zengin.

    Monica Rosa Loizzo'nun fotoğrafı. Antoine Saab B , Rosa Tundis a , Giancarlo A. Statti a ,Ilarya lamba nti C , Francesco Menichini a , Roberto Gambari NS ,Jindrich Cinatl e , Hans Wilhelm Doerr

    Soyut
    Cedrus libani Lübnan'da farklı enfeksiyon hastalıklarının tedavisi için geleneksel tıp olarak yaygın olarak kullanılmaktadır. İçindeBu çalışmada, odun esansiyel yağı ve konilerin GC-MS ile analiz edilen fitokimyasal bileşimini bildirdik velea veset ano lekstra rac ts.NS ana ncom pon velilerile ilgili ah desini ent ialsıvı yağ NS o ah alo l( % 22.50 ), B -himachalen(21.9 0%),ve a -himachalen (%10.50). Yapraklar etanol özü, yüksek bir germakren içeriği ile karakterize edildi NS (29.4 % 0). NSelde edilen aynı ekstrakt koniler esasen ycontai ned a -pinen (%51.0) ve B -myrce ne(%13.0) .Ayrıca, özleri, uçucu yağı ve tanımlanmış bileşikleri araştırdık. laboratuvar ortamında karşı antiviral faaliyetlerherpes simpleks virüsü tip 1 (HSV-1). Sitotoksisite, Vero hücrelerinde MTT tahlili ile değerlendirildi. Koniler ve yapraklar etanolözler, IC ile ilginç bir etkinlik sergiledi 50 0,50 ve 0,66mg/ml, sırasıyla sitotoksik olmayan konsantrasyonda.Uçucu yağ test edildiğinde karşılaştırılabilir bir aktivite bulundu (IC 50 ile ilgili 0,4 4mg/ ml). r 2007 Elsevier GmbH. Her hakkı saklıdır

    Tanıtım
    Herpes simpleks virüsü (HSV), tek bir büyük çiftson derece geniş olan sarmal DNA zarflı virüs-insan popülasyonunda yayıldı. Birgeniş hastalığı etkeni es,g aralığıgingivosto gelen Matitiskeratokonjonktivit, genital hastalık, ensefalit veal oinf vb iyonile ilgili Yeni bor nve immu noc omp romi sedpa bağlantı nt s(Wh o le yet al .,19 98). Af te rinci ePR im ar yiçinde fe CTI üzerinde ,HS Vte nd sile pe RSI stiçinde inci eNE ur üzerindeile ilgili inci ega ng li a.Re AC TIV en io nile ilgili la te ntHS V,wh ichNS çok ryeş mm iledu ri nginci ede fic yani nc yile ilgili im mu sirke yca bize estekrarlayan herpes enfeksiyonu.Asiklovir (ACV), valasiklovir, famsiklovir ve cido-fovir, HSV enfeksiyonunun tedavisi için kullanılmıştır.

    Pek çok gelişmekte olan ülkede geleneksel tıphala sağlık hizmetlerinin temel dayanağı ve ilaçların çoğuve kullanılan kürler dan geliyorum Bitki s.Geleneksel ilaçlariçin farmasötik ürünlerde kullanılmak üzere sömürülmüştür.yeni ve etkili çareler veya birçok kişinin tedavisinde kullanım içinyaygın ve bazı yaygın olmayan durumlar. C. libani A. Rich. (Cedar of Lebanon) exists naturallyAlaouite Dağları'nda, Suriye'de, Toros Dağı'ndas içinde ta ,içinde Tu rk ey ,bir Diçinde inci eCo ast alMo un TA içinde sile ilgili Lübnan n 1050 ve 1925 arasındadenizin üzerinde m. Bilişim TeknolojiNSrec entl ydes beşik edbu tcon esve lea vesile ilgili C. liba ni pos sesskarınca imik rob ialivit y hareket(Di gr aket al .,19 99).Fu r'inci er mor e,inci eeş ne sile ilgili C. li ba ni Poz ses skarınca i-anti- için ülserojenik ilaçlar Helikobakter pilori aktivite(Yeşilada et al., 1999). Antimikrobiyal aktivite,köklerinden elde edilen reçinelerin etanol özü vesapları C. libani da araştırıldı. Sonuçlar açıklandıo C. libani reçineler test edilenlere karşı oldukça etkilidirmikroorganizmaların büyümelerini engelleyerekex te nt(Ki zi let al .,20 02). th epr es tr tst ud ywa sundert aken içinyatırım yapNS bitki kimyasalı lkompo sition ve laboratuvar ortamında tarafından HSV-1'in inhibisyonu C. libani ve ha bir lex tr ac tsde ri vedfr omeş ne sbir DLea ettik sbir Dodundan elde edilen uçucu yağ.

    Bitki materyali
    Zengin. NSödemeli edüzerinde Hadath eljubi-Tan Ourine Rezerv(Lübnan-yok ),içinde hayır ve mbe r20 03 .Vo uc o rsp ec ime nsbiz yenidenau inci ent ic at edbo ta ni ca llytarafından Pr arasında .S. Sa fi,Bio lo gyBölüm, Fen Fakültesi II, Lübnan Üniversitesisi tybir Dde po si te diçinde inci eCh em olduğunu tr yDe pa rt beni ntHerbaryum, Fen Fakültesi II, Lübnan Üniversitesi

    Kimyasallar
    ACV, B -mirsen ve a -pinen satın alındıSigma-Aldrich, Münih, Almanya.

    Uçucu yağ ve özler

    Bitkinin taze kısımları 7 gün oda sıcaklığında hava ile kurutulmuştur.sıcaklık . toplam 200g odun gönderildihidro damıtma için siyon3h kullanarak a Cleven ger-tipi eappa ra-tü (Clevenger, 1928). Uçucu yağ kurutuldunem izlerini gidermek için susuz sodyum sülfat(%2 a/a).kuru dlea ves (100g) ve kurutulmuş koniler (100g) vardıküçük parçacıklar halinde ince ufalanmış ve %95 oranında ıslatılmış.

    Analiz edilebilir A Fis on (Term oFin iga n,San Jose, CA) mod elGK 80 00ga sch ro ma tog ra phiçinde te RFA ce dile a Fi çok nsmodel MD 800 dört kutuplu kütle spektrometresi emıntresi US kullanımı. s ed ilic agaz chr oma to-grafik kapiler kolon, bir MEGA SE 54 (metilfenil polisiloksan es), 25m  0.2 5mm kimlik ve d 0.25mmil minci ic kn es s.th eo reklampr es su reciile eca ilgili in s(h el iu m)wa s50kPa ( 7.2P.s.ben.).th eiçinde je ct veyabir Dgaz kromatografisi için dedektör sıcaklıkları25 0bir D30 0 1 C, özel olarak. NSsütun fırıntem -peratu re lineer olarak 40'tan artırıldı(4 için tutuldudk)200'e 1 C (10 için tutuldudk .) 10'da 1 C/dk. iyonlaşmamo dewa sEl ec trIm pact( EI )(7 0eV).İçinde inciinme aralığı, tarama seçimi üzerinde seçilmiş50 ve 700amu GC/MS sistemi emoper olduğu yedi yc lib. Fis on ,rmoFin zenci n,San Jose, CA) NIST ilebulunan tüm türevleri tanımak için kütüphane C. libani etanol özleri ve uçucu yağ.

    Hücre kültürü
    Mo nk eykidney ce llsatır e(V er o)(Bir TCC :C CL81 ,Ma na ss olarak ,VA) biz yenidencu ltu yeniden dNS 37 1 %5 CO2'de C 2 En mo sp onu eiçinde Ea gl e endak IMU mes se nti arkben di um(ME M),sup ple erkekler tedile birlikte %10 fet albov ineser um( FBS ),2mm L -g lu ta min e,10 0u/m lpe ni ci lli nbir D100 m g/ml streptomisin. Hücreler deneyler için kullanıldı5 gün sonra %100 birleşimde

    Sonuçlar ve tartışma
    Uzun zamandan beri şifalı bitkiler viral enfeksiyonlar dahil birçok enfeksiyon hastalığının tedavisinde kullanılmaktadır. Buna göre, çok sayıda sentetik ve bitki türevli anti-HSV ilacı birkaç çalışmada tanımlanmıştır (Ferrea ve diğerleri, 1993; Bourne ve diğerleri, 1999; Ikeda ve diğerleri, 2000). Mevcut araştırmada, rapor ettik, ilk kez, odun esansiyel yağı ve koni ve yapraklarının antiviral aktivitesi, fitokimyasal analizle desteklenen C. libani'den etanol ekstreleri. Odun esansiyel yağının GC/MSanalizi 13 bileşiğin varlığını ortaya çıkarırken, sırasıyla koni ve yaprak etanol özü için 19 ve 36 tanımlanmıştır (Tablo 1). Yaprakların etanol özütü, literatürde anti-mikrobiyal seskiterpen olarak bilinen ana bileşik isgermacrene D'yi (%29.40) içerir (Juliani ve diğerleri, 2002). Tanımlanan diğer bileşikler, 1-epi-kübenol (%6.30), trans-a-bisabolen (%5.90), b-karyofilen (%5.60), d-kadinen (%5.60) ve g-muurolen (%4.83) idi. Üzerinde

    Konilerden elde edilen aksine etanol özü varlığı ile karakterize edildi
    a-pinen (%51.0),B-mirsen (%13,0), 7,13-abietadien (%3,20), terpino-lene (%3,10) ve limonen (%2,25). Himachalol (%22.50),B-himachalen (%21.90) ve a
    -himachalene(%10.50) odun esansiyel yağındaki en karakteristik bileşiklerdi. Uçucu yağlar geleneksel tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır. Diğerleri arasında antibakteriyel, antifungal, immünomodülatör, antiinflamatuar ve antiromatizmal aktiviteler tanımlanmıştır (Saller ve diğerleri, 1995; Reichling, 2001). Şimdiye kadar, uçucu yağların virüsler veya viral enfeksiyonlar üzerindeki etkileri hakkında çok az bilgi vardır. Son zamanlarda, farklı bitki kaynaklarından çeşitli uçucu yağların yanı sıra uçucu yağların çeşitli bileşenlerinin anti-herpes aktivitesi gösterildi (Bourne ve diğerleri, 1999; Benencia ve Courreges, 1999; DeLogu ve diğerleri, 2000; Schuhmacher ve diğerleri. , 2003). bizim çalışmamızda C. libani uçucu yağ ve etanol özleri, HSV-1 ile enfekte olmuş Vero hücrelerine karşı araştırılmıştır. Sonuçlar Tablo 2'de özetlenmiştir. Sitotoksisitenin değerlendirilmesi, potansiyel bir antiviral ajanın değerlendirilmesinin önemli bir parçasıdır çünkü faydalı bir yağ, öz veya bileşik seçici olmalıdır. hücreselmetabolizma üzerinde çok az etkisi olan veya hiç olmayan virüse özgü süreçler için. Vero hücrelerinde TC 50 ile ilgili C. libani odun esansiyel yağı ve yapraklar ve koni etanol özleri 0.87 ile 1.92mg/ml arasındaydı. Konilerden ve yapraklardan etanol özleri IC ile HSV-1 replikasyonunu inhibe etti 50 0,50 ila 0,66 mg/ml arasında değişen değerler. Özellikle, yapraklardan elde edilen ekstrakt, 2.91'lik bir TI ile antiviral aktivite gösterdi. Fitokimyasal analiz, ana bileşenlerinin C. libani koni özü iki monoterpendir: a -pinen ve B -mirsen. Khan ve diğerleri (2005), HSV-1'e karşı test edilen asisoborneol gibi bazı monoterpenlerin, aşağıdakileri içeren bir mekanizma ile virüsü çok etkili bir şekilde inaktive ettiğini bildirmiştir.

    Viral polipeptitlerin glikozilasyonunun inhibisyonu.
    Aynı zamanda, 1,8-sineol ve borneol (izoborneolün bir stereoizomeri) glikosilasyonu inhibe etmedi, fakat viral adsorpsiyonu etkilemeden viral replikasyonu tamamen inhibe etti (Armaka ve diğerleri, 1999). 0.1mg/ml için antiviral aktivitede değerlendirilen a-Pinene ve b-mirsen, antiviral aktivite göstermedi. Koni etanol ekstraktının HSV-1'e karşı önemli aktivitesi, en bol bulunan iki bileşiğin hareketsizliği ile ilgili olarak, bu ekstraktta ek antiviral bileşenlerin varlığını düşündürür. Bu sonuç, koni etanol ekstraktının diğer bileşenleri tarafından indüklenen sinerjik bir etkinin göstergesi gibi görünüyor. Sonuç olarak, bu araştırmada, odun esansiyel yağının fitokimyasal bileşimini ilk kez rapor ettik. Antiviral test, HSV-1 büyümesinin C. libani tarafından kısmen inhibe edildiğini gösterdi. C. libani'nin antiviral aktivitesinin tam mekanizması bilinmemektedir ve diğer aktif bileşikleri ve etki yolunu belirlemek için daha fazla araştırma yapılmalıdır.

    Rıza

  • #2
    Cedrus Libani'den izole edilen 2-Himachelen-7-ol'ün Antikanser ve Antiinflamatuar Aktivitelerinin In Vitro ve In Vivo Değerlendirilmesi

    Andree Elias , 1 Wassim N. Shebaby , 1 Bilal Nehme , 1 Wissam Faour , 2 Bassem S. Bassil , 3 Joelle El Hakim , 1 Rita Iskandar , 1 Nahia Dib-Jalbout , 1 Mohamad Mroueh , 4 Costantine Daher , 1 ve Robin I Tablo 1
    Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
    Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır . İlişkili Veriler


    Soyut
    Cedrus libani , Lübnan, Suriye ve Türkiye'nin Akdeniz dağlarına özgü görkemli, yaprak dökmeyen bir ağaçtır. Bu çalışmada, koyu renkli bir yağ olarak C. libani yağı özü (CLOE) üretmek için ağaç öz odunu heksan kullanılarak ekstrakte edildi. CLOE'nin GCMS analizi, 2-himachalen-7-ol (7-HC)'nin en bol (%40) olduğu 30'a kadar bileşik tanımladı. 7-HC, kolon kromatografisi kullanılarak izole edildi ve beyaz kristalli katının kimliği, NMR spektroskopisi ve X-Işını Kristallografisi ile doğrulandı. 7-HC beyin (SF-268, IC de dahil olmak üzere çeşitli insan kanser hücre çizgilerine karşı güçlü sitotoksik aktivite gösterdi 50 (HT-29, Ic 8.1 ug / mL) ve kolon 50 10.1 ug / mL, Caco-2 IC 50 9.9 ug / mL) yumurtalıklı (Sk-OV-3, IC 50 > 50 μg/mL) hücreler en dirençli olanlardır. Bununla birlikte, HT-29, Cisplatin'e direnç gösterirken, 7-HC, 8-10 kat daha güçlüydü. 7-HC ve Cisplatin ile birlikte tedavi, SF-268, HT-29 ve Caco-2 hücrelerine karşı önemli bir sinerjistik anti-proliferatif etki gösterdi. 7-HC ayrıca, sıçanlarda formalin kaynaklı pençe ödeminde önemli anti-inflamatuar etki sergiledi. Western blot analizi, 7-HC'nin izole edilmiş sıçan monositlerinde LPS ile indüklenen COX-2 protein ekspresyonunun doza bağlı inhibisyonunu gösterdiğini ortaya koydu. Mevcut çalışma, 7-HC'nin umut verici antikanser ve anti-inflamatuar aktivitelere sahip olduğunu ve kanser tedavisinde öncü bir molekül olarak hizmet edebileceğini göstermektedir.

    Konu terimleri: Kemoterapi, Toksiko Tanıtıtım
    Phytomedicine, çeşitli bitki türevli bileşiklerin 1 pro-apoptotik ve anti-proliferatif aktivitelerinden dolayı, çeşitli kanser türlerinin tedavisinde ve kemoprevensiyonunda yoğun bir şekilde kullanılmıştır . Mevcut antikanser ilaçları arasında, 1940 ve 2002 yılları arasında kanser tedavisi için onaylanan ilaçların %60'ından fazlası ya doğal ürünler ya da doğal ürünlere dayalı formülasyonlar olmuştur; diğer herhangi bir ilaç geliştirme alanından daha yüksek bir oran 2 .

    Lübnan Sediri ( Cedrus libani, C. libani ), Lübnan ve Suriye'nin Akdeniz dağlarının yanı sıra Türkiye'nin Toros Dağları'na özgü bir kozalaklı ağaç türüdür 3 . Ait Etnobotanik ve geleneksel kullanımları Cedrus onun esansiyel yağ geleneksel tıpta kullanılan sayede cinsi izleri antik çağlara kadar geri 4 . Birkaç Cedrus türünden elde edilen yağların fitokimyasal analizi, steroidlerin, prosiyanidinlerin ve terpenoidlerin ana bileşenler olduğunu ortaya çıkardı 5 , 6 . Bu fitokimyasalların, antikanser 7 , anti-inflamatuar 8 gibi çok çeşitli biyolojik aktivitelere sahip olduğu gösterilmiştir.ve antimikrobiyal etkiler 9 . C. libani'nin odun yağının, K562 insan kronik miyeloid lösemi hücrelerine ve ayrıca çoklu ilaca dirençli lösemi hücrelerine karşı güçlü antitümör etkisine sahip olduğu gösterildi 10 , 11 . Ek olarak, C. libani odun yağı, fetal globin genlerinin 10 ekspresyonunu uyardığı bilinen terminal fazda eritroid farklılaşmasına neden oldu . Dikkat çekici bir şekilde, yağ çapraz direnç göstermedi ve bu nedenle bu fenomen , ilaca dirençli lösemi ve dirençli tümörlerin tedavisinde kullanılan ajanlar olarak formüle edilebilecek umut verici bir doğal aktif bileşik kaynağı olarak C. libani yağlarının itibarını yükseltiyor.10 .

    Enflamasyon, istilacı patojenleri ortadan kaldırmak ve iyileşme sürecini başlatmak için bir konak savunma mekanizmasıdır, ancak enflamatuvar mediatörlerin aşırı üretimi, neoplastik transformasyona ve malignitelerin ilerlemesine yol açan kronik enflamasyonla birlikte konak hücrelerde hasara neden olabilir 12 . Bir inflamatuar yanıt sırasında, reaktif oksijen türleri (ROS), reaktif nitrojen türleri (RNS), tümör nekroz faktörü-α (TNF-α) ve PGE 2 13 gibi pro-inflamatuar biyobelirteçler aşırı derecede üretilir . Bu bağlamda, özellikle nitrik oksit RNS (NO), indüklenebilir nitrik oksit sentazı (iNOS) oluşturulmaktadır 14 ve PGE 2 COX-2 ile arakidonik asit metabolitlerinin üretilmiştir 15 . PGE 2anormal hücre bölünmesini arttırmak, apoptozu azaltmak, anjiyogenezi artırmak ve tümör invazivliğini ve metastazı 16 teşvik ettiği gösterilmiştir . Diğer çalışmalar, COX-2'nin aşırı ekspresyonunun, meme, deri, kolon, akciğer ve prostat 17 dahil olmak üzere çeşitli epitelyal hücre kaynaklı kanser türlerinin gelişimi ile yüksek oranda ilişkili olduğunu göstermiştir . Ayrıca, indüklenebilir COX-2 18'in nonsteroidal antiinflamatuar ilaçlar tarafından inhibisyonu, anjiyogenezde bir azalmaya neden olmuştur, dolayısıyla bunların kullanımı tümör progresyonunun ve metastazın inhibisyonuna yol açabilir 19. Genel olarak, steroidler ve steroid olmayan antienflamatuar ilaçlar, iskemik olayların önlenmesi ve ağrı, ateş ve iltihaplanma tedavisi için etkili ilaçlar olarak kabul edilir. Bununla birlikte, bu ilaçlar, gastrointestinal veya kardiyovasküler komplikasyonlar 20 geliştirme açısından önemli bir risk ile ilişkilidir . Bu nedenle, COX-2 aktivitesinin veya ekspresyonunun seçici olarak hedeflenmesi, önemli ölçüde klinik öneme sahiptir.

    Laboratuvarımızdaki ön çalışmalar, C. libani odun yağının birkaç insan kanser hücre hattına karşı güçlü antikanser aktivite sergilediğini gösterdi . Ham petrolün analizi, 2-himachalene-7-ol'ün (himachalol; 7-HC), özütün yaklaşık %40'ını oluşturan ana bileşen olduğunu ortaya çıkardı. Bu çalışma, 7-HC'yi izole etmeyi ve çeşitli kanser hücre dizileri üzerindeki antikanser aktivitesini araştırmayı ve ayrıca in vivo ve in vitro anti-inflamatuar özelliklerini değerlendirmeyi amaçlamaktadır .

    Git: Sonuçlar

    2-himachelen-7-ol'ün ekstraksiyonu ve karakterizasyonu
    C. libani ahşabı, sıcak heksan kullanılarak özütlenerek C. libani Yağ Özü, CLOE) koyu bir yağ (%1.95 verim) halinde elde edildi. CLOE'nin GCMS analizi (Tablo 1) yağ ekstraktının yaklaşık %83'ünü oluşturan 30 bileşik tanımladı ve kalan %17, tanımlanamayan birkaç bileşik oluşturdu, bu sayede hiçbirinin %2'den fazla mevcut olmadığı bulundu. Bununla birlikte, özellikle 7-HC (Şek. 1) CLOE'nin %40'ı gibi şaşırtıcı bir konsantrasyonda mevcut olduğu gösterildi. 7-HC'yi izole etme girişiminde, yağ daha sonra silika jel bazlı kolon kromatografisine tabi tutuldu, bu sayede üç fraksiyon (F1, F2 ve F3) heksan:etil asetatın bir gradyan mobil fazı kullanılarak elde edildi. 7-HC, TLC ile gösterildiği gibi 8:2 heksan:etil asetat kullanılarak F2 içinde ayrıştırıldı, burada plakalar anisaldehit ile boyandı ve seskiterpen, Rf değeri 0.78 olan pembe bir nokta olarak göründü . Seskiterpen daha sonra beyaz kristalli bir katı (%97 saflık; Şek. 1). Ana bileşiğin kimliğini ve yapısını NIST11 ve Wiley9 kütle spektral veri tabanı kullanılarak GCMS analizi ile 2-himachelene-7-ol gibi yoluyla doğrulanmıştır 13 (Ek Şekiller NMR spektroskopisi S1 - S7 ). tablo 1


    CLOE'nin Gaz Kromatografisi analizi.
    1 4.597 0.0692 β - Pinen
    2 14.73 2.9642 α-Himakalen
    3 15.83 3.1818 γ-Himakalen
    4 16.74 3.3695 β-Himakalen
    5 17.2 0.3641 Bütillenmiş Hidroksitoluen
    6 17.23 0.4236 Bütillenmiş Hidroksitoluen
    7 18.26 0.3495 1,1,2,2,3,3-Heksametilindan
    8 20.82 0.8447 4,4-Dimetil-3-(3-metilbut-3-eniliden)-2-metilenbisiklo[4.1.0]heptan
    9 22.18 0.841 δ-Himakalen
    10 23.24 40.2246 2-Himachalen-7-ol
    11 23.76 2.7206 1H-Benzosiklohepten
    12 25.53 7.4441 dodesil akrilat
    13 34.25 0.9166 (S)-Fenol, 2-metil-5-(1,2,2-trimetilsiklopentil)
    14 38.16 0.9471 dibütil ftalat
    15 53.48 0.2794 metil izopimarat
    16 53.66 0.5158 Abietadien-18-al
    17 54.69 0.4301 metil levopimarat
    18 55.48 0.125 metil abietat
    19 55.91 0.3668 tetrakozan
    20 57.02 0.5515 metil 2,7,13 - abietatrienoat
    21 57.08 0.3106 oktadekan
    22 57.8 0.3232 trikontametilsiklopentadekasiloksan
    23 57.97 0.1247 Eikozan
    24 58.76 0.2048 Eikozan
    25 59.48 2.7469 (Z)-9-Oktadesenamid
    26 60.1 0.2388 tetrakosametil-siklododekasiloksan
    27 65.36 2.3188 3β-Ergost-5-en-3-ol
    28 67.21 7.8082 gama sitosterol
    29 68.15 0,4482 (24 R)-Ergost-4-tr-3-bir
    30 70.49 1.37 Stigmast-4-tr-3-bir
    Ayrı bir pencerede aç
    Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı 41598_2019_49374_Fig1_HTML.jpg
    Ayrı bir pencerede aç
    Şekil 1
    7-HC'nin yapısı ve X-ışını kristal yapısı.

    7-HC'nin doza bağımlı in vitro sitotoksisitesi
    7-HC'nin sitotoksik etkisi, birkaç insan kanser hücre hattı üzerinde incelenmiştir. Sonuçlar gösterdi (Şek. 2) 25 ug/mL'de proliferasyonun neredeyse tamamen inhibisyonu ile SF-268, HT-29 ve Caco-2 hücre dizilerinde hücre hayatta kalmasında doza bağlı bir azalma. IC 50 dört kanseri hücre hatlarında 7-HC ve Sisplatin değerleri Tablo l'de sunulmuştur 2. Karşılaştırılabilir IC 50 7-HC ve Sisplatin değerleri SF-268 ve Caco-2 hücreleri için de gözlenmiştir. HT-29 Sisplatin için dayanıklılık sergileyen ancak bununla birlikte, 7-HC 8-10 kat daha güçlü bir IC oldu 50 9.1-10.1 ug / mL. SK-OV-3 hücreleri, bir IC ile tedaviye çok dirençli 50 değeri> 50 ug / mL.
    Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı 41598_2019_49374_Fig2_HTML.jpg
    Ayrı bir pencerede aç
    şekil 2
    7-HC'nin hücre sağkalımı üzerindeki sitotoksik etkisi. SF-268 ( A ), Caco-2 ( B ), HT-29 ( C ) ve Sk-OV-3 ( D ) hücreleri, 24 ve 48 saat boyunca çeşitli 7-HC konsantrasyonları ile işleme tabi tutuldu. Veriler, 3 deneyden elde edilen ortalama ± SEM olarak sunulmuştur. *P < 0.05'e karşılık . DMSO grubu. Tablo 2


    IC 50 (ug / mL), farklı insan kanser hücresi türlerine karşı 7-HC ve Sisplatin değerleri.
    24 saat 9,2 ± 0,21 13,9 ± 0,76 9,6 ± 1,40 16.7 ± 2.29 9,1 ± 0,38 >100 >50 >100
    48 saat 8.1 ± 0.29 5,9 ± 0,32 9,9 ± 0,45 9,3 ± 0,21 10.1 ± 0.36 78,8 ± 5,68 >50 >100
    Cisplatin ve 7-HC birlikte tedavisinin sinerjik etkisi
    7-HC ve Cisplatin'in birlikte tedavisinin 24 ve 48 saat boyunca dört hücre hattı üzerindeki etkisi incelendi (Tablo 3). Sonuçlar, Cisplatin ve 7-HC'nin en yüksek konsantrasyonlarda (sırasıyla 5 ve 10 μg/mL) birlikte tedavisinin, tek bir tedaviye kıyasla SF-268, Caco-2 ve HT-29 hücreleri üzerinde önemli bir sinerjistik sitotoksik etki uyguladığını göstermektedir. Her ilacın (Tablolar 4, ​,5).5). SF-268 hücrelerinin bu kombine tedaviye en duyarlı olduğu bulundu. Her iki ilacın sinerjistik inhibitör etkisi, Sk-OV-3 hücrelerinde gözlenmedi.

    Tablo 3

    7-HC, Cisplatin ve bunların kombinasyonlarının insan kanser hücresi sağkalımı üzerindeki etkisi.
    Cis (2.5) 90.1 ± 4.6 73,0 ± 1,5 89.8 ± 4.4 87.9 ± 3.1 92.6 ± 3.6 89.7 ± 2.8 97.9 ± 1.9 93,7 ± 1,7
    Cis (5) 79,0 ± 4,8 61,7 ± 3,3 68,3 ± 1,9 50,1 ± 2,9 88.9 ± 3.4 88.7 ± 2.3 95.6 ± 2.2 91.7 ± 1.8
    7-HC (5) 86,2 ± 2,9 80,1 ± 2,1 85,1 ± 4,1 87,3 ± 3,2 86.8 ± 3.7 89,6 ± 2,7 97.2 ± 2.8 99.1 ± 2.5
    7-HC (10) 43,7 ± 2,5 36,8 ± 2,4 49.7 ± 3.8 49.2 ± 3.4 46,5 ± 4,1 54,3 ± 3,0 97.4 ± 3.2 97.3 ± 2.3
    Cis (2.5) + 7-HC (5) 81,4 ± 2,4 57,3 ± 1,8 a,b 78,4 ± 2,1 74,6 ± 3,9 79,9 ± 2,5 82,2 ± 3,9 95.6 ± 1.5 89.4 ± 3.2
    Cis (2.5) + 7-HC (10) 35,3 ± 2,3 bir 12.4 ± 3.9 a,b 41,2 ± 2,5 bir 36,4 ± 2,8 bir 35,6 ± 3,9 bir 44,1 ± 2,8 a,b 93.9 ± 2.5 88,4 ± 4,1
    Cis (5) + 7-HC (5) 66,3 ± 3,2 a,b 44,1 ± 2,9 a,b 59,3 ± 4,3 b 50,9 ± 3,1 b 76,2 ± 2,8 bir 78.9 ± 3.8 94.0 ± 1.8 86,7 ± 2,6
    Cis (5) + 7-HC (10) 26,7 ± 1,9 a,b 7,7 ± 1,3 a,b 27,1 ± 2,6 a,b 23.4 ± 3.9 a,b 36,6 ± 2,2 bir 40,1 ± 3,5 a,b 92.8 ± 2.7 87.7 ± 2.8
    Değerler, üç bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± SEM olarak ifade edilir. Üst simge ' a ' ve/veya ' b ' olan ortalamalar, sırasıyla benzer dozlarda Cisplatin ve/veya 7-HC ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde (p < 0.05) farklıdır.

    Tablo 4
    7-HC ve sisplatin tedavisinin kombinasyon indeksi.
    Kombo 1: Cis (2.5) + 7-HC (5) 1,63 1.79 1.87 0.32
    Kombo 2: Cis (2.5) + 7-HC (10) 0.81 1.18 1.19 0.31
    Kombo 3: Cis (5) + 7-HC (5) 1.59 1.23 1.87 0.39
    Kombo 4: Cis (5) + 7-HC (10) 0.68 0.96 1.12 0,52
    Tablo 5
    Çeşitli inhibitör etkilerde ekstrapolasyonlu CI değerleri.
    Fa 0.05 0.1 0.15 0,2 0.25 0,3 0.35 0,4 0.45 0,5 0,55 0,6 0.65 0.7 0.75 0,8 0.85 0.9 0.95 0.97
    SF-268 4.5 3.3 2.8 2.4 2.2 2.0 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0,8 0.7 0,6 0,5
    kako-2 3.1 2.5 2.2 2.0 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 1.2 1.1 1.0 0.9 0.9 0,8 0.7 0,6 0,5
    HT-29 3.7 2.5 2.0 1.8 1.6 1.5 1.4 1.3 1.3 1.2 1.2 1.1 1.1 1.0 0.9 0.9 0.9 0,8 0.7 0,6
    SK-OV-3 0.04 0,3 0.9 2.5 5.6 11 21 40 73 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+ 99+
    Ayrı bir pencerede aç

    Sıçanlarda kronik inflamasyonun inhibisyonu
    7-HC, doza bağımlı olmayan bir şekilde kullanılan tüm konsantrasyonlarda sıçanlarda kronik iltihabı önemli ölçüde inhibe etti (Tablo 6). 100 mg/kg 7-HC dozu, %63.1 pençe ödemi inhibisyonu ile Diklofenak (10 mg/kg) ile karşılaştırılabilir etkiler göstermiştir. Artan 7-HC konsantrasyonlarının, LPS ile aktive olan sıçan periferik kan mononükleer hücrelerinde (PBMC) COX-2'nin protein ekspresyonu seviyesi üzerindeki etkisi araştırıldı. Western blot analizi (Şek. 3; kırpılmış Western Blot'lar), 7-HC'nin, kontrol grubuna kıyasla COX-2 ekspresyonunu belirgin şekilde inhibe ettiğini gösterdi (tam Western Blot'lar için lütfen Ek Şekiller S8 , S9 )'a bakın. 25 ve 50 µg/mL konsantrasyonlarda COX-2 protein indüksiyonunun önemli ölçüde baskılandığı gözlemlendi.

    Tablo 6
    7-HC intraperitoneal tedavinin sıçanlarda formalin kaynaklı kronik inflamasyon üzerindeki etkisi.
    Kontrol (DMSO) 1.25 ± 0.112 %0
    Diklofenak (10 mg/kg) 0,498 ± 0,067** %60,2
    7-HC (10 mg/kg) 0,740 ± 0,051** %40.9
    7-HC (25 mg/kg) 0,760 ± 0,123** %39.3
    7-HC (50 mg/kg) 0,304 ± 0,075* %75.7
    7-HC (100 mg/kg) 0,462 ± 0,121** %63.1
    *  Kontrolle ilgili olarak önemli fark ( p < 0.05).

    Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı 41598_2019_49374_Fig3_HTML.jpg
    Figür 3
    7-HC, sıçan monositlerinde (kırpılmış Western Blot'lar) LPS ile indüklenen COX-2 protein ekspresyonunu bloke etti. PMBC, tek başına araç kontrolü ile, tek başına LPS (100 ng/ml) ile veya 6 için LPS (100 ng/mL) ile stimülasyondan önce 30 dakika süreyle 5, 10, 25 veya 50 μg/mL 7-HC ile inkübe edildi. h ( n  = 3).

    7-HC'nin sıçan monositlerine karşı aktivitesi
    WST kullanarak 7-HC'nin sitotoksik etkisi (Şekil 1). 4) 6 saatlik tedaviden sonra izole monositler üzerinde test edildi. Sonuçlar, 2-himachalen-7-ol'ün 10 µg/mL, 25 µg/mL ve 50 µg/mL konsantrasyonlarda hücre sağkalımında sırasıyla sadece %7.7, %11.5 ve %12.7 azalmaya neden olduğunu ortaya koydu.
    Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı 41598_2019_49374_Fig4_HTML.jpg
    Şekil 4
    Tedaviden 6 saat sonra izole edilmiş sıçan monositlerine karşı WST kullanılarak 7-HC aktivitesi.

    Git: Tartışma
    CLOE'nin fitokimyasal analizi, seskiterpenlerin ana bileşenler olduğunu, 7-HC (%40), α-himachalen (%2.96), β-himachalen (%3.18) ve γ-himachalen'in (%3.37) ana bileşenler olduğunu ortaya koydu. Yukarıda bahsedilen seskiterpenlerin benzer bir kalitatif bileşimi daha önce Lübnan sedir ağacı yağında 21 rapor edilmişti . Bununla birlikte, bu çalışmada, CLOE'de bulunan α-himachalen, β-himachalene ve γ-himachalene yüzde bileşimi, daha önce bildirilen öz odun yağından daha düşüktü 21 . Bu niceliksel farklılık, coğrafi konum, nem, rakım seviyesi, toplama süresi, ekstraksiyon tekniği ve bitki yaşı gibi faktörlere bağlanabilir.

    Bu çalışmada, 7-HC'nin %97 saflıkta CLOE'den izolasyonunu sağlayan bir kromatografik prosedürü optimize ettik. Arıtılmış seskiterpen daha sonra çeşitli kanser hücrelerine karşı in vitro sitotoksik etkilerinin yanı sıra in vivo ve in vitro anti-inflamatuar aktivitesi açısından değerlendirildi. Sonuçlar, 7-HC'nin, belirli kanser hücre hatlarına karşı seçiciliği gösteren, Sk-OV-3 dışında test edilen tüm kanser hücrelerine karşı doza bağlı bir sitotoksisite uyguladığını gösterdi. Bu antikanser etkisi, CLOE'nin insan lösemi hücrelerine karşı daha önce bildirilen aktivitesinin 7-HC 11'e atfedilebileceğini düşündürmektedir.. Ek olarak, laboratuvarımızdaki daha önceki çalışmalar, yabani havuçtan izole edilen 7-HC'nin bir izomeri olan β-2-himachalene-6-ol'ün, birkaç insan ve murin kanser hücre hattına karşı güçlü antikanser aktivite gösterdiğini gösterdi 22 , 23 . β-2-Himachalene-6-ol'ün ayrıca farelerde 24 DMBA/TPA cilt karsinogenezine ve dimetilhidrazin kaynaklı kolon karsinogenezine karşı önemli bir anti-tümör teşvik edici etki gösterdiği bulunmuştur .

    En yaygın olarak kullanılan antineoplastik ajan olan sisplatin, antikanser aktivitesine DNA hasarı, apoptotik yolların aktivasyonu ve inflamasyon ve oksidatif stres 25 yoluyla hücrelere zarar verme dahil olmak üzere çeşitli sitotoksik mekanizmalar aracılığıyla aracılık eder . Mevcut sonuçlar, HT-29 hücreleri, Cisplatin (IC dirençli olduğunu göstermiştir 50  > 100 ug / ml ve 24 ve 48 saatte sırasıyla 78.78 ug / ml) 7-HC kuvvetli doza bağımlı anti-kanser aktivitesi sergilerken, (IC 50  = sırasıyla 24 ve 48 saatte 9.122 µg/mL ve 10.11 µg/mL). SK-OV-3 hücreleri, ancak 7-HC ve cisplatin tedavisinin hem (IC karşı dirençli olduğu gösterilmiştir 50 > 100 ug / mL). IC 50aynı kanser hücre dizileri üzerindeki Cisplatin değerleri literatür 26 , 27 ile uyumludur . İyileştirilmiş bir terapötik sonuç elde etme girişiminde, 4 hücre hattının tümü, 7-HC ve geleneksel antineoplastik ilaç Cisplatin'in bir kombinasyonuna tabi tutuldu (Tablo 3). İlaç Kombinasyon İndeksi (CI), yaygın olarak kullanılan Loewe katkı modeli ve CompuSyn yazılımı 28 kullanılarak belirlendi . Kısaca, 1'e eşit CI değerleri toplamsallığı, 1'in altındaki değerler sinerjiyi, 1'in üzerindeki değerler ise antagonizma 28'i gösterir . Tablo 4sinerjizme yol açan en çok arzu edilen kombinasyonların Kombinasyon 2: Cis(2.5) + 7-HC(10) ve Kombinasyon 4: Cis(5) + 7-HC(10)'a karşılık geldiğini göstermektedir. Ek olarak, Loewe modeli 28 tahmin eder (Tablo 5) 7-HC ve Cisplatin kombinasyonları ile %75 hücre inhibisyonuna (SF-268, Caco-2 ve HT-29) veya üzeri yol açan sinerjizmin meydana geleceği. Sonuçlar, yüksek bir 7-HC konsantrasyonundan (10 µg/mL) ve düşük bir Cisplatin konsantrasyonundan (2.5 µg/mL) oluşan kombinasyonların, sinerjistik yollar yoluyla önemli hücre inhibisyonunu indükleyeceğini ortaya koymaktadır. Böyle bir sinerjistik etki, kanserli hücrelere 25 karşı gücü korurken doz sınırlayıcı nefrotoksisiteyi ortadan kaldırarak Cisplatin'in olumsuz etkilerini azaltmada kullanılabilir . Tablo 4ayrıca dört ilaç kombinasyonunun hepsinin Sk-OV-3 hücre hattına karşı sinerjistik bir etki uyguladığını gösterir, ancak sinerjizm yoluyla hücre inhibisyonu %15'i geçmediği için bu sonuçlar önemsizdir. Literatürde rapor edildiği gibi, sinerjistik etkiler, SF-268, Caco-2 ve HT-29 hücre hatlarına 28 karşı Kombinasyonlar (2) ve (4) ile gözlemlendiği gibi önemli hücre inhibisyonu eşlik ettiğinde esas olarak arzu edilir .

    Her iki elde edilen kanıt önemli bir vücut in vivo ve in vitro çalışmalar seskiter, alkaloidler, fenol ve flavonoidler içeren bu bitki türevi özler, TNF-a, NF-KB dahil olmak üzere çeşitli iltihabik biyolojik belirteçler seviyelerini kontrol ederek, anti-enflamatuar aktivite gösteren rapor , NO, iNOS ve COX-2 29 . Siklooksijenaz-2 (COX-2), LPS veya sitokinler tarafından indüklenen önemli bir pro-inflamatuar enzimdir ve inflamasyon, maligniteler ve anjiyogenez ile ilişkili olduğu bulunmuştur 30. Bu nedenle, COX-2 proteini üzerinde inhibitör etkisi olan yeni bir bileşiğin belirlenmesi, iltihaplanma ile ilgili bozuklukların tedavisi için önemli bir gereklilik olarak kabul edilmektedir. Bu çalışmanın sonuçları, 7-HC'nin sıçanlarda kronik inflamasyona karşı önemli anti-inflamatuar aktiviteye sahip olduğunu göstermektedir. Kininler, prostaglandinler ve serotonin gibi çeşitli inflamatuar mediatörler, subplantar formalin enjeksiyonunun neden olduğu ödem oluşumunu açıklayabilir 31. Prostaglandinlerin artan sentezi, membran fosfolipidlerinden araşidonik asidin artan salınımına ve/veya COX-2'nin yukarı regülasyonuna bağlı olabilir. Western blot analizi, sıçan monositlerinin LPS tedavisinden sonra COX-2 üretiminin belirgin şekilde yükseldiğini gösterdi. Bununla birlikte, 7-HC'nin farklı dozlarının uygulanması, doza bağlı bir şekilde LPS tarafından COX-2'nin protein ekspresyonunu inhibe etti. Bu nedenle, 7-HC'nin anti-inflamatuar aktivitesine kısmen COX-2 ekspresyonunun baskılanması aracılık eder. Önceki raporlar ahşap türetilen himachalol, ortaya C deodara önemli ölçüde anti-alerjik bir aktivite sergiledi ve bir büyük anti-spazmodik bir bileşen olarak tespit edilmiştir 32. 7-HC'nin sıçan monositlerine karşı sitotoksik etkisinin, 10 µg/mL, 25 µg/mL ve 50 µg/mL konsantrasyonlarında hücre sağkalımında sırasıyla %7.7, %11.5 ve %12.7 azalma ile önemsiz olduğu gösterilmiştir. Bu, 7-HC'nin izole edilmiş sıçan monositleri üzerinde (seçilen konsantrasyonlarda) küçük bir sitotoksik etkiye sahip olduğunu gösterir. Bu sonuç aynı zamanda normal hücrelere göre kanser hücreleri üzerinde 2-himachalen-7-ol'ün seçiciliğini de desteklemektedir.

    Git: Çözüm
    C. libani uçucu yağı özütlendi ve GCMS ile analiz edildi, burada 2-himahkalen-7-ol (7-HC)'nin yağın %40'ını oluşturduğu bulundu. 7-HC, beyaz kristalli bir katı ve %97 saflık halinde seskiterpenler verecek şekilde silika jel kolon kromatografisi kullanılarak izole edildi. 7-HC, SF-268 (IC karşı kuvvetli sitotoksik aktivite gösterdi 50 -29 HT (IC 8.1 ug / mL), 50 10.1 ug / mL) ve Caco-2 (IC 509,9 μg/mL). Ek olarak, HT-29, Cisplatin'e direnç gösterirken, 7-HC 8-10 kat daha güçlüydü. 7-HC:Cisplatin (2:1 ve 4:1 oranı) kombinasyonları ile birlikte tedavi, SF-268, HT-29 ve Caco-2 hücrelerine karşı önemli bir sinerjistik anti-proliferatif etki gösterdi. 7-HC ayrıca sıçanlarda formalin ile indüklenen pençe ödeminde önemli anti-inflamatuar etki ve ayrıca izole edilmiş sıçan monositlerinde LPS ile indüklenen COX-2 protein ekspresyonunun doza bağlı inhibisyonu sergilemiştir. Mevcut çalışma, 7-HC'nin umut verici antikanser ve anti-inflamatuar aktivitelere sahip olduğunu ve kanser tedavisinde öncü bir molekül olarak hizmet edebileceğini göstermektedir.

    Git: Malzemeler ve yöntemler

    Genel deneysel prosedürler
    UV spektrumları, bir Shimadzu UV2450 spektrofotometresi kullanılarak kaydedildi. 1 , H, 13 ° C ve 2D NMR spektrumları, dahili bir referans olarak TMS kullanılarak bir Bruker Avanc3-400 MHz NMR spektrometresi veya Varian Mercury-300 NMR spektrometresi kullanılarak elde edildi. TLC analizi, silika jel plakaları (ACROS Organics, New Jersey, ABD) üzerinde gerçekleştirilmiştir. Kolon kromatografisi için silika jel 60 (230-400 göz veya 70-230 göz, 47 cm x 2.5 cm, ACROS organik, New Jersey, ABD) kullanıldı. GCMS analizi, kaynaşmış silika HP5-MS %5 fenil metil siloksan başlık sütunu (30 m x 0.25 mm id, film kalınlığı 0.25) ile donatılmış ve doğrudan MS'ye bağlanmış Hewlett Packard, HP6890 serisi kullanılarak gerçekleştirildi. ELIZA mikroplaka okuyucusu BioTek'ten (Winooski, VT, ABD) satın alındı.

    kimyasallar ve tepkimeler
    Dulbecco'nun modifiye edilmiş Eagle ortamı (DMEM) ve dimetil sülfoksit (DMSO), Sigma'dan (St. Louis, Missouri, ABD) satın alındı. PVDF membranları Pall Corporation'dan (Ann Arbor, MI, ABD) satın alındı. Aktin ve Cox-2 antikorları Abcam'dan (Cambridge, MA, ABD) satın alındı. HRP-bağlı ikincil antikorlar, Promega Corporation'dan (Madison, WI, ABD) satın alındı. ECL kiti Abcam'dan (Milton, Cambridge, İngiltere) satın alındı. Fetal bovin serum (FBS), penisilin-streptomisin, glisin, lizis tampon solüsyonu, fosfat tamponlu salin (PBS), bovin serum albümini (BSA), Tween 20 ® ile tris-tamponlu salin(TBST), HEPES tamponu, sodyum dodesil sülfat (SDS), kuyu plakaları, pentan, dietil eter, heksan, etil asetat, anisaldehit, etanol, paraformaldehit, tripan mavisi, Ficoll (Histopaque-1077). Kristal viyole, tripsin, d 6 -DMSO ve CDC! 3 , aksi belirtilmedikçe, Sigma'dan (St. Louis, Missouri, ABD) 'dan satın alınmıştır.

    Cedrus libani çıkarma
    Sedir ağacı, sonraki sezonda büyümelerini artırmak için ağaçların budandığı Şubat ayı boyunca olgun sedir ağaçlarından Kuzey Lübnan'dan toplandı. Budanmış odun parçaları Amioun Belediyesi, El-Koura'dan izin alındıktan sonra toplandı. Ağaç, “Dünyanın Şifalı Bitkileri” 33 kitabında açıklanan özelliklerine göre tanımlanmıştır.. Bir örnek, (ID 2015-0019) Lübnan'daki Lübnan Amerikan Üniversitesi Sanat ve Bilim Okulu'na yatırıldı. Odun numunesi gölgede havayla kurutuldu, parçalandı ve heksan ekstraksiyonuna tabi tutuldu (72 saat). Filtrelenen ekstrakt, indirgenmiş basınç altında kuruyana kadar buharlaştırıldı ve kalan yağ (CLOE), susuz sodyum sülfat (verim %1.95) üzerinde kurutuldu ve kullanıma kadar 4 °C'de kapalı bir amber şişede saklandı. CLOE (5 g), üç fraksiyon (9:1, 600 mL, F1; 8:2, 600 mL, F2) toplamak için bir heksan/etil asetat gradyan mobil fazı kullanılarak bir silika jel kolonu (230-400 ağ) üzerinde kromatografiye tabi tutuldu. 7:3, 500+ mL, F3). Fraksiyonlar, mobil faz olarak heksan:etil asetat (8:2) kullanılarak TLC ile analiz edildi ve plakalar, bir Rf ile pembe bir nokta olarak 2-himachelen-7-ol'ün göründüğü %2 anisaldehit ile boyandı.0.78 değeri. F2 (1.8 g) daha sonra asetonitril ile karıştırıldı ve 2-himachelen-7-ol'ü beyaz kristalli bir katı (1.2 g, %97 saflık) halinde yeniden kristalleştirmek için dondurucuda 3 gün saklandı. 13 CDC C NMR 75 MHz 3 ö 133.4, 125.6, 76.2, 51.9, 43.6, 41.4, 38.4, 36.4, 33.5, 32.7, 31.7, 26.7, 23.6, 22.3 ve 19.9 ppm.

    Gaz Kromatografisi ve Kütle Spektrometrisi (GC-MS) analizi
    CLOE, fraksiyonlar ve 7-HC, taşıyıcı gaz olarak helyum kullanılarak bölünmesiz enjeksiyon ve 1.2 mL/dakika akış hızı kullanılarak GC-MS yoluyla analiz edildi. Sıcaklık programı 70 °C'de 2.0 dakika, 8 °C/dk'da 70'den 130 °C'ye ve 5 dakika, 130'dan 180 °C'ye 2 °C/dk'da ve 10 dakika, 180'den 220 °C'de 15 °C/dk'da ve 2 dakika ve ardından 220'den 280 °C'de 15 °C/dk'da tutun ve 22 dakika tutun. Tüm bileşiklerin ön tanımlaması, kütle spektrumları literatürle (NIST11 ve Wiley9) karşılaştırılarak yapıldı. Yüzde bileşimi, GC pik alanlarından hesaplandı. GC-MS: CHC 3 m / z : 222.2 (1), 204.2 (46), 189.2 (17), 175.1 (4), 161.1 (20), 147.1 (16), 133.1 (34), 119.1 (100), 105.1 (44), 91.1 (41), 77.1 (21), 69.1 (15) ve 55.1 (16).

    Hücre hayatta kalma tahlili
    Bu çalışmada dört insan kanser hücre dizisi kullanıldı: SF-268 (insan astrositoma hücre dizisi), Caco-2 (insan kolon kanseri hücre dizisi), HT-29 (insan kolon kanseri hücre dizisi) ve Sk-OV-3 ( insan yumurtalık kanseri hücre hattı). SF-268, Sk-OV-3, Dulbecco'nun modifiye Eagle's ortamında (DMEM) büyütülürken, Caco-2 ve HT-29, Roswell Park Memorial Institute Medium'da (RPMI) muhafaza edildi. Her iki ortam da %10 Fetal Bovine Serum (FBS) ve 100 μg/mL streptomisin ve 100 U/mL penisilin içeriyordu. Tüm hücre çizgileri, CO, 37 ° C'de, nemlendirilmiş bir odada kuluçkaya bırakıldı ve% 5 bulundu 2 . Hücreler (1 × 10 4hücre/mL) 24 saat 96 oyuklu plakalara kaplandı ve daha sonra DMSO (1, 5, 10, 15 ve 25 ug/mL) içinde 7-HC veya 24 saat ve 48 saat sisplatin ile işlendi. Ek olarak, 7-HC (2,5 ve 5 μg/mL) ve Cisplatin (5 ve 10 μg/mL) ile eş zamanlı tedavi uygulandı. Hücre canlılığı, WST-1 (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, ABD) kullanılarak ölçüldü. Absorbans, Multiskan FC mikroplaka ELISA okuyucusu (Thermo fisher Scientific, Rockford, IL, ABD) kullanılarak 450 nm'de ölçüldü. Hücreler iki kopya halinde kaplandı ve deneyler üç kez tekrarlandı.

    Monositler izolasyonu ve stimülasyonu
    Deney, Laboratuar Hayvanları Refahı Ofisi (NIH, PHS Policy on Human Care and Use of Laboratuar Hayvanları, ABD 2015) tarafından belirlenen ve Lübnan Amerikan Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu tarafından onaylanan uluslararası kabul görmüş ilkelere uygun olarak gerçekleştirildi. Daha önce tarif edildiği gibi, taze periferik kan mononükleer hücreleri (PBMC'ler), monositler ve lenfositler oluşan izolasyonu gerçekleştirilmiştir 26(6 haftalık; 250 g ağırlığında) sağlıklı genç erkek Sprague Dawley sıçanlarının kan örneklerinden ve EDTA ile ön işleme tabi tutulmuştur. EDTA ile muamele edilmiş kan (4 mM), eşit steril hacimde ılık PBS ile seyreltildi ve Ficoll üzerinde santrifüjlendi. Ara yüzeyde oluşan ve monosit hücrelerinin çoğunu içeren buffy coat, steril bir pipet ile dikkatlice çıkarılır ve steril 50 ml'lik bir konik tüpe aktarılır ve santrifüjleme yoluyla iki kez steril ılık PBS ile yıkanır. Hücreler daha sonra, altı oyuklu kültür plakaları içinde FBS (% 10), penisilin (100 U / ml) ve streptomisin (100 ug / ml) ile desteklenmiş 2 ml RPMI ortamı içinde tohumlanmıştır (4 x 10 5 hücre / cm 2 ) ve izin verilen yapışan bir gece boyunca (37 ° C,% 5 CO 2). Yapışmayan hücreler (esas olarak lenfositler), ılık steril PBS ile (üç kez) kuvvetli yıkama ile çıkarıldı. Elde edilen monositler/makrofajlar %95 saflığı aştı. Hücre canlılığını belirlemek için tripan mavisi dışlama kullanıldı. Hücre canlılığını belirlemek için tripan mavisi dışlama kullanıldı. Monositler, bakteriyel LPS (100 ng/mL) varlığında veya yokluğunda ve artan konsantrasyonlarda 7-HC (5, 10, 25) varlığında altı oyuklu plakalarda 6 saat boyunca toplam 2 mL'lik bir hacimde RPMI içermeyen ortamda kültürlendi. , 50 ug/mL). 7-HC, LPS ile stimülasyondan 30 dakika önce ilave edildi.

    Western blot analizi
    PBMC'ler buz üzerinde toplandı, PBS ile yıkandı, lizis tamponu ile parçalandı ve 4 °C'de 10 dakika boyunca 12.000 g'de santrifüjlendi. Hücre lizatı 100 °C'de 5 dakika ısıtıldı ve protein içeriği Bio-Rad protein tahlili (Bio-Rad, Hercules, CA, ABD) kullanılarak belirlendi. Proteinlerin eşit konsantrasyonları %10 SDS-PAGE'ye yüklendi ve daha sonra PVDF membranına (Pall Corporation, Ann Arbor, ABD) aktarıldı ve blokaj tamponu (1 x TBS, %0.1 Tween-20, %5 yağsız süt) ile bloke edildi. 2 saat Zarlar daha sonra Actin ve Cox-2'ye karşı birincil antikorlarla gece boyunca 4 °C'de problanmıştır. Birincil antikorlar daha sonra 2 saat boyunca TBST ile yıkandı ve zarlar, 1 saat boyunca yaban turpu peroksidaz (HRP)-bağlı ikincil antikorlar ile işlendi ve ardından TBST ile yıkandı. Protein tespiti, kemilüminesans ECL kiti kullanılarak yapıldı. Nihayet,

    Monositler hücre hayatta kalma tahlili
    Fare monositler FBS (% 10), penisilin (100 U / ml) ve streptomisin (100 ug / ml) ile takviye edilmiş RPMI ortamında 12 oyuklu plakalara plakalanır ve bir gece yapışmaya bırakılmış (37 ° C, 5% CO 2 ) 24 saat Hücreler daha sonra artan konsantrasyonlarda 7-HC (10, 25 ve 50 μg/mL) ile 6 saat süreyle işleme tabi tutuldu. Hücre canlılığı, WST-1 (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, ABD) kullanılarak ölçüldü. Absorbans, Multiskan FC mikroplaka ELISA okuyucusu (Thermo fisher Scientific, Rockford, IL, ABD) kullanılarak 450 nm'de ölçüldü. Hücreler iki kopya halinde kaplandı ve deneyler üç kez tekrarlandı.

    Formalin kaynaklı pençe ödemi
    Sprague Dawley sıçanları, her biri altı hayvandan oluşan altı gruba ayrıldı. Tüm gruplarda, sağ arka pençeye 34 20 uL %2 formalin subplantar enjeksiyonu ile kronik enflamasyon üretildi . Formalin enjeksiyonundan otuz dakika önce, dört grup salin içinde 10, 25, 50 veya 100 mg/kg VA konsantrasyonunda 7-HC (ip) aldı, bir grup standart referans ilaç diklofenak (10 mg/Kg VA, ip) ve bir grup negatif kontrol olarak görev yaptı. 7-HC ve diklofenak uygulamasına arka arkaya 6 gün boyunca günde bir kez devam edildi. Pençe kalınlığı, formalin enjeksiyonundan 31 önce ve 6 gün sonra bir Vernier kumpas kullanılarak ölçüldü . Pençe kalınlığındaki artış şu formül kullanılarak hesaplanmıştır: [P t – P 0 ]; nerede Ptformalin enjeksiyonundan 6 gün sonra pençenin kalınlığıdır ve P 0 , 0 zamanındaki pençe kalınlığıdır. İnhibisyon yüzdesi şu formül kullanılarak hesaplanmıştır: [(C − T)/C × 100]; burada C , pozitif kontrolün pençe kalınlığındaki artıştır ve T , tedavilerinkidir.

    istatistiksel analiz
    Sonuçlar, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) kullanılarak istatistiksel anlamlılık açısından analiz edildi. Her grup içinde test edilen farklı parametrelerin değerleri, ortalama ± SEM olarak sunulur. Tüm veriler istatistiksel paket SPSS 18 ile analiz edildi ve p-değeri < 0.05 ise gruplar arasındaki farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. IC 50 değerleri Windows için Graph Pad Prism 5.0 sürümü yazılımın kullanımı ile doğrusal olmayan regresyon eğrisi kullanılarak hesaplandı.


    Git: Ek bilgi
    Cedrus Libani'den (1.1M, docx) izole edilen 2-Himachelen-7-ol'ün Antikanser ve Antiinflamatuar Aktivitelerinin In Vitro ve In Vivo Değerlendirilmesi


    Git: Teşekkür
    Lübnan Amerikan Üniversitesi'ndeki Fen Edebiyat Fakültesi ve Eczacılık Fakültesi'ne, bu yazıda açıklanan analizi gerçekleştirmek için finansman ve olanaklar sağladığı için teşekkür ederiz. In vivo deneylerde yardımcı olan Bay Jean Karam'a özel teşekkürler .

    Git: Yazar Katkıları
    Yazarlar, Andree Elias, Wassim N. Shebaby, Bilal Nehme, Wissam Faour, Bassem S. Bassil, Joelle El Hakim, Rita Iskandar, Nahia Dib-Jalbout, Mohamad Mroueh, Costantine Daher ve Robin I. Taleb, sahip olduklarını beyan ederler. tümü, katkıları katkıda bulunan yazarlardan biri olarak bağlantılarını garanti ettiği ölçüde, bu yazıda önemli ölçüde katkıda bulunmuştur. Joelle El Hakim, Bilal Nehme, Bassem Bassil ve Robin Taleb, 7-HC'nin ekstraksiyonu, izolasyonu ve yapısal karakterizasyonunu gerçekleştirdi. Andree Elias, Joelle El Hakim, Rita Iskandar, Nahia Dib-Jalbout, Wassim Shebaby, Mohamad Mroueh ve Costantine Daher hücre hayatta kalma deneylerini gerçekleştirdi. Andree Elias, Wassim N. Shebaby ve Wissam Faour, monositlerin izolasyonunu ve stimülasyonunu gerçekleştirdi. Andree Elias, Joelle El Hakim, Rita Iskandar, Nahia Dib-Jalbout, Wassim Shebaby, Mohamad Mroueh ve Costantine Daher western blot analizini gerçekleştirdi. Wassim Shebaby, Robin Taleb ve Costantine Daher, monosit hücre hayatta kalma tahlilini gerçekleştirdi. İlaç Kombinasyon İndeksi Robin Taleb tarafından hesaplanmıştır. Rita Iskandar, Nahia Dib-Jalbout, Mohamad Mroueh ve Costantine Daher, formalin kaynaklı pençe ödemi iltihabı deneyini gerçekleştirdi. Şekil ve tablolar Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından hazırlanmıştır. El yazması Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından yazıldı ve Robin Taleb, Costantine Daher ve Mohamad Mroueh tarafından düzenlendi. Mohamad Mroueh ve Costantine Daher, formalin kaynaklı pençe ödemi iltihabı deneyini gerçekleştirdi. Şekil ve tablolar Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından hazırlanmıştır. El yazması Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından yazıldı ve Robin Taleb, Costantine Daher ve Mohamad Mroueh tarafından düzenlendi. Mohamad Mroueh ve Costantine Daher, formalin kaynaklı pençe ödemi iltihabı deneyini gerçekleştirdi. Şekil ve tablolar Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından hazırlanmıştır. El yazması Wassim Shebaby ve Robin Taleb tarafından yazıldı ve Robin Taleb, Costantine Daher ve Mohamad Mroueh tarafından düzenlendi.

    Git: Veri kullanılabilirliği
    Yazarlar, makalenin, makalede bildirilen yöntemleri ve bulguları yorumlamak, çoğaltmak ve geliştirmek için gereken minimum veri kümesini içerdiğini beyan eder.

    Git: Rekabet İlgi Alanları
    Ben, Robin I. Taleb, yazarların Nature Research tarafından tanımlanan rakip çıkarları veya bu makalede bildirilen sonuçları ve/veya tartışmaları etkilediği düşünülebilecek diğer çıkarları olmadığını beyan ederim.

    Git: Dipnotlar

    Yayıncının notu: Springer Nature, yayınlanan haritalarda ve kurumsal bağlantılarda yargı yetkisi iddiaları konusunda tarafsız kalır.

    Git: Ek bilgi
    Bu belgeye 10.1038/s41598-019-49374-9 adresinde ek bilgiler eşlik etmektedir.

    Git: Referanslar
    1. Uhtit A, et al. Bir fitokimyasal süper kokteyl ile meme kanseri hücrelerinde hücre döngüsü, proliferasyon, hayatta kalma, metastatik yollar ve apoptoz indüksiyonunun eşzamanlı inhibisyonu: Etki modunu destekleyen genler. Kanser Dergisi. 2014; 4 :703–715. doi: 10.7150/jca.7235. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    2. Sak K, Jürisoo K, Raal A. Doğal antikanser ilaçları üzerine Estonya halk geleneksel deneyimleri: Geçmişten geleceğe. Farmasötik Biyoloji. 2014; 52 :855-866. doi: 10.3109/13880209.2013.871641. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    3. Panetsos K, Christou A, Scaltsoyiannes A. Sedir türlerinde (Cedrus sp.) allozim varyasyonu üzerine ilk analiz Silvae Genetica. 1992; 41 :339–342. [ Google Akademik ]
    4. Reddy SE, Kirti Dolma S, Koundal R, Singh B. Uçucu yağların elmas sırtlı güve, Plutella xylostella (L.) (Lepidoptera: Yponomeutidae)'ye karşı kimyasal bileşimi ve böcek öldürücü aktiviteleri Doğal ürün araştırması. 2016; 30 :1834–1838. doi: 10.1080/14786419.2015.1068772. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    5. Barrero AF, et al. Cedrus atlantica'nın konilerinden Abietan diterpenleri. Fitokimya. 2005; 66 :105-111. doi: 10.1016/j.phytochem.2004.10.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    6. Derwich E, Benziane Z, Boukir A. Cedrus atlantica'nın uçucu yağının kimyasal bileşimi ve in vitro antibakteriyel aktivitesi. Int. J. Agric . Biol. 2010; 12 :381–385. [ Google Akademik ]
    7. Singh SK, et al. Cedrus deodara kök ağacından elde edilen kimyasal olarak standardize edilmiş izolatlar, antikanser aktiviteye sahiptir. Bitki ilacı. 2007; 73 :519–526. doi: 10.1055/s-2007-967185. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    8. Shinde U, et al. Membran stabilize edici aktivite—Cedrus deodara odun yağının anti-inflamatuar aktivitesi için olası bir etki mekanizması. Fitoterapi. 1999; 70 :251–257. doi: 10.1016/S0367-326X(99)00030-1. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    9. Dakir M, et al. Cedrus atlantica'dan antibakteriyel diterpenoidler. Doğal ürün araştırması. 2005; 19 :719–722. doi: 10.1080/14786410512331330675. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    10. Guerrini, A. Cedrus libani tohum ekstraktlarının K562 insan kronik miyelogenus lösemi hücrelerine karşı antiproliferatif ve eritroid farklılaşma aktiviteleri. International Journal of Pharmaceutical & Biological Archive 2 (2011).
    11. Saab AM, et al. Lübnan şifalı bitkilerinden elde edilen uçucu yağların çoklu ilaca dirençli lösemi hücrelerine karşı fitokimyasal analiz ve sitotoksisite. Planta Medica. 2012; 78 :1927–1931. doi: 10.1055/s-0032-1327896. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    12. Piazza GA, et al. NSAID'ler: eski ilaçlar yeni antikanser hedeflerini ortaya çıkarır. İlaç. 2010; 3 :1652-1667. doi: 10.3390/ph3051652. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    13. Zha S, Yegnasubramanian V, Nelson WG, Isaacs WB, De Marzo AM. Kanserde siklooksijenazlar: ilerleme ve bakış açısı. Kanser Let. 2004; 215 :1–20. doi: 10.1016/j.canlet.2004.06.014. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    14. Salvemini D, Marino MH. İndüklenebilir nitrik oksit sentaz ve inflamasyon. Araştırma ilaçları hakkında uzman görüşü. 1998; 7 :65-75. doi: 10.1517/13543784.7.1.65. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    15. Harris RE, Beebe-Donk J, Schuller HM. Sigara içenler arasında nonsteroid antiinflamatuar ilaçlarla akciğer kanserinin kemoprevensiyonu. Onkoloji raporları. 2002; 9 :693–696. [ PubMed ] [ Google Akademik ]
    16. Greenhough A, et al. COX-2/PGE2 yolu: kanserin ayırt edici özelliklerinde ve tümör mikroçevresine adaptasyonda kilit roller. Karsinojenez. 2009; 30 :377–386. doi: 10.1093/carcin/bgp014. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    17. Shim JY, et al. Siklooksijenaz-2'nin aşırı ekspresyonu, meme karsinomu ve onun kötü prognostik faktörleri ile ilişkilidir. Modern patoloji. 2003; 16 :1199–1204. doi: 10.1097/01.MP.00000097372.73582.CB. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    18. Yuan C, et al. Siklooksijenaz allosterizmi, siklooksijenaz homodimerlerinin monomerleri arasında yağ asidi aracılı çapraz konuşma. Biyolojik Kimya Dergisi. 2009; 284 :10046–10055. doi: 10.1074/jbc.M808634200. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    19. Umar A, Steele VE, Menter DG, Hawk ET. Kanser önlemede nonsteroid antiinflamatuar ilaçların mekanizmaları. Onkoloji Seminerleri. 2016; 43 :65-77. doi: 10.1053/j.seminoncol.2015.09.010. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    20. Vonkeman, HE & van de Laar, MA In Semin. Artrit Rheum . 294–312 (Elsevier). [ PubMed ]
    21. Saab AM, Harb FY, Koenig WA. Lübnan'dan Cedrus libani ve Cedrus atlantica'nın öz odunundaki uçucu yağ bileşenleri. Minerva Biotecnologica. 2005; 17 :159-161. [ Google Akademik ]
    22. Taleb RI, et al. β-2-himachalen-6-ol: Lübnan yabani havuçuna özgü yeni bir antikanser seskiterpen. Etnofarmakoloji Dergisi. 2016; 190 :59-67. doi: 10.1016/j.jep.2016.05.053. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    23. Daaboul HE, et al. β-2-himachalen-6-ol'ün kolon kanserindeki antitümör aktivitesine, PI3K ve MAPK yolaklarının inhibisyonu aracılığıyla aracılık edilir. Kimyasal-Biyolojik Etkileşimler. 2017; 275 :162–170. doi: 10.1016/j.cbi.2017.08.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    24. Daaboul HE, et al. β-2-himachalen-6-ol , in vitro ve in vivo cilt kanseri gelişimine karşı korur . Eczacılık ve Farmakoloji Dergisi. 2017; 69 :1552–1564. doi: 10.1111/jphp.12796. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    25. Manohar S, Leung N. Cisplatin nefrotoksisitesi: literatürün gözden geçirilmesi. Nefroloji Dergisi. 2018; 31 :15–25. doi: 10.1007/s40620-017-0392-z. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    26. Abd El Razik HA, et al. Yeni pirazolo [3, 4-d] pirimidin türevlerinin sentezi ve bunların antienflamatuar ve antikanser aktivitelerinin değerlendirilmesi. Kimyasal biyoloji ve ilaç tasarımı. 2017; 90 :83-96. doi: 10.1111/cbdd.12929. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    27. Rone A, et al. Oral uygulama için potansiyel antikanser adayları olarak insan topoizomeraz inhibisyonu ve Ru (II)-SCAR komplekslerinin DNA/BSA bağlanması. BiyoMetaller. 2017; 30 :321–334. doi: 10.1007/s10534-017-0008-z. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    28. Huang, L., Jiang, Y. & Chen, Y. İlaç Kombinasyon İndeksinin Tahmin Edilmesi ve Uyuşturucu Hedefli EGFR-ERK Sinyal Yolunun Matematiksel Modellenmesi ile Ağ Düzenleme Dinamiklerinin Simüle Edilmesi. Bilimsel Raporlar 7 , 40752, 10.1038/srep40752, https://www.nature.com/articles/srep...ry-information (2017). [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ]
    29. Wei WC, et al. 2008 ve 2012 yılları arasında Tayvan'ın yumuşak mercanlarından izole edilen doğal ürünlerin anti-inflamatuar aktiviteleri. Deniz ilaçları. 2013; 11 :4083–4126. doi: 10.3390/md11104083. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    30. Regulski M, et al. COX-2 inhibitörleri: meme kanseri tedavisinde yeni bir strateji. Bugün ilaç keşfi. 2016; 21 :598-615. doi: 10.1016/j.drudis.2015.12.003. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    31. Jose N, Ajith T, Janardhanan K. İstiridye mantarının metanol özütü, Pleurotus florida, iltihabı ve trombosit agregasyonunu engeller. Fitoterapi Araştırması: Doğal Ürün Türevlerinin Farmakolojik ve Toksikolojik Değerlendirmesine Adanmış Uluslararası Bir Dergi. 2004; 18 :43-46. doi: 10.1002/ptr.1355. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
    32. Gupta P, Kulshrestha D, Patnaik G. Cedrus deodara'nın antialerjik aktivitesi. J Med Aromatik Bitki Sci. 1997; 19 :1007–1008. [ Google Akademik ]
    33. Van Wyk, B.-E. & Wink, M. Dünyanın şifalı bitkileri: önemli şifalı bitkiler ve kullanımları için resimli bir bilimsel rehber . 1 baskı, 124 (Briza Yayınları, 2004).
    34. Ajith, T. & Janardhanan, K. Phellinus rimosus (Berk) Pilat'ın metanol ekstraktının antioksidan ve anti-inflamatuar aktiviteleri. (2001). [ PubMed

    Sedir ağacı nedir?

    Sedir ağacı özellikleri ile merak edilen ağaç türleri arasında yer alıyor. Sedir, çamgiller (Pinaceae) familyasından Cedrus cinsini oluşturan iğne yapraklı ağaç türlerine verilen isimdir. Ortalama ömürleri 1000 yıl kadardır, 40 metre boya ve 2 metre çapa kadar büyüyebilirler.


    Haberin Devamı
    Tomurcuk çok küçük olup, az sayıda pullarla örtülüdür. İğne yapraklar genellikle üç köşeli, yatay kesitlerinde bitişik iki adet reçine kanalı bulunmaktadır. Yapraklar uzun sürgünler üzerinde tek tek, seyrek ve dağınık olarak dizilirken, kısa sürgünlerde püskül şeklindedir. İğne yapraklar dökülmeden ağaç üzerinde 3-6 yıl kalırlar. Bir evcikli çiçekler yalnız olarak terminal halde bulunurlar. Erkek çiçekler silindirik yapıda olup 5 cm uzunluğunda, sarı renkli ve kısa sürgün üzerinde dik dururlar. Dişi çiçekler daha küçüktür. 1-1,5 cm, yeşilimsi renkte olup döllenme ilkbaharda oluşmaktadır. Kozalak ise 26 ayda olgunlaşmaktadır. Kozalak genellikle fıçı görünümündedir. Kısa sürgün üzerinde adeta oturmuş şekildedir. Kısa ve kalın bir sapı vardır. Kozalak pulları olgunlaştığında dağılır.
    Tohumların büyük, üçgen biçiminde genişçe kanadı olup, tohumu tek yüzünden örtmüştür. Tohumların üzerlerinde bol sayıda reçine bezeleri vardır. Çenek sayıları 9-10'dur.

    Haberin Devamı
    Ekolojik istekleri
    Sedirler yarı ışık ağacıdır. Nem istekleri az, sıcaklık istekleri fazladır. Yetiştirilmeleri tohumla olur.

    Sedir ağaçları hangi bölgelerde var?
    Lübnan, Himalaya, Kıbrıs ve Atlas türleri bulunan sedir ağaçlarının iğne yaprakları genellikle üç köşelidir ve yatay kesitlerinde bitişik iki adet reçine kanalı bulunmaktadır. Genel olarak Akdeniz ikliminin hakim olduğu yerlerde, Anadolu'da batı, orta ve doğu Toroslar'da doğal olarak yayılış gösterir. Kuzeyde Erbaa ve Niksar çevrelerinde küçük ve izole halde bulunur. Boyları 40, çapları 3 metreye kadar ulaşan sedir ağaçları, gençken piramit görünüşlü olurlar. Yaşlılar ise geniş, yassı tepeli, düzgün gövdeli güzel görünüşlüdür. Derine giden kazık kök sistemine sahiptir. Özellikle kireç taşı topraklarda, yarık ve çatlaklarda oldukça derine gider. Türkiye'de birçok yerde görülebilen sedir ağaçları, nispeten kurak ve kalkerli yamaçlarda çoğu kez kayalar arasında yetişir. Sedir ağaçları mobilya, doğrama, tel direği, inşaat ve gemi kerestesi, kağıt, lif ve selüloz odunu ile yonga levha imalatında kullanılmaktadır.
    Rıza

    Yorum yap


    • #3
      Esansiyelin fitokimyasal ve farmakolojik özellikleri Cedrus türlerinden yağlar
      Antoine M. Saab a , Roberto Gambari b  , Gianni Sacchetti b , Alessandra Guerrini b ,Ilaria Lampronti b  , Massimo Tacchini b , Antoine El Samrani c , Samir Medaward ,Hassane Makhlouf c , Mona Tannoury c , Cihad Abboud d , Mona Diab-Assaf a ,Anake Kijjoa e , Rosa Tundis f , Jawad Aoun a veThomas Eerth ga Fen Fakültesi II, Biyokimya ve Kimya Bölümü, Lübnan Üniversitesi, Lübnan; b DepartmanYaşam Bilimleri ve Biyoteknoloji Bölümü, F Üniversitesierrara, Ferrara, İtalya; c Fen Fakültesi II, BölümBiyoloji Bölümü, Lübnan Üniversitesi, Beyrut, Lübnan; d Ziraat ve Hayvan Bilimleri Fakültesi, Lübnan Üniversite, Beyrut, Lübnan; e ICBAS–Biyomedikal Bilimler Enstitüsü Abel Salazar, Porto Üniversitesi, Porto, Portekiz; f Eczacılık Fakültesi Eczacılık Bilimleri, Beslenme ve Sağlık Bilimleri Bölümü,Calabria Üniversitesi, Rende, İtalya; g Farmasötik Biyoloji Anabilim Dalı, Eczacılık Enstitüsü

      ÖZ
      Doğal ürünler sıklıkla farmakolojik aktivite gösterirler. NSmevcut inceleme etnobotaniğe genel bir bakış sunar, phytokimya ve Cedrus cinsinin farmakolojisi , örneğin sitotoksik, spazmolitikimmünomodülatör, antialerjik, antiinflamatuar ve analjezik faaliyetler. Kanser hastaları sıklıkla geleneksel yöntemlerden çare ararlar.göre daha az yan etki gösterdiğine inanılan şifalı bitkiler sentetik ilaçlarla geleneksel tedavi. Uzun süreli bir hedefanti-kanser ve anti-mikrobiyal terapi araştırması, bileşikleri bulmaktır. şu anda onaylanmış ilaçlara kıyasla azaltılmış yan etkilerle . Bu açıdan Cedrus türleri ilgi çekici olabilir. gerekliCedrus libani yapraklarından izole edilen yağ , ilaç potansiyeli taşıyabiliryüksek germacrene D konsantrasyonları nedeniyle gelişme ve β- karyofillen. Cedrus türlerinden elde edilen uçucu yağlar dabakteri ve virüslere karşı biyoaktivite. Daha fazla preklinik analiz (örn.in vivo deneyler) ve klinik deneylerin değerlendirilmesi için gereklidir.Cedrus türlerinden elde edilen uçucu yağların ilaç geliştirme potansiyeli

      1. Giriş
      Lübnan, 783 cinse dağılmış 2607 türü sayan büyük bir ora'yı kapsar.a L'ye endemik olduğu düşünülen yaklaşık 100 tür ileebanon (Barbour ve diğerleri 2004 ).Lübnan bitkisel ilaçları (LHR'ler) geleneksel olarak önlemek ve tedavi etmek için kullanılmıştır.çok yemek kanser, Alzheimer gibi rahatsızlıklarhastalığı, viral ve bakteriyel enfeksiyonlar ve diğer hastalıklar (Loizzo ve ark. 2008b ; Saab ve ark. 2011 ; Guerrini ve Sacchetti 2014 ). En çokilginç bitkiler, anti-prolif uygulayan Cedrus cinsinden türlerdir.eratif faaliyetler lösemi hücrelerine, Herpes simpleks virüsleri tip-1, diyabet ve diğer insan sağlığına karşı hastalıklar (Loizzo ve ark. 2008a ; Saab ve ark. 2012a ; Chaudhary ve ark. 2015 ). oradae sadece dört Morfolojik çeşitliliklerine göre sınıflandırılan Cedrus türleri (Pinaceae).Bunlardan üçü doğal olarak Akdeniz bölgesinde, yani C. libani , Lübnan, Suriye veTürkiye, C atlantica Cezayir ve Fas ve C brevifolia C'deyprus Adası, C. deodara ise Himalaya Dağları'nda (Panetsos ve diğerleri 1992 ).Lübnan Sediri ( C. libani A. Rich.)Lübnan'ın Akdeniz dağlarına özgü (1050-1925 rakımlarında) m), Suriye Alaouite Dağları (1200–1850 m) ve TTürkiye'nin Oros Dağları (530–2000 m). Lübnan'da C. libani 2000 hektarlık bir alanı kaplamaktadır. Suriye'de, bu tür yaygın olarak 20.000 hektara yayılmıştır.Türkiye 99.000 ile en büyük C. libani alanına sahiptir .ha, hangisi 31.000 ha bozulmuş habitatlar. C. atlantica'nın doğal anavatanı Cezayir dağları veFas, Euro'da tanıtıldıağaçlandırma sırasında 1840 yılı civarında ope ve ABD ve bu alanda ağaç dikme operasyonu. C. deodar ikena görkemli bir yaprak dökmeyen ağaç dis-Akdeniz bölgesinde ve batı Himalayalarda saygıyla anılır (Renau-Morata et al. 2005 ;Chaudhary ve ark. 2015 ).Kanser, başlıca ölüm nedenlerinden biridir ve sıklığının önümüzdeki yıllarda artması beklenmektedir. gelecek yıllar. Geleneksel şifalı bitkilerden elde edilen ilaçlar grfaiz yemek üstesinden gelme umuduyla kanser hastaları içinneden olduğu yan etkilerin bilinen riskleri sentetik kemoterapötik ilaçlarla (Saab ve ark. 2015 ). Farklı kanser türleri arasında, lösemi, olgunlaşmamış malign beyaz kanın anormal artışı ile karakterizedir. hücreler. Kansere bağlı ölümlerin önemli bir nedenini temsil eder (Xie ve ark. 2003 ).Kronik miyeloid lösemi (KML), kaslarımın artan büyümesiyle karakterizedir.eloid kan ve kemik iliğindeki hücreler. genetik olarak, CML karakterdirPhiladelphia (Ph1) tarafından tered kromozomlar arasında karşılıklı bir translokasyondan kaynaklanan kromozom (22q-) 9 ve 22 (Druker 2008 ). Birkaç anti-CML ajanı, bu hücreleri terminal geçirmeye iterek etki eder.eritroid farklılaşması. Örneğin, eritroid farklıK562 hücrelerinin başlatılması (yerleşik bir KML hastasının plevral efüzyonundan izole edilen hücre hattı), artmış embriyo-fetal globin genlerinin ekspresyonu, sürekli ζ-, ε - vey-globin mRNA'ları ve Hb Gower 1, Hb Portland ve HbF (Lozzio & Lozzio 1975 ; Bianchi ve ark.2009 ). K562 eritroid farklılaşma yolunun aktivasyonubirkaç anti-tümör yolu ile ajanlar (örneğin doksorubisin, desitabin, mitram)ycin, angelicin, tallimustine) asso-apoptoz indüksiyonu ve hücre büyümesinin güçlü bir şekilde inhibisyonu ile bağlantılıdır (Lampronti ve ark. 2009 ; Viola et al. 2009 ;Wang et al. 2013 ; Finotti et al. 2015 ).Akut lenfoblastik lösemi (ALL) biyolojik olarak heterojen bir hastalıktır.. tedavi edilmemişALL, birkaç hafta içinde meydana gelen hızlı ölümle ölümcüldür. Lenfoidin moleküler genetiğilösemi, hastalığın doğru bir şekilde teşhis edilmesine yardımcı olur (Ching-Hon Pui 2009 ). Diğer yandan,ALL, çocuklar arasında en sık görülen malignitedir ve çocukluk çağının %60'ını temsil eder. Yetişkin akut löseminin %10-20'si (Runge 2006 ).DOĞAL ÜRÜN ARAŞTIRMA 1417ilaca dirençli ve dirençli ALL'yi öldürmek için (Eerth 2001 ). Birleşik Krallık'ta yaklaşık 3000 çocukAvrupa'da devletler ve 5000 çocuğa her yıl ALL teşhisi konuyor (Roganovic 2013 ).Ayrıca 2015 yılında yaklaşıkABD'de yaklaşık 54.270 hasta acı çekiyorbazı leu biçimlerinden ed-kaemia ve 24.450 hastalıktan öldü (Siegel ve ark. 2015 ).Bitkisel şifalı bitkiler de dünya çapında Herpes simplex tedavisi için kullanılmaktadır. virüs (HSV), insanlar arasında yaygın olan büyük bir çift sarmallı DNA ve zarflı virüs nüfus (Whitley ve diğerleri 1998 ; Khan ve diğerleri 2005 ; Guerrini & Sacchetti 2014 ). herpes simpleksvirüs tip 1 (HSV-1), lokalize cilt enfeksiyonlarına neden olan yaygın bir insan patojenidir. yutak, yemek borusu ve gözler (Coen 1996 ). Antiviral tedavi başarılı olduasiklovir, valasiklovir ve famsiklovir gibi nükleozid analogları kullanılarak uygulanır (cassady & Whitley 1997 ). Öte yandan, nükleositlerin kullanımı önemli ölçüde ile ilişkilidir.toksisite (Ernst & Franey 1998 ). Son zamanlarda, birkaç uçucu yağın anti-herpes virüs aktivitesi farklı bitki kaynaklarının yanı sıra çeşitli yapıts uçucu yağlar şeytan olmuştur-sınıflandırılmış ve daha önce gözden geçirilmiş (Loizzo ve ark.. 2008a ). Ayrıca, şifalı bitkilere oldu diyabet ve diğer hastalıkların tedavisi için rapor edilmiştir (Loizzo ve ark. 2007a ). Şeker hastalığıW'ye göre dünya çapında 422 Mio'dan fazla insanı etkiliyororld Sağlık Örgütü (KİM 2016 ). Karbonhidrat bozuklukları ile birlikte kronik hiperglisemi ile karakterizedir.def'ten kaynaklanan drate, yağ ve protein metabolizmasıinsülin sekresyonunda etkilidir (Lee ve ark. 2015 ).Birçok yeni anti-hipoglisemik bileşikleri tanımlamak için geliştirilen in vitro testlerşifalı bitkiler son yıllarda büyük önem arz etmektedir. Özellikle, a -amilazve a -glukosidaz, glukoz sindirimini kontrol eder vedüzenleyen anahtar enzimler olarak kabul edilir. postprandiyal hiperglisemi. α -Amilaz mevcutt Hem tükürük hem de pankreas salgısında (Ramasubbu ve ark. 2004 ) ve nişastanın parçalanmasından sorumlu anahtar bir enzimdir vedaha sade şeker (dekstrin, maltotrioz, maltoz ve glikoz) ve dönüşümden sorumludur.büyük malto-oligosakkaritlerin maltoza dönüştürülmesi (Ali ve diğerleri 2006 ; Alexander 1992 ; Asano ve diğerleri.2004 ). Çok sayıda tıbbi bitki özleri önledi α -amilaz ve bağırsak α -gluco-sidase (Kotowaroo ve ark. 2006 ) çünkü antidiyabetik ile doğal bileşikler içerirler.

      2. Cedrus cinsinin etnobotanik ve geleneksel kullanımları
      Potansiyel olarak iyileştirici ilaç olarak Cedrus cinsine olan ilgiantik çağlara kadar uzanan izler zamanlar. Örneğin, tıbbi hazırlıkC. deodara'ya dayalı tarifler Ayurveda'da bilinmektedir.eski Hint sağlık ve uzun ömür sistemi (MÖ 2500'den önce) (Dev 1999 ; Chaudharyve diğerleri 2015 ). Bir hastalığın Ayurvedik tedavisi, ilaçların, diyetlerin sağlıklı kullanımından oluşur.ve diğer bazı uygulamalar. Şu anda Ayurvedik hazırlık için kullanılan 1250 bitki arasındayonlar C deodara olarak bilinen Devadaru (Sanskritçesi adı) ve spazmolitik aktivitesi için kullanılır(Kar ve diğerleri, 1975 ; Chowdhry ve diğerleri. 1997 ; Chaudhary ve diğerleri. 2015 ). İlginçtir, bir uyumeski halk ilaçları ile modern bilimsel araştırmalar arasındaki ilişki kanıtlanmıştır. Kuşkonmaz'ın Ayurvedik bitkisel müstahzarları gibi çok sayıda etnobotanik ilaç içinracemosus , Psoralea corylifolia ve – pr ile ilgiligözden geçirme – C. deodara (Dev 1999 ;Chaudhary ve ark. 2015 ).Türkiye'de, Cedrus cinsi bir tür, C. libani ile temsil edilmektedir . Bir tür katran olabilirreçineli kökünden ve buhar odunundan elde edilir. Bu katran genellikle sk'ye karşı uygulanır.içinde hayvanların şikayetleri ve parazitleri öldürmek için, örneğin yaprak bitleri ve böcekler (Digrak ve diğerleri 1999 ;Reddi et al. 2016 ). Lübnan, Akdeniz iklimi nedeniyle iğne yapraklı ağaçlar bakımından zengindir.ods. Aromatik ve tıbbi bitkilerden elde edilen uçucu yağların, antik çağlardan beri sahip olduğu bilinmektedir. biyolojik aktivite, özellikle antibakteriyel, antifungal ve antioksidan özellikler (Tardugno ve diğerleri 2016 ; Spagnoletti ve diğerleri. 2016 ; Maietti ve diğerleri. 2013 ; Rossi ve diğerleri. 2013 ; Metin ve diğerleri 1999 ; Loizzo ve ark. 2007a ). Cedrus türlerinden izole edilen uçucu yağlare önemli doğal kaynaklar ve fragranc üretimi için hammadde olarak kullanılıre bileşikleri cos -metics, yiyecek ve içecek için tatlandırıcı katkı maddeleri olarakyaş, çeşitli koku ajanları olarak ev ürünleri ve diğer parfüm kimyasallarının sentezinde ara ürünler olarak (Sezik ve diğerleri 2010 ; Bilir & Avcı 2013 ). Geleneksel terapilerde kullanılan uçucu yağlar aromadır.tik, uçucu buhar veya hidro-damıtma ile elde edilen yağlar. elde etmek için farklı bitki parçaları kullanılmıştır.çiçekler, yapraklar, tohumlar dahil olmak üzere uçucu yağlar, kökler, gövdeler, ağaç kabuğu ve ahşap. Uçucu yağlar veBileşenleri, tıbbi ürünlerin bileşenleri olarak tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır ve kozmetikte kokular (Tardugno et al. 2016 ; Spagnoletti ve ark. 2016 ; Maietti et al. 2013 ; Rossive diğerleri 2013 ; Cowan 1999 ). Tuygulamalar kapsamlı bir analiz için temel oluşturur. bu fitokimyasallar sınıfı için farmakognostik özellikler ve biyolojik aktiviteler.

      3. Ait Bitki Kimyası Cedrus Cinsine
      Fitokimyasal analizler, steroidlerin, prosiyanidinler ve terpenoidler bileşenleridir Pinaceae familyasının konilerinden elde edilen uçucu yağ. Son zamanlarda, çıkardık Hydrodestilla tarafından C. libani, C. alantica ve C. deodara'nın uçucu yağlarıyorumlandı ve analiz edildi bunları gaz kromatografisi/kütle spektrometrisi ile. Terpenoid bileşikler mükemmel bir işarettir -farklı Cedrus türlerini birbirinden ayırt etmek için. Germacrene D ve β -car-yophyllene, içinde büyüyen C. libani yapraklarının özel belirteçleri olarak ortaya çıktı .Lübnan (Loizzo ve diğerleri 2007b ; Saab et al. 2009 ), α- pinen ve himachalen, C.atlantica yaprakları Fas'ta büyüyor (Derwich ve ark. 2010 ). benzaldehit, β -karyofillenve germacrene-D , Lübnan'dan gelen C. deodara'nın özel belirteçleriydi .ana kom-C. libani esansiyel yağlarının bileşenleri , germacrene D'dir., β -karyofillen, γ -kadinen,trans - α -bisabolene, γ-muurolene ve 4(14)-salvialen-1-one, rözellikle (Loizzo ve diğerleri 2008c ;Saab et al. 2009 ; Maietti et al. 2013 ; Chaudhary ve ark. 2015 ; Sharma et al. 2017 ). büyükFas'ta yetişen C. atlantica'nın bileşenlerie α -pinen, himachalen, β-himachalene,cis - α- atlantone, himachalol, germacrene D ve β- copaene (Derwich ve diğerleri 2010 ). MüdürLübnan kökenli C. deodara bileşenlerie benzaldehit, β -karyofillen, ger-macrene D, myrcene, β- pinen ve α- pinene (Saab ve diğerleri 2009 ; Chaudhary ve diğerleri 2015 ; Sharmave diğerleri 2017 ), sırasıyla. Bu analizde, bizgermacrene D ve β -caryophyllene ile evlenC. libani esansiyel yağlarının yapraklarındaki ana bileşenlerdi ve dahae konsantre C. atlantica uçucu yağ yapraklarından daha fazladır (Saab ve diğerleri 2009 ; Derwich ve diğerleri 2010 ). Üstelik,α -pinen ve himachalen'i C. atlantica'nın temel bileşenleri olarak belirledikyağlar. Bu iki bileşikere daha konsantre edildi C atlantica daha C Libani ESSENTIALyağlar bırakır. Dahası, benzaldehit sadece C. deodara yapraklarında ana bileşenler olarak ortaya çıktıuçucu yağlar ve C. libani ve C. atlantica'nın yapraklarında bulunmayan uçucu yağlar . mirsen ikenC. deodara yaprak yağlarında daha yüksek konsantrasyonlarda ve düşük c'de ortaya çıktı.içinde oncentrations Clibani ve C. atlantica yaprakları yağları (Tablo 1 , Fşekil 1 ) (Saab ve diğerleri 2009 ; Derwich ve diğerleri 2010 ;Chaudhary ve ark. 2015 ). Mono-, sesqui- ve diterpenler ayırt etmek için iyi belirteçlerdir.iğne yapraklı türler birbirinden. Himachalol ortaya çıktıd, C. libani'nin özel belirteci olarak veC. atlantica odun yağları. Buna göreBiz eklemek gerekir α - β, - , γ -himachalene ve Z- α -, E- α -, Z- γ -,E- y- atlanton (Saab ve diğerleri 2005 ; Loizzo ve diğerleri 2008c ).

      4. Kanser ve diğer hastalıklara karşı biyoaktivite
      Cedrus cinsine çok sayıda biyolojik aktivite atfedilmiştir .odunun olmazsa olmazı Üç Cedrus türünün yağları , yani C. libani , C. atlantica ve C. deodara , güçlü in vitro özelliklere sahiptir . insan K562 kronik mye karşı eritroid farklılaşması ve antiproliferatif aktiviteelo-enöz lösemi hücreleri (Cortesi ve diğerleri, 1998 ; Saab ve diğerleri. 2012a ). Dahası, C. libani tohum özüayrıca K562 hücrelerinde eritroid farklılaşmasına ve büyüme inhibisyonuna neden oldu (Saab ve ark. 2011 ).C. libani'nin uçucu yağı, ilaca duyarlı CCRF/CEM akut enfeksiyonuna karşı sitotoksiktir




      1420 AM SAAB VE AL.lenfoblastik lösemi hücreleri ve bunların çoklu ilaca dirençli P-glikoprotein eksprese eden alt -satır, CEM/ADR5000 (Saab ve diğerleri 2012b ) (Tablo 2 ). Ayrıca uçucu yağlar ve etanolC. libani'nin kozalaklarından ve ağacından elde edilen özler , in vitro anti-diyabetik aktivite sergiledi (Loizzo ve diğerleri, 2007b ). C. deodora ahşabından elde edilen lignanlardan oluşan bir izolat, insanlara karşı sitotoksik idi.kanser hücre hatları (Singh ve diğerleri, 2007 ). gastrik antisekrC. deo- 'nun etory ve antiülser etkileridara odun yağı, pilor ile bağlanmış bir r'de değerlendirilmiştir.modelde ve etanol kaynaklı sıçanlarda mide lezyonları (Kumar ve ark. 2011 ; Chaudhary ve ark. 2015 ). Buhar damıtma- C. deodara'nın ahşabından ekstrakte edilen uçucu yağ , oral anti-inflamatuar özelliği açısından incelendi.ve analjezik aktivite (Shinde & Phadke 1999 ; Chaudhary ve ark. 2015 ). etanolik ve asetonC. deodara yağlarının özleri, indüklenmiş yenidoğan sıçanlarda antihiperlipidemik etkiler gösterdi.obezite. They artan vücut ısısı, serum glikozu, toplam kolesterol ve trigliserit (Sudhir ve diğerleri 2011 ).C. atlantica'nın yıkıcı damıtılmasıyla elde edilen sıvı katranın en iyisi olduğu belirtildi.Cade yağı ve Fransız farmakopesinde tavsiye edildi. c. atlantikbir yatırım oldu-matriks-metalloproteinaz, MMP-13'e karşı inhibitör etkinliği için tige edilmiştir (Derwich ve ark. 2010 ). Ayrıca, özübir yel bir yağlar C atlantica eritroid dierentiation ve inhib neden -K562 lösemi hücrelerinin kademeli büyümesi (Saab ve ark. 2012a ).C. deodara'nın ahşabından elde edilen Himachalol, belirgin bir anti- alerler ortaya çıkardı.jik aktivite ve öz odunun ana antispazmolitik bileşeni olarak tanımlanmıştır (Kar ve ark. 1975 ; Gupta et al. 1997 ) . Öte yandan, a -pinen,β -pinen, caryopyllene ve terpineolK562 lösemi hücrelerine karşı aktiviteyi açıklamıştır (Cortesi ve diğerleri, 1998 ; Lampronti ve diğerleri.2006 ). β -Pinene, MCF-7 meme kanserine karşı antiproliferatif aktivite sergiledi, A375 akciğerkanser ve Hep-G2 karaciğer kanseri hücreleri (Li ve diğerleri, 2009 ). Dahası, köprülü bisiklik mono-terpenler α- pinen ve β- pinene önemli biyolojik aktivite gösterdi (Delaquis ve ark.2002 ).Germacrene D, Cedrus dahil birçok bitkinin uçucu yağlarında ana bileşen olarak türlerinin önemli in vitro ve in vivo antikanser aktivitesi vardır ve bu türlere karşı sitotoksiktir.lösemi ve servikal karsinom dahil olmak üzere çeşitli hücre hatları (Quintans ve ark. 2013 ; Santanave diğerleri 2013 ). Saf ve farklı fraksiyonlardan oluşan farklı fraksiyonlarbisikloger karışımlarımacrene ve germacrene D, tümör hücre hatlarına karşı test edildi;güzel sitotoksik potansiyel. TBu sonuçlar germacrene D'nin prototip olarak kullanılabileceğini öne sürdü. yeni antikanser ajanların geliştirilmesi için öncü bileşik (Da Silva ve ark. 2013 ). Üzerindediğer yandan, β- karyofillen açısından zengin uçucu yağ, karşı sitotoksik aktivite sergilemiştir.insan ağız, karaciğer, akciğer ve kolon kanserinin yanı sıra melanom ve lösemi hücrelerine karşı

      5. Mikroplara ve parazitlere karşı biyoaktivite
      Antibiyotik direnci küresel bir endişe haline geldi (Tardugno ve ark.. 2016 ; Spagnoletti ve ark.2016 ; Maietti et al. 2013 ; Guerrini & Sacchetti 2014 ; Westh ve diğerleri. 2004 ). Uçucu yağlar açısından zengina- pinen, potansiyel anti-bakteriyel aktivite gösterdi (Sharma ve ark. 2017 ; Tardugno ve ark. 2016 ; Spagnoletti ve ark. 2016 ; Maietti et al. 2013 ; Rossi et al. 2013 ; Tantaoui-Elaraki et al. 1993 ;Bourkhiss ve ark. 2007 ). Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Bacillus sphericus veStaphylococcus intermedius , C. atlantic'in uçucu yağlarına duyarlıydı.a (Derwich et al.2010 ). Benzer şekilde, uçucu yağlardaki ana bileşenler a- pinen antimikrobiyal sergilemiştir.Escherichia coli, S. aureus, Micrococcus luteus ve Bacillus subtilis'e karşı aktivite . monoterpenler,hidrokarbonlar ve terpinenler ayrıca güçlü ila orta derecede antimikrobiyal özellikler gösterdie Gram pozitif bakterilere karşı aktivite (Tardugno ve ark. 2016 ; Spagnoletti ve ark. 2016 ; Maiettive diğerleri 2013 ; Rossi et al. 2013 ; Oyedeji & Afolayan 2005 ). Koniler ve yaprakes C libani sahipantimikrobiyal aktivite (Metin ve diğerleri 1999 ). C. libani'nin konileri anti-ülserojenik özelliklere sahiptir.anti- Helicobacter pylori aktivitesine karşı aktivite (Yesilada ve diğerleri 1999 ). antimikrobiyal aktivite C. libani'nin kök ve gövdelerinden elde edilen reçinelerin etanol ekstraktına da yatırım yapıldı.tigeted. C. libani reçinelerinin ham özütleri oldukça yüksekti.mikroorganizmalara karşı etkilidir büyümelerini engelleyerek (Murat Kızıl ve ark. 2002 ).C. libani'nin kozalaklarından, yapraklarından ve odunundan elde edilen uçucu yağlar ve etanol özleri ortaya koymaktadır.Herpes simpleks virüsü tip-I'ye karşı antiviral aktivite (Loizzo ve diğerleri, 2008c ). Çeşitli çalışmalaranti-HIV ve antioksidan aktiviteler üzerinde gerçekleştirilmiştir (Sakagami ve ark. 1991 ; Sakar ve diğerleri 1991 ).C. libani'nin uçucu yağı, larvisit olarak kullanılma potansiyeline sahiptir (Hüseyin ve ark. 2009 ).Ayrıca, C. atlantica'nın uçucu yağı, anti-inamma ortaya çıkardı.tory (Sugita ve diğerleri 2004 ),antimikrobiyal (Hammer ve diğerleri 1999 ), yumuşakça öldürücü (Lahlou 2003 ) ve antifungal aktiviteler(Sakagami ve diğerleri 1991 ). C. libani ve C. atlantica'dan türetilen Himachalol ve β -himachalene uçucu yağlar, ticari insektisitlerin geliştirilmesi için uygun prototipler olarak hizmet edebilir.cides (Singh & Agarwal 1988 )

      . Sonuçlar
      Uçucu yağlar biyoaktif fitokimyasallar açısından zengindir. Bu makalede, gözden geçirdikcemaatle ilgili literatüretnobotanik, fitokimyasal ve farmakolojik Cedrus cinsi hakkında bilgi . Dahasıile ilgili güncel bilgileri derledik. Cedrus cinsinin biyoaktiviteleri , örneğin sitotoksik, spazmolitik immünomodülatör,ti- alerjik, antienflamatuar ve analjezik aktiviteler. Kansere karşı uzun süreli bir hedef veanti-mikrobiyal terapi araştırması, azaltılmış yan e'ye sahip aktif bileşikler bulmaktır.ects com-mevcut antikanser ilaçlarına kıyasla (Aguirre-Martínez ve ark. 2015 ). Kanser hastaları sıklıklaeski olduğuna inanılan geleneksel şifalı bitkilerden çareler aramakdaha az yan etki geleneksel terapiden daha fazla (Qi ve ark. 2010 ;Yang et al. 2012 ). Tizole edilmiş uçucu yağlar C. libani yaprakları nedeniyle yeni antikanser ajan olarak geliştirilme potansiyeli taşıyabilir.yüksek germacrene D ve β- karyofillen konsantrasyonları . To tam terapötik gücü ortaya çıkarın -arasında TIAL Sedir , tür olarak daha farmakolojik araştırmalardiğer farmakolojik aktiviteler, örneğin anksiyolitik ve doku koruyucu etkiler için gösterildiği gibi gerçekleştirilmelidir. diğer türlerden uçucu yağlar (Ji ve diğerleri 2016 ; Sampaio ve diğerleri 2016 ; Zhang ve diğerleri 2016 ).w olarak preklinik analizler (ör . in vivo deneyler)temel amaçlar için yürütülen klinik deneyler olarak potansiyelini değerlendirmek için diğer türlerden yağlar (Srivilai et al. 2017 ) gereklidir.gerekli ilaç geliştirme için Cedrus türlerinden yağlar.

      Teşekkür
      Bu çalışma Profesör Dr.. Wilfried A. Koenig (Hamburg Üniversitesi,Almanya), bilim adamlarına ilham kaynağı olmuş ve fitokimya biliminde kilit rol oynamıştır. Bu yüksek düzeyde araştırma ve bilime olan bağlılığına olan minnettarlığımızın alçakgönüllü bir ifadesidir. son on yılda seviye

      Yorum yap


      • #4


        Sedir Ağacı Nedir? Özellikleri ve Faydaları Nelerdir?

        Bu yazıda sedir ağacı nedir, özellikleri, türleri ve faydaları nelerdir gibi soruların yanıtlarını detaylı bir şekilde anlatmaya çalıştık. Çamgiller familyasından olan sedir ağacı, Akdeniz iklimini seven, herdem yeşil bir bitki türüdür. Yüzyıllardır insanlar tarafından şifa amacıyla kullanılmıştır. Çamgiller ailesinden olan sedir, herdem yeşil, iğne yapraklı bir ağaç türüdür. Kireçli, kumlu ve killi topraklarda yetişen sedir ağacı daha çok Akdeniz iklimini sever. Her ağaçtan olduğu gibi, sedir ağacından da sağlık sektöründe fayda sağlanmaktadır. Sedir ağacından elde edilen yağ cilt bakımından saç maskesine kadar birçok alanda fayda sağlanmaktadır. Sağlık açısından çok faydalı olan sedir ağacının özellikle cilt sağlığı açısından kattığı değerler saymakla bitmez. Cildin temiz olmasına, temiz kalmasına yardım eden sedir ağacı yağı, sedir ağacından elde edilmektedir.

        Ayrıca kilo kontrolü sürecinde bağırsak düzenini kuramayanlar için de sedir ağacı yağı en sağlıklı alternatiflerdendir. Çam ağaçları kategorisinde yer alan sedir ağacı ülkemizin güney kesimlerinde görülebilir. Soğuk havalara dayanıklı olmadıklarından yıl boyu belli bir ısı üzerinde kalan iklimlerde yetişebilmektedir. Sedir ağacından elde edilen yağın keşfedilmiş özellikleri nedeniyle yağ kısa sürede kozmetik sektöründe de ciddi oranda kullanılmaya başlanmıştır.

        Ladin Ağacı Nedir? Özellikleri ve Faydaları Nelerdir?
        Özellikle cilt temizlemeye yönelik tonikler ve kremler içinde yerini alabilen sedir ağacı yağı; aktarlarda saf haliyle de bulunabilmektedir. Sedir ağacı gerek özellikleriyle gerekse görünümüyle ilgi çekici ağaç türlerinden bir tanesidir. Kokusunun çok huzur verici ve ferahlatıcı olduğu bilinmektedir. Bu nedenle sedir ormanları temiz hava almak için ideal mekanlardandır.

        Sedir Ağacı Nedir?
        Latince ismi ile Pinaceae, dilimizdeki isimli ile Çamgiller familyasına ait olan sedir ağacı, Cedrus Libani cinsini oluşturan iğne yapraklı ağaç türlerine verilmiş isimdir. Ilıman iklimleri seven sedir ağacı, herdem yeşil kalabilen bir ağaç türüdür. Görüntüsü ile beğenilen sedir ağacından birçok şekilde faydalanılmaktadır. Ülkemizde yetişen en değerli orman ağaçlarından biridir.

        Kozalaklarının görüntüsü bir piramidi andırmaktadır. Daha çok Lübnan sediri olarak anılmasının sebebi, ortaya çıkış sebebinin Lübnan olmasıdır. Bu nedenle de Lübnan bayrağında sedir ağacının sembolü yer almaktadır. Sedir ağacının uygarlık tarihine yön verdiği rivayet edilmektedir. Ağacın bu deli önemli olmasıın nedeni yapısıyla alakalıdır. Çamgiller ailesinden olan sedir, herdem yeşildir. Yani hiçbir mevsim yapraklarını dökmez. Uygun iklim ve toprak bulduğunda 1000 yıla kadar yaşabilen bu bitki, 30-40 metreye kadar uzayabilmektedir.

        Sedir Ağacının Özellikleri Nelerdir?
        Ağacın tomurcukları miniktir ve üzeri pullarla örtülmüştür. İğne yapraklar çoğunlukla üç köşelidir. Ağacın yaprakları uzun sürgünler üzerinde dağınık ve seyrek yapıda dizilmişlerdir. Kısa sürgünleri püskül görünümündedir. Yapraklar sedir ağacı üzerinde ortalama 5 yıl kadar kalabilirler. Ağaç üzerindeki erkek çiçekler silindir şeklindedir ve ortalama uzunlukları 5 cm'dir. Erkek çiçeklerin renkleri sarıdır. Dişi çiçekler ise erkek çiçeklere göre daha miniktir. Renkleri yeşilimsi olan çiçeklerin ortalama boyu 1,5 cm'dir. Çiçeklerde döllenme ilkbaharda gerçekleşmektedir. Ağacın kozalaklarının olgunlaşma süresi ise 26 ay civarındadır. Kozalakların görünümü fıçı ile benzerlik gösterir. Kozalakların sapları kalın ve kısa biçimdedir. Kozalak pulları olgunlaştığı zaman dağılır.

        Sedir Ağacı Nerede Yetişir?
        Sedir ağacının ana vatanı Akdeniz ülkeleridir. Akdeniz ikliminin koşullarında yetişen ağacın en önemli türlerinden birisi olan Lübnan sediri, Toros dağlarında yetişir. Ağaç güneşli yerleri sevdiğinden Akdeniz iklimi tam ona göredir. Kumlu, kireçli ve killi topraklarda büyür. Dona karşı dayanıklı değildir hatta düşük sıcaklıkta bile zarar görebilir. Sedir ağacı sürekli var olan nemden de hoşlanmaz.

        Sıcak iklimleri seven sedirin yarı ışıklı ağaç grubunda olduğunu söyleyebiliriz. Yani verimli bir şekilde büyümesi için ne tam gölge ne de tam güneş olmalıdır. Her iki durumun da sürekli olması ağacın yetişmesinde olumsuz etkendir. Günün farklı saatlerinde alınan güneş, sedir için çok daha yararlı olmaktadır. Tohumları ekildikten 15-20 gün sonra çimlenmeye başlar. Çok yağlı oldukları için uzun süre saklanamaz.

        Diğer kozalaklı ağaçlar gibi büyümesi zaman alan sedirlerin odun yapısı oldukça güçlüdür. Ve yine diğer çam ağaçlarında olduğu gibi odunlarında reçine bulunmaktadır. Reçine sedir ağacı için daha doğrusu tüm ağaçlar için hayati öneme sahiptir. Şöyle ki; ağaç herhangi bir nedenle darbe alınır veya kesilirse, reçine açılan bu yaranın üzerini kapatarak ağacın kendi kendini onarmasını sağlamaktadır. Bu nedenle reçine halk arasında mikrop öldürücü bir ilaç gibi algılanmaktadır.

        Sedir ağacının güçlü odunu gemi yapımı için oldukça elverişli olduğundan, tarihte birçok devlet denizcilik alanında sedirden faydalanmıştır. Eski Mısırlılardan bu yana hayatın birçok alanında kullanılan sedir ağacının kullanımı günümüzde kısmen azalmış durumdadır. Bunda ağaçların bilinçsiz ve kontrolsüz bir şekilde kesilmesinin de payının büyük olduğu bilinmektedir.

        Sedir Ağacının Türleri Nelerdir?
        Sedir ağacının kendi içerisinde dört türü vardır. Cedrus atlantica yani Atlas sediri, sıcak Akdeniz ikliminde yetişebilen orman ağaçlarındandır. Derin ve nemli toprakları seven ağacın, ortalama 6 cm boyutunda, açık kahve renkte kozalakları vardır. Ağacın sağlıklı yetişmesi için yarı gölge ortamlara ve ışık dengesine gerek vardır. Bir diğer sedir ağacı türü Cedrus deodora yani Himalaya sediridir. Adı üzerinde ana vatanı Himalayalar olan ağacın uzunluğu 50 metreye kadar çıkabilmektedir.

        Sedir türleri içinde en uzunu olarak bilinir. Kozalakları ve yaprakları da en büyük olan sedir türüdür. Cedrus libani yani Lübnan sedirinin anavatanı Toros dağlarıdır. Lübnan'da yetişen ağacın günümüzde buradaki varlığı azalmıştır. Lübnan sediri 40 metreye kadar uzanabilir ve fazla nemden hoşlanmaz. Soğuklara ve kurak havaya karşı daha dayanıklıdır. Son olarak Cedrus brevifolia yani Kıbrıs sediri de, sedir türleri arasında yer almaktadır.

        Sedir Ağacının Faydaları Nelerdir?
        Sedir ağacının doğrudan bir faydası bulunmamaktadır ama sedir ağacından elde edilen sedir yağı birçok fayda barındırmaktadır. Yağın ciltteki gözenekleri açma etkisi vardır. Böylece hücreleri canlandırarak cildin güzelleşmesine olanak sağlar. Cildin en büyük sorunlarından biri olan siyah noktalara da iyi gelmektedir. Saç bakımında kolay kırılan saçlara ve kepekli saçlara ilaç niteliğindedir. Yani sağlıklı saçlara ulaşmanın yolu sedir ağacı yağından geçmektedir.

        Cildin yağ dengesini sağladığı için akneyle savaşta da başarılı bir alternatiftir. Sedir ağacı yağı sakinleştirici etkisiyle de bilinir. Sinirlilik durumlarında tedavi edici olarak tercih edilebilir. Ayrıca öksürüğe, bronşite, idrar yolu iltihaplarına iyi gelir. Çok terleyen insanlar için kurtarıcı olabilir. Terlemeyi önleyen sedir ağacı yağı ayrıca vücutta oluşan kötü kokunun da önüne geçer.

        Mide rahatsızlıklarından özellikle ülser ve gastritte iyileştirici etki göstermektedir. Bunun dışında ağacın kozalakları dekor amaçlı kullanılabilmektedir. Yaşlanmış ve artık faydası olmayan ağaçların gövdelerinden ve dallarından faydalanılır. Sedir ağacının insanlığa kazandırdığı en önemli şey sedir ağacı yağı olmuştur. Sedir ağacı yağı çok önemli bir antioksidandır. Ayrıca; çinko, fosfor, demir, selenyum ve manganez açısından zengindir.

        Sedir Ağacı Yağı Nasıl Kullanılır?
        Sedir ağacı yağının en genel kullanımı cilde masaj yapmak şeklindedir. Cilt için kullanılacaksa ele damlatılan 3 damla yağ doğrudan masaj ile uygulanır. Ardından ılık suyla iyice yıkanmalıdır. Saç için kullanılacak durulama suyu içine birkaç damla sedir ağacı yağı damlatıp döktükten sonra saf su ile bir kez daha durulamanız yeterlidir.

        Bazı uzmanlar sedir ağacının suya katılarak içilebilir olduğunu dile getirmiş olsa da bu yöntemin sağlıklı olup olmadığı konusunda net bir bilgi yoktur. Sedir ağacı yağı adı altında piyasada çok sayıda sahte ürün bulunmaktadır. Bu nedenle yağı satın alacağınız zaman güvenilir bir yerden almaya dikkat etmelisiniz. Akdi halde cildinizde beklenenin aksine ciddi sorunlar görülebilir.

        Selvi Ağacı Nedir? Özellikleri ve Faydaları Nelerdir?
        Sedir ağacı yağının diğer faydaları şunlardır; bağışıklık sistemini güçlendirerek hastalıklardan korur, bağırsaklardaki parazitleri temizler, egzama gibi cilt hastalıklarına iyi gelir, sivilce ve aknelere iyi gelir, kalp-damar hastalıklarına iyi gelir, iltihap giderici özelliği vardır. Cedrus Libani olarak bilinen sedir ağacı, yüzyıllardır insanlık tarafından kullanılan değerli bir orman ağacıdır. Özellikle yağından birçok alanda fayda sağlanmaktadır. Sedir ağacının ayırıcı özelliklerini biliyor musunuz? Yeni yıl kutlamalarında süslenen ağacın genellikle sedir olduğunu biliyor muydunuz? Sedir yağını bugüne kadar kullandınız mı? Hangi faydaları gördünüz?

        Yorum yap


        • #5
          Cedrus atlantica'dan elde edilen ekstrakt, in vitro ve in vivo hepatosellüler karsinom büyümesi üzerinde bir antitümör ajanı görevi görür.

          Xiao-Fan Huang , 1, 2 Kai-Fu Chang , 1, 2 Shan-Chih Lee , 3, 4 Gwo-Tarng Sheu , 1 Chia-Yu Li , 5 Jun-Cheng Weng , 6 Chih-Yen Hsiao , 7, 8 , * ve Nu-Man Tsai 2, 9, *
          Halina Ekiert, Akademik Editör ve Luisa Tesoriere, Akademik Editör
          Yazar bilgileri Makale notları Telif hakkı ve Lisans bilgileri Sorumluluk Reddi
          Bu makale, PMC'deki diğer makaleler tarafından alıntılanmıştır .
          Git: Soyut

          Cedrus atlantica , bitkisel tıpta yaygın olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, C. atlantica'nın anti-kanser aktivitesiözü (CAt özü) hepatosellüler karsinomda açıklığa kavuşturulmamıştır. Çalışmada, CAt ekstraktının HCC üzerindeki anti-hepatoma kapasitesini in vitro ve in vivo olarak açıkladık. CAt özütünün anti-hepatoma mekanizmalarını in vitro araştırmak için, HCC ve normal hücreler, doza bağlı bir şekilde HCC hücreleri üzerinde belirgin inhibitör etkiler gösteren CAt özütü ile tedavi edildi; aksine, CAt özü tedavisi normal hücreler için daha az sitotoksik olmuştur. Ek olarak, sonuçlarımız, CAt özütünün kaspaz bağımlı ve bağımsız apoptoz yolları yoluyla apoptozu indüklediğini göstermektedir. Ayrıca, CAt özütü, hücre döngüsü ilerlemesini sınırlayarak HCC tümör hücresi büyümesini inhibe etti ve AKT, ERK1 / 2 ve p38 yollarının sinyallemesini azalttı. Ksenograft modelinde, CAt özütü, PCNA protein ekspresyonunu inhibe ederek, VEGF ile indüklenen otokrin yolunun bir kısmını baskılayarak ve hücre apoptozisine katkıda bulunan bölünmüş kaspaz-3'ün güçlü ekspresyonunu tetikleyerek HCC tümör hücresi büyümesini ve uzatılmış yaşam süresini bastırdı. Ayrıca, CAt özütü, patolojik morfolojide veya vücut ağırlığında herhangi bir belirgin değişikliğe neden olmadı, bu da hiçbir toksisitesi olmadığını düşündürdü. CAt özütü, in vitro ve in vivo olarak HCC üzerinde anti-tümör etkiler gösterdi. Böylece, CAt özütü, HCC'ye karşı potansiyel bir anti-kanser terapötik ajan olarak kullanılabilir. CAt özütü, in vitro ve in vivo olarak HCC üzerinde anti-tümör etkiler gösterdi. Böylece, CAt özütü, HCC'ye karşı potansiyel bir anti-kanser terapötik ajan olarak kullanılabilir. CAt özütü, in vitro ve in vivo olarak HCC üzerinde anti-tümör etkiler gösterdi. Böylece, CAt özütü, HCC'ye karşı potansiyel bir anti-kanser terapötik ajan olarak kullanılabilir.

          Anahtar Kelimeler: hepatosellüler karsinom (HCC), Cedrus atlantica özütü (CAt özütü), hücre döngüsü, apoptoz
          Git: 1. Giriş

          Hepatoselüler karsinom (HCC), kanser tanıları arasında tahmini beşinci sırada ve kanser ölümleri arasında ikinci sırada yer alan en yaygın karaciğer kanseri türüdür [ 1 ]. Yaşam tarzı ve diyet düzenlerindeki değişikliklerle birlikte HCC insidansı ve mortalite oranları dünya çapında artmaktadır [ 2 ]. Ek olarak, hastaların çoğunluğunun ileri evrede teşhis edilmesi nedeniyle, HCC'li hastaların ortalama sağkalım oranı üç aydan azdır [ 3 , 4 ]. Sonuç olarak, transkateter arteriyel kemoembolizasyon (TACE), kombinasyon kemo-ilaçları ve hedefe yönelik tedavi gibi hastalar için sınırlı terapötik seçenekler vardır [ 5]. Bununla birlikte, bu palyatif tedaviler, toksisiteleri ve ilişkili yan etkileri nedeniyle çeşitli problemlerden muzdariptir [ 6 ]. Bu nedenle, klinik kullanım için yeni bir anti-hepatoma ajanının geliştirilmesi hala acildir.

          Otlar ve geleneksel Çin tıbbı yıllardır günlük yaşamda kullanılmaktadır ve gıda, tatlandırıcı ajan, koku veya rahatsızlığı azaltan ve sağlığı iyileştiren ilaçlar olarak kullanılabilir. Ek olarak, bilimsel araştırmalara dayalı olarak, çeşitli bitki özleri, birçok kanser türü üzerinde anti-tümör etkiler göstermiştir [ 7 ]. Ayrıca, birkaç çalışma, bitki özlerinin anti-inflamatuar ve anti-oksidasyon dahil olmak üzere birçok biyolojik fonksiyona sahip olduğunu bildirmiştir [ 8 ]. Günümüzde, bir çok klinik ilaçlar, kolon, meme ve akciğer kanser tedavisinde [uygulanır etoposid, paklitaksel, irinotekan, ve vinkristin gibi, bitkiler, ayıklanır 9]. Bu nedenle, doğal bitkiler, çok hedefli ve koordineli müdahale etkileri nedeniyle HCC hastalarını tedavi etmek için alternatif ve uygulanabilir bir seçim olabilir.

          Cedrus cinsi en az dört tür içerir: C. deodara , C. libani , C. brevifolia ve C. atlantica . Bunların arasında, C. deodara , anti-inflamatuar [ 10 ], anti-kanser [ 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 ], antioksidan [ 17 ] ve antimikrobiyal gibi farklı biyofonksiyonlar açısından geniş çapta incelenmiştir. faaliyetler [ 18 , 19 ]. Anti-kanser aktivitesi açısından C. deodara'nın olduğu gösterilmiştir.Ekstrakt, lösemi gibi çeşitli kanserlerde tümör büyümesi üzerinde bariz engelleyici etkilere sahiptir. Bununla birlikte, C. atlantica'nın anti-tümör aktivitesi , karaciğer kanseri üzerinde in vitro veya in vivo olarak tam olarak araştırılmamıştır. C. atlantica , Kuzey Afrika'da yayılış gösteren önemli bir orman ağacı türüdür ve uçucu yağı parfümeride ve kozmetolojide aroma maddesi olarak kullanılabilir. Gram pozitif bakterilere karşı antibakteriyel bir ajan olarak önerilmiştir [ 20 ] ve inhalasyon yoluyla ağrıyı hafifletebilir [ 21 ]. Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, C. atlantica ekstraktının (CAt ekstraktı) HCC'ye karşı in vitro ve in vivo anti-tümör etkilerini ve mekanizmalarını araştırmaktı .

          Laboratuvarımız, HCC tümör büyümesinin in vitro ve in vivo baskılanmasında CAt ekstraktının önemini açıkladı. Ayrıca, anti-kanser mekanizmaları hakkındaki anlayışımızı hücre döngüsü ilerlemesinin değiştirilmesine, hücre apoptozunun aracılığına ve hücre çoğalmasının inhibisyonuna kadar genişlettik. Daha sonra histopatolojisi tekrar değerlendirildi. Sonuç olarak, CAt ekstraktının etki mekanizmalarına ilişkin yeni anlayışımız, HCC tedavisi için bir antikanser ajanı olarak CAt ekstraktının geliştirilme potansiyeli olduğunu göstermektedir.

          Git: 2. Sonuçlar

          2.1. CAt Özü, HCC Hücrelerinin İn Vitro Hücre Büyümesini Engelledi

          CAt ekstraktının 24, 48 ve 72 saat boyunca seri dilüsyonu ile muamele edilen HCC hücrelerine karşı CAt ekstraktının potansiyel inhibitör etkilerini araştırırken, sonuçlar CAt ekstraktının konsantrasyonda HCC hücre büyümesinin %50'sini etkili bir şekilde bastırdığını ortaya koydu. 25 μg/mL (Şekil 1A). Değerlendirilen HCC hücre hatları arasında, Huh7 hücreleri, 25 μg/mL'de %80'lik bir canlılık düşüşü ile en hassas olanlardı. Diğerlerinde, 50 μg/mL'lik bir konsantrasyonda canlılıkları büyük ölçüde %20'ye düştü. Bu sonuçlar, HCC hücrelerinin canlılığının, CAt ekstresi tedavisinden sonra zamana ve doza bağlı bir şekilde azaldığını ortaya koymaktadır. Ayrıca, CAt özütünün sitotoksisitesi, BNL CL.2 (fare normal karaciğer embriyonik hücreleri), MDCK (köpek normal böbrek epitel hücreleri) ve SVEC (fare normal endotelyal hücreleri) dahil olmak üzere normal hücreler için incelendi ve sonuçlar şunu gösteriyor: CAt özütü, farklı zaman noktalarında 50 μg/mL'nin altındaki hücre canlılığını görünüşte etkilemedi (Şekil 1B). Ardından, gösterildiği gibitablo 1IC 50 verilebilir; HepG CAT ekstresi değerleri 2 , Mahlavu, J5 ve Huh7 hücreleri 27.09 ± 1.83 ng / ml, 33.57 ± 2.84 ng / ml, 32.83 ± 4.31 ng / ml ve 6.09 ± 3.28 ug / mL idi 24 saat Sırasıyla SVEC, MDCK ve BNL CL.2 olan normal hücreler üzerindeki CAt ekstraktının %50 inhibitör konsantrasyonları 68.03 ± 4.05 μg/mL, 69.98 ± 1.56 μg/mL ve 150.03 ± 9.57 μg/mL idi. Özetle, CAt özü, normal hücreler için belirgin bir şekilde sitotoksik olmadan HCC hücre büyümesini etkili bir şekilde inhibe etti.
          Bir resmi, illüstrasyonu vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g001.jpg
          Şekil 1
          Cedrus atlantica özütünün (CAt özü) hepatosellüler karsinom (HCC) ( A ) ve normal ( B ) hücrelerin büyüme inhibisyonu üzerindeki etkileri . Hücreler, gece boyunca 96 oyuklu plakalarda kültürlendi ve 24, 48 ve 72 saat boyunca CAt özütü (0-200 μg/mL) ile veya onsuz işleme tabi tutuldu ve bir MTT tahlili ile değerlendirildi. Veriler, iki bağımsız deneyden elde edilen ortalama ± SD olarak ifade edilir. tablo 1

          HCC ve normal hücrelerde CAt ekstraktının anti-proliferatif inhibitör aktiviteleri.
          Hepatoselüler Karsinom Hücresi
          verilebilir; HepG 2 İnsan HCC hücresi 27.09 ± 1.83
          mahlavu İnsan HCC hücresi 33.57 ± 2.84
          huh7 İnsan HCC hücresi 6,09 ± 3,28
          J5 İnsan HCC hücresi 32,83 ± 4,31
          Normal Hücreler
          SVEC Fare vasküler endotel hücresi 68.03 ± 4.05
          MDCK Köpek epitelyal böbrek hücresi 69,98 ± 1,56
          BNL CL.2 Fare karaciğer embriyonik hücre 150.03 ± 9.57
          Not: Değerler, 48 saatte ortalama ± SD'dir (μg/mL). 2.2. CAt Özü HepG 2 ve Mahlavu Hücrelerinin G 0 /G 1 Fazında Bloke Edilmiş Hücre Döngüsü İlerlemesi

          Eski veriler, CAt özütünün, vahşi tip p53 ile HepG 2 ve mutant p53 (C278L) hücreleri [ 22 , 23 ] ile Mahlavu üzerinde inhibitör etkiler gösterdiğini gösterdi ve bu nedenle hücre döngüsü ilerlemesi ayrıca analiz edildi. Hücre döngüsünün bir değişiklik CAt özü tedaviden sonra tespit edilebilir, ve G'de CAt özü açtığı hücre döngü yakalanmasını 0 / G 1 , her iki hücre hatlarında fazı (şekil 2A). Ayrıca, kedi özü verilebilir; HepG hücre döngüsü engellemiştir 2 G artan nüfus hücreler 0 / G 1 faz (57.35 ±% 0.86 oranında, 61.22 ± 0.61,% 63.13 ±% 0.14, 70.45 ± 0.62 ve% 81.85 ± 0.81,% ) ve S fazını (%18,7 ± %1,25, %18,75 ± 0,5, %15,38 ± %0,10, %16,38 ± 0,59 ve %9,33 ± %0,46) ve G 2 /M fazını (%23,90 ± %1,77, %20,03 ± %0,32) azaltma , 21,49 ± 0,06%, 13,17 ± 0,14% ve 8,82 ± 0,42%) zamana bağlı bir şekilde. Verilebilir; HepG tedavisi 2 gösterdi CAt farklı özüt konsantrasyonları ile hücreler aynı zamanda G hücre döngüsü tutuklama uyarımlı CAT özü 0 / G 1 faz ve düşük S fazı. Mahlavu hücrelerinin hücre döngüsü dağılımı, G'de belirgin bir şekilde tutuklandı.0 /G 1 fazı (%41,94 ± 0,78, %54,71 ± 0,19, 56,42 ± %1,01, %61,84 ± 0,66 ve 58,76 ± %1,89) ve S fazında zamana bağlı önemli bir azalma (%24,83 ± %1,78) olmuştur. , 21.73 ± 0.64,% 20.6 ±% 0.81, 16.32 ±% 0.81, ve 15.44 ± 1.2%) ve G 2 / M faz (33.22 ±% 1.07, 23.55 ± 0.45,% 22.94 ±% 0.51, 21.83 ± 0.49 ve% %25.79 ± %0.61) CAt ekstraktı işleminden sonra (şekil 2B). Buna ek olarak, kedi özü farklı konsantrasyonları ile muamele Mahlavu hücreleri G'de hücre popülasyonunu birikmesine benzer bir trend mevcuttur 0 / G 1 fazın her ikisi de ve G azaltarak ve ardından 2 / M safhaları. Bu sonuçlar, CAt özü G'de hücre döngüsü ilerleyişini engel ortaya koymaktadır 0 / G 1 hem de verilebilir; HepG faz 2 ve Mahlavu hücreleri. Daha sonra HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde CAt ekstraktının hücre döngüsünü düzenleme mekanizmaları incelenmiştir. Literatürde bildirildiği gibi, p53, p21 aktivasyonunu indükleyebilir ve siklin/CDK kompleksi bozulmasına (örn., cdk4 ve siklin D1) aracılık ederek hücre döngüsünün durmasına neden olabilir. Olarakşekil 2C, CAt ekstresi işleminden sonra, vahşi tip p53'e sahip HepG 2 hücrelerinin, p53 ve p-p53 (Ser392) ekspresyonunu 6 saatte çarpıcı biçimde arttırdığını, 24 saatte sürdürdüğünü ve 48 saatte azaldığını göstermektedir. Daha sonra, p21 seviyesi de 6. saatte aniden yükselmiş ve kademeli olarak azalmış, cdk4 ve siklin D1 seviyesi de 6. saatten 48. saate hızla düşmüştür. Bu sonuçlar, CAt özütünün hızla aktive olan p53 ve p21'i, HepG 2 hücrelerinde cdk4 ve siklin D1'in aşağı regülasyonu ile sonuçlandığını ortaya koymaktadır . Rb, hücre proliferasyonunu etkilemek için hücre döngüsü ilerlemesini değiştirebilen bir tümör baskılayıcıdır. Sonuçlar, CAt özütünün HepG 2'de Rb ve p-Rb (Ser24/Thr252) seviyesini önemli ölçüde azalttığını göstermektedir.hücreler. Ayrıca, mutant p53'e sahip Mahlavu hücrelerinin, protein ekspresyon seviyelerini 6 saatten 48 saate kadar koruyan p53 ve p-p53 (Ser392) ekspresyonlarını indüklediği ve p21 seviyesinin 6. ve 12. cdk4 ve siklin D1 ifadeleri, CAt ekstraksiyon tedavisinden 6 saat sonra keskin bir şekilde azaldı. Bu sonuçlar, CAt özütünün p21 ekspresyonunu hızla arttırdığını ve cdk4 ve siklin D1'i hızlı bir şekilde aşağı regüle etmek için aktif p53 ekspresyonunun artışını 48 saate kadar sürdürdüğünü ortaya koymaktadır. CAt özütünden sonra Mahlavu hücrelerinde Rb ve p-Rb (Ser24/Thr252) seviyesi hızla azaldı, bu da CAt özütünün Rb'yi bastırdığını ve p-Rb ifadelerinin HepG 2'den daha güçlü olduğunu ortaya çıkardı.hücreler. Sonuç olarak, CAt özütü, hücre döngüsü ilerlemesini etkilemek için p53 ve p-p53'ü (Ser392) arttırdı ve p21, cdk4 ve siklin D1 dahil olmak üzere aşağı akış protein ekspresyonlarını etkiledi. CAt özütü ayrıca HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde hücre döngüsü ilerlemesine aracılık etmek için Rb ve p-Rb (Ser24/Thr252) protein ekspresyonlarını yönetti.
          Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g002.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          şekil 2
          CAt özü tedavisinin, HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde hücre döngüsü dağılımı ve hücre döngüsü düzenleyicileri ekspresyonu üzerindeki etkileri . Hücreler, belirtilen CAt özü konsantrasyonları ile 6, 12, 24 ve 48 saat süreyle işlendi. Hasattan sonra hücreler propidium iyodür (PI) ile boyandı ve akış sitometrisi ile analiz edildi. Hücre döngüsü ilerlemesinin temsili diyagramı ( A ). Hücre döngüsü dağılımının temsili histogramları ( B ). Hücre döngüsü düzenleyicilerinin protein ekspresyon seviyeleri, Western blot ( C ) ile değerlendirildi. Aktin seviyesi, yükleme kontrolü olarak kullanıldı. *, †: Kontrol ve tedavi arasında önemli fark, p < 0.05. 2.3. HepG 2 ve Mahlavu Hücrelerinde CAt Özü Bastırılmış AKT, ERK ve p38 Protein Ekspresyonu

          Hepatokarsinogenezin biyolojik olarak ilgili sinyal yolları AKT, ERK ve p38 yollarını içerir [ 24 , 25 ] ve bu nedenle bu proteinlerin ekspresyonu Western blot ile aydınlatılmıştır. CAt ekstraktı işleminden sonra, AKT protein ekspresyonu önemli ölçüde azaldı ve ayrıca HepG 2 hücrelerinde p-AKT'nin (Ser473/Ser474/Ser472) fosforilasyonunun 12 saatte inhibisyonu vardı (Figür 3). ERK'nin protein ekspresyonu 12 saatte azaldı ve p-ERK (Tyr204) seviyesi 6 saatte hızla azaldı ve HepG 2 hücrelerinde zamana bağlı bir şekilde sürekli olarak 48 saate düştü . Ayrıca, p-p38 (Tyr182) seviyesi, CAt özütü tarafından düşürüldü ve HepG 2'de p-AKT protein ekspresyonunun inhibisyonu ile benzer bir eğilim gösterdi.hücreler. Mahlavu hücrelerinde, CAt özütü, 24 saatte AKT protein ekspresyonunu önemli ölçüde azalttı ve 6 saatte p-AKT (Ser473/Ser474/Ser472) seviyesini önemli ölçüde azalttı. Bununla birlikte, ERK ve p-ERK (Tyr204) seviyesi, CAt özütü tarafından hızlı bir şekilde inhibe edilmedi ve bu protein ifadeleri 48 saatte önemli ölçüde azaldı. Daha sonra, Mahlavu hücrelerinde p38 seviyesi 6. saatte düşürüldü, 48 saat sürdü ve p-38 (Tyr182) 6. saatte aniden azaldı. Sonuç olarak, CAt özütü, HCC hücre büyümesini kolaylaştıran AKT/p-AKT, ERK/p-ERK ve p38/p-p38 yolları aracılığıyla iyi bir inhibitör yetenek sergilemiştir.
          Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g003.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          Figür 3
          HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde CAt özü tedavisinin AKT, ERK ve p38 protein ekspresyonu üzerindeki etkisi . HepG 2 ve Mahlavu hücreleri, belirtilen zaman noktalarında (0, 6, 12, 24 ve 48 saat) CAt özütü (25 veya 30 µg/mL) ile inkübe edildi ve ardından Western blot analizine tabi tutuldu. Aktin seviyesi, yükleme kontrolü olarak kullanıldı. †: Kontrol ve tedavi arasında önemli fark, p < 0.05. 2.4. CAt Ekstrensek ve İçsel Kaspaz Kaskadlarının Aktivasyonu yoluyla HCC Hücrelerinin İndüklenmiş Hücre Apoptozunu Çıkarma

          Nedeniyle HCC hücrelerinde kedi ekstraktının büyüme önleyici etkisi, alt-G 1 faz CAt ekstraktı, hücre ölümüne neden olup olmadığını tespit etmek için incelenmiştir. Sonuçlar bu alt-G ortaya 1 önemli ölçüde alt-G 60-80 yaklaşık% yükselmiştir faz 1 (bir zaman ve doza bağlı bir şekilde her iki hücre fazıŞekil 4A). Daha sonra, HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde CAt ekstraktının apoptotik hücre ölümünü uyarmasının modu ve mekanizması ayrıca incelenmiştir. TUNEL tahlil sonuçlarında, PI boyamalı işlenmemiş HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinin hücre çekirdeği yuvarlak ve düzdü ve TUNEL'in belirgin yeşil floresansı gözlenmedi. Bununla birlikte, CAt özütü ile muameleden sonra, hücrelerin çoğunda çekirdekler farklı boyutlarda parçalandı ve TUNEL'in yeşil flüoresansı, anoikis, DNA fragmanları, kromatin yoğunlaşması ve apoptotik cisimler dahil olmak üzere çeşitli apoptotik hücre morfolojileri ile birlikte güçlü bir şekilde görüldü. oluşum (Şekil 4B). Sonuç olarak, HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde CAt özütünün neden olduğu apoptotik mekanizmaları araştırmak için apoptozla ilişkili protein ekspresyon seviyeleri değerlendirildi (Şekil 4C). FAS, FASL ve procaspase-8 dahil olmak üzere dışsal apoptozla ilgili proteinler incelendi ve sonuçlar, FAS ve FASL proteinlerinin tedavi edilen Mahlavu ve HepG 2 hücrelerinde yukarı doğru düzenlendiğini gösterdi . Aşağı akış pro-kaspaz-8 protein ekspresyonu, 6 saatte belirgin bir şekilde azaldı ve 48 saate düşmeye devam etti, bu da dışsal yolun aktive olduğunu ortaya koydu. İçsel apoptotik proteinler de araştırıldı ve sonuçlar, HepG 2 hücrelerinde Bax artışının ve Bcl2 ve procaspaz-9'un azalmasının 48 saatte önemli ölçüde azaldığını ve bu da içsel yolun açıldığını gösterir. 48 saatte artan procaspaz-3 seviyeleri ve azalan bölünmüş kaspaz-3 seviyeleri gözlemlendi, bu da HepG'de kaspaz kaskadının 48 saatte tamamen aktive olduğunu düşündürdü.2 hücre. Ayrıca, AIF seviyesi (apoptoz indükleyen faktör) 6. saatte çarpıcı biçimde arttı ve bu, HepG 2 hücrelerinde protein ekspresyonunu sürekli olarak güçlendirdi . Ayrıca, FAS ve FASL proteinlerinin seviyeleri keskin bir şekilde arttı, ardından Mahlavu hücrelerinde procaspaz-8'in 6 saatte aktive edilmiş dış yolaktaki düşüşü izledi. Bax, Bcl2 ve procaspase-9 dahil olmak üzere içsel apoptotik proteinler, 6 saatte CAt özünden hızla etkilendi. Bax ve Bcl2 seviyeleri, HepG 2'de tespit edilene benzer bir eğilim gösterdi.Mahlavu hücrelerinde içsel yolun aktivasyonunu kolaylaştırmak için aşağı akış proteini procaspaz-9 6 saatte azaltıldı. Ek olarak, Mahlavu hücrelerinde procaspaz-3 protein ekspresyonu azaldı ve klivajlı kaspaz-3 protein ekspresyonu zamana bağlı bir şekilde arttı. Mahlavu hücrelerinde AIF seviyesi, CAt ekstraktı işleminden sonra artmış, bu da kaspazdan bağımsız yolun aktivasyonu ile sonuçlanmıştır. Bu nedenle, CAt özütü, dışsal olduğu kadar içsel kaspaz bağımlı ve bağımsız apoptoz yolları da dahil olmak üzere hücre apoptozunun indüklenmesi yoluyla hücre proliferasyonunu bloke etti.
          Resim, illüstrasyon vb. içeren harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g004.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          Şekil 4
          HepG 2 ve Mahlavu hücrelerinde CAt özü tedavisinin apoptoz üzerindeki etkileri . Alt-G yüzdesi 1. verilebilir; HepG Cat özü tedaviden sonra akış sitometrisi ile analiz edilmiştir faz 2 ve Mahlavu hücrelerinde ( A ). Floresan mikroskobu ile 24 saat boyunca CAt özütü (25 veya 30 μg/mL) ile veya bunlar olmadan tedavi edilen HepG 2 ve Mahlavu hücreleri üzerindeki TUNEL ifadesinin fotoğrafı ( B), kırmızı ok: anoikis; mavi ok: kromatin yoğunlaşması; sarı ok: DNA parçaları; beyaz ok: apoptotik cisimler. 0, 6, 12, 24 ve 48 saat boyunca CAt özütü (25 veya 30 μg/mL) ile işlenen hücreler ve belirtilen protein ekspresyonunun analizi için hücre lizatları toplandı. CAt özü ile indüklenen apoptotik protein ekspresyonunun etkileri, Western blot ( C ) ile analiz edildi . c-kaspaz-3: bölünmüş kaspaz-3. *, †: Kontrol ve tedavi arasında önemli fark, p < 0.05. 2.5. CAt Özü Bastırılmış HCC Ksenogreft Tümör Büyümesi ve Uzatılmış Ömür

          CAt ekstraktının HCC tümörleri üzerindeki inhibitör potansiyelini incelemek için bir HCC ksenograft modeli kuruldu. HepG 2 karaciğer kanseri ksenogreftlerini taşıyan farelere bir araç olarak mineral yağ deri altından enjekte edildi veya iki günde bir CAt özütü (200 mg/kg, sc) ile tedavi edildi. Tümör hacmi daha büyük 2000 mm iken 3 fareler takip patolojik analizi için organ yanı sıra tümör toplamak için kurban edilmiştir. Veriler, CAt özü tedavisinin, araçla karşılaştırıldığında HCC ksenograftının tümör yükü üzerinde 39. günde yaklaşık %42.3'lük bir inhibitör etki elde ettiğini ortaya koymaktadır (Şekil 5A; 882,4 ± 62,9 mm 3 2077,2 ± 160.2 mm karşı 3 ). Veriler ayrıca CAt özlerinin araçla karşılaştırıldığında ömrünü 43 günden 51 güne uzattığını gösteriyor (Şekil 5B). Dolayısıyla bu veriler, CAt özütünün HCC tümör büyümesi üzerinde antitümör etkileri olduğunu ve in vivo hayatta kalma sonuçlarını iyileştirdiğini göstermektedir. Daha sonra, in vivo olarak CAt özütünün neden olduğu sistematik toksisiteyi değerlendirmek için farelerin vücut ağırlıkları iki günde bir ölçülmüştür. Sonuçlar, vücut ağırlığındaki değişikliklerde CAt özü tedavisi ile araç arasında önemli bir fark olmadığını ortaya koydu, bu da CAt özütünün in vivo çok az toksisiteye sahip olabileceğini düşündürdü (Şekil 5C). Ek olarak, hematoksilen/eozin (H&E) ile boyanmış karaciğer ve böbrek dokularının patolojik bir değerlendirmesi yapıldı; doku morfolojisinde belirgin bir değişiklik olmadı (Şekil 5NS). Sonuçlar, vücut ağırlığı ve organ hasarı ile değerlendirildiğinde, CAt ekstraktının çok az veya hiç toksisite gösterebileceğini göstermektedir.
          Bir resmi, illüstrasyonu vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g005.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          Şekil 5
          CAt özütü (200 mg/kg) ile tedavi edilen HCC'nin ksenograft tümör modeli. CAt ekstresi tedavisinden sonra HCC tümör büyümesinin tümör baskılanması ( A ) ve hayatta kalma oranı ( B ). HCC ksenogreftinde CAt özü uygulamasının sistemik toksisitesinin değerlendirilmesi. CAt özü tedavisinden sonra vücut ağırlığı ( C ). Karaciğer ve böbreğin hematoksilen/eozin (H&E) boyaması ( D ). 2.6. CAt Ekstresi, Apoptoz İndüklenmesi, Hücre Proliferasyonunun Azaltılması ve Metastatik Protein Belirteçlerinin Düşüşü yoluyla Antihepatoma Kapasitesini Sergiledi

          Daha sonra, CAt özütünün HCC ksenograft hayvan modeli üzerindeki etkilerinin mekanizmalarını daha fazla açıklamak için, CAt özütünün neden olduğu tümör hücresi hasarı, H&E boyaması ile gözlemlendi ve sonuçlar, CAt özütünün tümör hücresi ölümünü tetiklediğini ortaya koydu (Şekil 6A). Bu nedenle, CAt özütü tarafından indüklenen hücre apoptozunun kanıtlarını aradık. Sonuçlar, bölünmüş kaspaz-3'ün protein ekspresyonunun arttığını ve tümör dokusunda apoptotik cisimlerin gözlendiğini göstermektedir (Şekil 6B). Ayrıca, TUNEL tahlili, hepatom hücrelerinin çoğunda birçok DNA parçasının gözlemlendiğini ve CAt özütünün çok sayıda TUNEL pozitif hücreyi indüklediğini ortaya koydu (Şekil 6C). Bu sonuçlar, CAt özütünün hücre apoptozunu indükleyerek tümör hücresi ölümünü tetiklediğini ortaya koymaktadır. Daha sonra, HCC ksenograftlarında CAt ekstraktının inhibe edici mekanizmalarını belirlemek için PCNA, VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2'nin protein ekspresyonu immünohistokimyasal (IHC) boyama ile incelenmiştir. PCNA, hücre döngüsünün DNA sentezi fazı sırasında ifade edilir. CAt özütü, PCNA proteininin ekspresyonunu azalttı, bu da hepatom hücrelerinde hücre döngüsü ilerlemesini etkileme yeteneğine sahip olabileceğini düşündürdü.Şekil 7A). VEGF ve hedef reseptörleri VEGFR1 ve VEGFR2, CAt ekstraktından etkilenebilecek otokrin VEGF sinyallemesinin inhibitör etkilerini araştırmak için incelenmiştir. Sonuçlar, VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 protein ifadelerinin tümünün, CAt ekstresi muamelesi ile azaldığını, bu da, CAt ekstresinin VEGF otokrin sinyalini azaltabileceğini düşündürmektedir. Ayrıca, CAt özütünün anti-metastaz potansiyelini araştırmak için MMP2 ve MMP9 protein ekspresyonu test edildi ve CAt özütünün hem MMP2 hem de MMP9'un ekspresyonunu baskıladığını bulduk, bu da CAt özütünün baskılama potansiyeline sahip olabileceğini düşündürdü. MMP2 ve MMP9 protein ekspresyonunu inhibe ederek HCC istilası (Şekil 7B). Birlikte ele alındığında, CAt özütü, apoptoz indüksiyonu ve hücre proliferasyonunun kesintiye uğraması dahil olmak üzere, in vitro bulunan verilerle tutarlı sonuçlarla, in vivo olarak birkaç anti-HCC etkisine sahip olabilir. Sonuç olarak, GC-MS ile CAt ekstraktındaki etkili bileşenleri analiz etmeyi amaçladık veTablo 2, beş ana bileşen thujopsen (%43.36), α-sedren (%31.67), α-kadinen (%2.73), cedrol (%1.42) ve izolongipholen (%0.52) idi. Cedrol, anti-kanser aktivitesi bildirmiştir [ 26 ] ve HCC hücre büyümesini inhibe etmek için etkili bir bileşik olabilir.
          Bir resmi, illüstrasyonu vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g006.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          Şekil 6
          H&E, immünohistokimyasal (IHC) ve TUNEL boyama ile HCC ksenograft tümör modelinde CAt özü kaynaklı apoptoz. ( A ) H&E boyama ile değerlendirilen doku morfolojisi. ( B ) CAt özü ile indüklenen bölünmüş kaspaz-3 ifadesi. ( C ) Apoptotik hücrelerin gözlemlenmesi için TUNEL boyama. *: Kontrol ve tedavi arasında anlamlı bir fark, p < 0.05.

          Bir resmi, illüstrasyonu vb. tutan harici bir dosya. Nesne adı moleküller-25-04608-g007.jpg
          Ayrı bir pencerede aç
          Şekil 7
          IHC boyaması ile HCC ksenograft tümör modelinde CAt özütünün neden olduğu inhibitör etki. HCC tümör dokularında belirtilen protein ekspresyonu, IHC ile boyandı. ( A ) PCNA, VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 proteininin seviyesi. ( B ) MMP2 ve MMP9 proteininin seviyesi. †: Kontrol ve tedavi arasında anlamlı bir fark, p < 0.05. Tablo 2

          CAt ekstresinin GC-MS analizi.
          1 Thujopsen %43.36 470-40-6 204.35 g/mol
          2 α-Sedren %31.67 469-61-4 204.35 g/mol
          3 α-Kadinen %2.73 11044-40-9 204.35 g/mol
          4 sedrol %1,42 77-53-2 222.37 g/mol
          5 izolongifolen %0.52 1135-66-6 204.35 g/mol
          Not: GC-MS analizi, Ulusal Merkez Tayvan Üniversitesi Araştırma ve Geliştirme Ofisi'nin Gelişmiş Enstrümantasyon Merkezi'ne (Hsinchu, Tayvan) taahhüt edilmiştir. Bileşenler, kütle spektrumları, Wiley/NIST kitaplıklarının otantik örneklerinden veya spektrumlarından elde edilenlerle karşılaştırılarak tanımlandı.

          Git: 3. Tartışma

          Bitkisel ve bitkisel ilaçlar dünya çapında yüzyıllardır kullanılmaktadır. Ayrıca, son yıllarda, önemli sayıda şifalı bitkinin virüsleri ortadan kaldırarak, fibrogenezi hafifleterek ve tümör oluşumunu baskılayarak kronik karaciğer hastalıklarının tedavisinde biyofonksiyonel etkileri olduğu bildirilmiştir. Sonuç olarak, bitki özleri kanser tedavisi için potansiyel anti-kanser adayları olarak düşünülebilir [ 9 , 10]. Burada, in vitro ve in vivo olarak CAt ekstresinin anti-hepatoma aktivitesini araştıran ilk çalışmada, sonuçlarımız ilk olarak HCC hücrelerinin CAt ekstresi tarafından inhibe edildiğini buldu; yine de, CAt ekstraktının sitotoksisitesi, karaciğer embriyonik hücreleri, böbrek epitel hücreleri ve endotel hücreleri dahil olmak üzere normal hücrelere karşı orta düzeydeydi. Sonuçlar ayrıca CAt özütünün G 0 /G 1'de hücre döngüsü ilerlemesini bloke ettiğini gösterir.in vitro faz. Ek olarak, p53 proteini belirgin bir şekilde 6 ila 24 saat arasında arttı ve fonksiyonel fosforile edilmiş p53, CAt özütü ile arttırıldı. Aşağı akış proteini p21, p53 ve p-p53 protein ekspresyonunun artmasından sonra arttı ve cdk4 ve siklin D1'in zamana bağlı bir şekilde azaldığı bulundu. Hücre döngüsü ile ilgili protein ekspresyon seviyelerinin değiştirilmesi, hücre döngüsü ilerlemesinin durdurulmasına katkıda bulunmuştur. Ayrıca, TP53 mutasyonu kötü prognoz ile ilişkilidir [ 27].]. Sonucumuz, CAt özütünün hem vahşi tip hem de mutant p53 HCC hücreleri üzerinde engelleyici bir etki uyguladığını gösterir. Ayrıca, toplam Rb ve fosforile edilmiş Rb, 6 saat içinde önemli ölçüde azaldı, bu da hücre proliferasyonunu hafifletmek için E2F ve Rb'nin ayrışma oranını artırabilir. Öte yandan, MAPK ve AKT/mTOR sinyal yolakları hücre proliferasyonu, farklılaşması ve hayatta kalmasının kontrolünde esastır ve HCC'nin patogenezini belirlemek için çalışılmıştır [ 24 , 25 ]. AKT/mTOR yolu hepatokarsinogenezde önemli bir rol oynar [ 28 , 29 ] ve önceki bir çalışma, HCC dokularında p-AKT proteininin yaklaşık %53 pozitif ekspresyonunu ve sirotik dokuların %12'sini göstermiştir [ 30 ].]. Bu nedenle, HCC tedavisi için antikanser ilaç hedefi olarak çekici bir adaydır. Ayrıca, ERK hücre döngüsü ilerlemesini, apoptoz direncini, hücresel hareketliliği ve ilaç direncini düzenleyebilir. Sonuç olarak, HCC gelişimini inhibe etmek ve HCC tümörlerinde hücre apoptozisini artırmak için ERK'nin baskısı uygulandı [ 31 ]. İlk olarak, fosforile edilmiş AKT, ERK ve p38'in, CAt özü tedavisinden sonraki 12 saat içinde hızla azaldığını bulduk; bu, CAt özütünün, erken bir aşamada HCC gelişimini önlemeye yardımcı olarak, hepatokarsinogenezi baskılama potansiyeline sahip olduğunu düşündürdü.

          Daha sonra, CAt özütünün hücre apoptozunu indükleyip indüklemediğini test etmek için TUNEL boyamasını kullandık ve birçok hücrenin TUNEL yeşili pozitif olduğunu bulduk. Apoptoz indüksiyon mekanizmasının detayları incelendi. CAt özü tedavisinden sonra, FAS ve FASL ekspresyonu 12-24 saatte arttı, bu da procaspaz-8 proteininin ekspresyonunun 12 saatte dramatik bir şekilde azalmasına neden olmuş olabilir. Bununla birlikte, procaspaz-8, FAS ve FASL proteini artmadan önce azaldı, bu da CAt ekstraktının, daha fazla araştırdığımız farklı mekanizmalar yoluyla dışsal apoptotik yolu düzenleyebileceğini düşündürmektedir. Bax, Bcl2 ve procaspase-9 proteinleri HepG 2'de hızlı düşüşler göstermediğinden CAt özütü, içsel apoptotik yolu doğrudan etkilemeyebilir.hücreler. Mahlavu hücrelerinde, CAt özü, Bax protein ekspresyonunu hızla arttırdı ve 6 saatte Bcl2 ve procaspaz-9 protein ekspresyonunu keskin bir şekilde azalttı. Apoptozun geç aşamasında, CAt, her iki hücre hattında güçlü ve hızlı bir şekilde indüklenen bölünmüş kaspaz-3 protein ekspresyonunu çıkarır. Bu sonuçlar, CAt özütünün hem dışsal hem de içsel apoptoz yolları yoluyla hücre apoptozunu tetiklediğini ortaya koymaktadır. AIF protein ekspresyonunun değişimi 12 ila 24 saatte büyük ölçüde arttı, bu, CAt özütünün sadece kaspaz bağımlı yolu indüklediğini değil, aynı zamanda hücre apoptozuna katkıda bulunan kaspazdan bağımsız yolu da aktive ettiğini ortaya koydu. Birlikte ele alındığında, sonuçlar CAt özütünün hücre döngüsü ilerlemesinin inhibisyonu, hücre apoptozunun indüklenmesi ve in vitro AKT, ERK ve p38 sinyalinin baskılanması yoluyla HCC tümör büyümesini baskıladığını göstermektedir.

          Ksenograft modelinde, sonuçlar ilk önce CAt özütünün iyi bir HCC tümör baskılama yeteneği uyguladığını gösterir. H&E boyamasında görüldüğü gibi, HCC dokusunun belirgin bir anafaz hücre morfolojisi gözlendi. Hücre gövdelerinin çoğu küçülüyordu ve hücre çekirdekleri parçalanarak hücre ölümüyle sonuçlanıyordu. Benzer şekilde, TUNEL için boyanmış HCC tümör dokusu, CAt özütünün apoptotik cisimlerin oluşumu ve DNA fragmantasyonu ile hücre apoptozunu indüklediğini ortaya koydu. Ek olarak, bölünmüş kaspaz-3, CAt özütünün in vitro HCC hücre apoptozunu indüklediğini doğrulayarak güçlü bir şekilde eksprese edildi. Daha önceki sonuçlar, CAt'ın hücre döngüsü ilerlemesini engellemek için düzenlenmiş hücre döngüsü ile ilgili proteinleri çıkardığını ortaya koydu. PCNA bir çoğalma belirtecidir ve hücre döngüsünün durumunu temsil edebilir. Ayrıca, HCC hücreleri, geç G sırasında artan PCNA'yı yüksek oranda eksprese eder.1 veya hücre döngüsünün çok erken S fazları [ 32 ]. Sonuç olarak, bir in vivo çalışmada, CAt ekstraktının hücre döngüsü ilerlemesini etkileyip etkilemediğini değerlendirmek için PCNA test edildi. CAt özütü, in vitro gözlemlenen sonuçlarla tutarlı olarak, HCC tümör hücresi büyümesini inhibe ettiğini gösteren PCNA protein ekspresyonunu verimli bir şekilde azalttı. Daha sonra, CAt ekstraktının VEGF/VEGFR ile indüklenen otokrin veya parakrin proliferasyonunu in vivo baskılayıp baskılamadığını merak ettik; bu nedenle VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 ifadeleri incelenmiştir. Ek olarak, VEGF/VEGFR sinyali sadece HCC'nin anjiyogenezinde kritik bir rol oynamakla kalmaz, aynı zamanda HCC'nin otokrin ilerlemesinde hayati bir role sahiptir [ 33 , 34 ].]. Önceki çalışmalar VEGFR1 ve VEGFR2'nin HCC'de aşırı eksprese edildiğini ve yüksek VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 seviyelerinin kötü bir prognoza işaret ettiğini bildirmiştir [ 35 , 36 ]. Sonuçlar, CAt özütünün, in vivo VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 ekspresyonlarını aşağı regüle ederek VEGF/VEGFR ile indüklenen otokrin veya parakrin proliferasyonunun baskılanmasında bir inhibitör potansiyel uyguladığını göstermektedir. Dolayısıyla bu sonuçlar, HCC tümör büyümesini baskılamak ve HCC hastalarının prognozunu iyileştirmek için VEGF/VEGFR otokrin büyüme yolunun kısıtlanmasıyla CAt ekstraktının farklı ve potansiyel bir inhibitör etkisi sağlar. Ek olarak, bazı çalışmalar, aktive edilmiş PI3K/AKT sinyal yolunun karaciğer kanseri ilerlemesi ile korele olduğunu ve VEGF/VEGFR1 ekspresyonunu desteklediğini göstermiştir [ 37 ,38 , 39]. Bu nedenle, sonuçlar aynı zamanda, CAt özütünün yalnızca yukarı akış proteininin aktive edilmiş AKT ekspresyonunu in vitro olarak inhibe etmekle kalmayıp, aynı zamanda HCC tümör hücresi büyümesini baskılamak için in vivo VEGF, VEGFR1 ve VEGFR2 ekspresyonlarını da bastırdığını önerebilir. Ayrıca, CAt özütü, istilada önemli roller oynayan MMP2 ve MMP9 protein ekspresyonunu azalttı ve CAt özütünün in vivo olarak istila önleyici aktiviteye sahip olabileceğini ortaya koydu. Bu nedenle, bu çalışmada CAt ekstraktının birden fazla işlevi olduğu gözlemlendi: büyüme inhibisyonu, otokrin sinyallemesinin azaltılması, apoptoz indüksiyonu ve metastazın baskılanması. CAt ekstraktındaki antihepatoma bileşiğini daha fazla bulmak için, sonuçlarımız, küçük hücreli olmayan akciğer kanserinde antikanser aktivitesi nedeniyle cedrolün, CAt ekstraktındaki etkili antikanser bileşenlerinden biri olabileceğini ortaya koymaktadır [ 26].] ve diğerlerinin gelecekte antikanser aktivitesini araştırmak için daha fazla çalışma yapması gerekebilir.

          Hepatokarsinogenez sırasında, virüs saldırısı, alkol kötüye kullanımı veya yağ asitlerinin birikmesi nedeniyle karaciğer fonksiyonu zarar görür. Bu nedenle, karaciğer toksisitesi, klinisyenler için HCC hastalarını tedavi etmenin fizibilitesini değerlendirmede önemli bir kriterdir. Bu nedenle, CAt özü ile tedaviden sonra vücut ağırlıklarındaki değişiklikleri ve karaciğer ve böbrek dokusundaki patolojik değişiklikleri değerlendirdik. Sonuçlar, CAt ekstraktının tüm tedavi süresince vücut ağırlığı üzerinde neredeyse hiçbir etkisi olmadığını ortaya koymaktadır. Karaciğer dokusu, sitoplazmayı, tam bir hücre zarını ve bir çekirdeği dolduran sağlıklı karaciğer hücrelerini gösterdi. Böbrek dokusunda glomerulusun bütünlüğü bozulmamıştı. CAt özü tedavisi, herhangi bir belirgin patolojik morfolojiye neden olmadı. Birlikte ele alındığında, CAt özütünün organlara karşı çok az toksisitesi vardı,

          Birlikte ele alındığında, sonuçlar CAt özütünün apoptoz indüksiyonu, hücre döngüsünün durdurulması, otokrin sinyallemesinin baskılanması ve AKT/ERK/p38 sinyallemesinin inhibisyonu yoluyla HCC tümör hücresi büyümesi üzerinde inhibitör bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir. Ayrıca, CAt özütü, istilanın bastırılması için potansiyel bir kapasiteye sahiptir. Ksenogreft modelinde toksisitenin değerlendirilmesi, farelerde hiç veya çok az değişiklik ortaya çıkardı. Sonuç olarak, bulgularımız HCC tedavisinde CAt ekstraktının daha ileri çalışmaları için bir temel oluşturmaktadır. Bununla birlikte, moleküler yolu tam olarak açıklığa kavuşturmak için ek araştırmalara ihtiyaç vardır. Genel olarak, CAt ekstraktının HCC'ye karşı in vitro ve in vivo klinik uygulamalar için potansiyele sahip olduğu söylenebilir.

          Git: 4. Malzemeler ve Yöntemler

          4.1. Hücre kültürü

          İnsan hepatoselüler karsinom hücreleri (HepG 2 , Mahlavu, Huh7 ve J5), fare normal karaciğer embriyonik hücreleri (BNL CL.2), fare normal endotelyal hücreleri (SVEC) ve köpek normal böbrek epitel hücreleri (MDCK) American Type'dan satın alındı. Kültür Koleksiyonu (Manassas, VA, ABD) ve Biyokaynak Toplama ve Araştırma Merkezi (Hsinchu, Tayvan). Hücreler, Dulbecco'nun modifiye edilmiş Eagle ortamında (HepG 2 , Mahlavu, Huh7, BNL CL.2, SVEC ve MDCK hücreleri) veya %10 fetal sığır serumu ile takviye edilmiş Roswell Park Memorial Institute 1640 (J5 hücresi) içinde büyütüldü, % 1 sodyum piruvat,% 1 HEPES, ve% 1 penisilin / streptomisin,% 5 CO içeren bir inkübatör içinde 237 °C'de. Tüm reaktifler Gibco'dan (Waltham, MA, ABD) satın alındı. Hücrelerdeki genlerin durumu, FemtoPath Primer Seti (HongJing Biotech, New Taipei City, Tayvan) ile belirlendi. 4.2. Cedrus atlantica Bitki Malzemesinin Ekstraksiyonu

          Cedrus atlantica özütünün (CAt özü) buharla damıtılmış preparasyonu, PHOENIX'ten (Red Bank, NJ, ABD) satın alındı. Küçük ölçekli ekstraksiyon için, bir Cedrus atlantica'nın taze kabuğuaslen Amerika'dan olan bitki (500 g) kullanıldı. Üretilen buharın akış hızı 7.2 mL/dak olup, 100 dakika boyunca 100~105 °C'de bitki materyalinden geçirilmiştir. Ekstraksiyondan sonra iki katman oluşturuldu: biri sulu katman, diğeri ise deneyler boyunca kullanılan lipit katmanıydı. Ekstrakte edilen CAt solüsyonu (lipid tabakası) alikotlandı ve kahverengi bir cam şişede kapatıldı ve daha sonra 4 °C'de saklandı. CAt özüt konsantrasyonu, ug/mL olarak hesaplandı ve kültür ortamındaki son çözücü konsantrasyonu %0.2'yi geçmeyecek şekilde DMSO (Sigma Aldrich, Saint Louis, MI, ABD) içinde seyreltildi. 4.3. HCC Hücreleri Üzerindeki CAt Ekstraktının Sitotoksisitesi

          HCC hücreleri (5 x 10 3 de hücre /), BNL CL.2 (4 x 10 4 hücre / çukur), MDCK, ve Svec (1 x 10 4 hücre / kuyu) ekildi ve bir gece boyunca 96 oyuklu plakalarda büyütüldü. Hücreler, 24, 48 ve 72 saat boyunca araç (%0.1 DMSO) ve seri CAt ekstrakt konsantrasyonları (0-200 μg/mL) ile işlendi. Hücre canlılığı, MTT bazlı kolorimetrik deneylerle ölçüldü. Oluşan formazan kristalleri DMSO ile çözündürüldü ve absorbans, bir SpectraMax M5 mikroplaka okuyucusu (Molecular Devices, San Jose, CA, ABD) ile 550 nm dalga boyunda ölçüldü. Etkili absorbans, tedavi (OD)/araç (OD) x %100 olarak sunulan hücre canlılığı (%) için hesaplandı. Deneyler üç kopya halinde analiz edildi. 4.4. Akış Sitometrik Analizi

          Verilebilir; HepG 2 ve Mahlavu hücreleri 2 x 10 bir yoğunlukta 10 cm tabaklarda kaplandı 6 , bir gece boyunca inkübe edildi ve 6, 12, 24 ya da kedi özü belirtilen miktan ile 48 saat süreyle işlemden geçirildi. Hücreler tripsinize edildi, PBS ile yıkandı ve 40 ug/mL propidyum iyodür (PI, Sigma Aldrich, Saint Louis, MO, ABD) ve 100 ug/mL RNaz A (Sigma Aldrich, Saint Louis, MO, ABD) karanlıkta bir gecede. Hücre döngüsü ilerlemesi, bir FACS Calibur cihazı (BD, Franklin Lakes, NJ, ABD) ile tespit edildi ve hücre döngüsü dağılımının yüzdesi, FlowJo 7.6.1 (Ashland, OR, ABD) ile analiz edildi. Verilen değerler, üç kopya halinde gerçekleştirilen üç farklı deneyin ortalama ± SD'sidir. 4.5. TUNEL Testi

          Verilebilir; HepG 2 ve Mahlavu hücreleri (2 x 10 5 ) bir karışımı, 6 oyuklu plakalar içinde ekildi. Hücreler, 24 saat boyunca araç veya CAt özü (25 veya 30 μg/mL) ile işlendi. Hücreler, slaytlar üzerinde 10 dakika boyunca 4 °C'de %4 formaldehit/metanol kullanılarak sabitlendi ve üreticinin talimatlarına göre (In Situ Cell Death Detection Kit, Roche, Basel, İsviçre) terminal deoksinükleotidil transferaz (TdT) ile boyandı. PI boyamadan sonra (10 μg/mL), slaytlar bir kapak camı ile kapatıldı. Her deney üç kopya halinde gerçekleştirildi. Floresan, mikroskopi (ZEISS Axio Imager A2, Bremen, Almanya) ile x400 alan altında görselleştirildi ve görüntüler Photoshop'ta (Adobe, San Jose, CA, ABD) ayarlandı. 4.6. Western Blot Analizi

          Verilebilir; HepG 2 ve Mahlavu hücreleri (2 x 10 6) gece boyunca 10 cm'lik tabaklarda büyütüldü ve belirtilen CAt özü konsantrasyonu ile farklı zaman noktalarında CAt özütü ile işlendi. Protein konsantrasyonu, üreticinin talimatlarına göre BCA Protein Test Reaktifi (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ABD) ile ölçüldü. Proteinler %8-12 SDS-PAGE ile çözüldü ve PVDF membranlarına aktarıldı. Yağsız süt ile bloke edildikten sonra, membranlar gece boyunca 4 °C'de birincil antikorlarla inkübe edildi, ardından 2 saat boyunca oda sıcaklığında HRP'ye (yaban turpu peroksidaz) konjuge edilmiş ikincil antikorlarla inkübe edildi. Protein ekspresyonunu görselleştirmek için geliştirilmiş kemilüminesans saptama reaktifleri (T-Pro Biotechnology, New Taipei City, Tayvan) kullanıldı ve görüntüler bir LAS-4000 Lüminesans/Floresan Görüntüleme Sistemi (GE Healthcare, Uppsala, İsveç). Protein ifadesi, ImageJ yazılımı (NIH, Bethesda, MD, ABD) kullanılarak ölçüldü. Birincil ve ikincil antikorların tümü, Santa Cruz Biotechnology, Inc.'den (Dallas, TX, ABD) ve iReal Biotechnology Co., Ltd.'den (Hsinchu, Tayvan) satın alındı. Tüm analizler biyolojik kopyalarda yapıldı. 4.7. HCC Ksenograft Modeli

          Dişi BALB/c çıplak fareler (6-8 haftalık), Tayvan, Taipei'deki Ulusal Laboratuvar Hayvan Merkezi'nden elde edildi. Tüm hayvan çalışmaları, Chung Shan Tıp Üniversitesi Laboratuar Hayvanları Merkezi (Taichung, Tayvan; no. CSMU-IACUC-1662) tarafından onaylanan protokole uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Verilebilir; HepG 2 hücreleri (1 x 10 6 /100 uL / fare) farelere deri altından sağ-destek enjekte edildi, ve İlaç idaresi beş gün sonra başlatıldı. Ksenograftlı tüm fareler rastgele iki gruba ayrıldı: biri 100 μL mineral yağ ile araçla tedavi edildi ( n = 6) ve diğeri 200 mg/kg/100 μL CAt özütü ile tedavi edildi ( n= 10). Tedaviler iki günde bir subkutan enjeksiyonla verildi ve bu arada tümör hacmi ve vücut ağırlığı kaydedildi. Tümör hacmi (TV) şu formül kullanılarak hesaplandı: uzunluk x genişlik x yükseklik. Tümör hacmi 2000 mm ulaştığı zaman fareler her kurban edilmiş 3 son sağkalım gün olarak. Kurban edildikten sonra tümörler ve organlar (kalp, karaciğer, dalak, akciğer, böbrek, mide ve bağırsak) toplandı. Dokular %10 nötr formalin ile sabitlendi ve immünohistokimyasal ve H&E boyama için parafine gömüldü. Fotoğraflar x400'de mikroskopi ile çekilmiştir (ZEISS Axio Imager A2, Bremen, Almanya). 4.8. İmmünohistokimya (IHC) ve Hematoksilen/Eozin (H&E) Boyama

          Eksize edilen tümörler ve organlar %10 formalin içinde sabitlendi ve parafin mumu içine gömüldü. Dokular hematoksilen/eozin ile boyandı ve morfolojik değişiklikleri değerlendirmek için x200 ışık mikroskobunda incelendi. Tümör dokularındaki apoptotik hücreler, üreticinin talimatlarına göre gerçekleştirilen In Situ Hücre Ölümü Tespit Kiti (Roche, Basel, İsviçre) ile tespit edildi ve fotoğraflar x400 floresan mikroskobu altında gözlemlendi. Bölünmüş kaspaz-3, PCNA, VEGF, VEGFR1, VEGFR2, MMP2 ve MMP9, belirtilen protein ifadelerini x400 ışık mikroskobu altında gözlemlemek için immünohistokimyasal prosedürle boyandı. Birincil ve ikincil antikorların tümü, Santa Cruz Biotechnology, Inc.'den (Dallas, TX, ABD) satın alındı. 4.9. CAt Ekstraktının Gaz Kromatografisi-Kütle Spektrometrisi (GC-MS) Analizi

          GC-MS analizi, Ulusal Merkez Tayvan Üniversitesi Araştırma ve Geliştirme Ofisi'nin Gelişmiş Enstrümantasyon Merkezi'ne (Hsinchu, Tayvan) görevlendirildi. Numune heksan (1/500) kullanılarak seyreltildi, taşıyıcı gaz helyum (1 mL/dakika) ve enjektör sıcaklığı 300 °C ve 1 mL/dakika enjeksiyon akış hızı ile yapıldı. GC-MS'yi yürütmek için bir Rxi-5MS kapiler kolonlu (film kalınlığı: 30 m x 0.25 mm x 0.25 um) Agilent 7890CB gaz kromatografı (AccuTOF-GCx, Jeol, MA, ABD) kullanıldı. Bileşenler, kütle spektrumları, Wiley/NIST kitaplıklarının otantik örneklerinden veya spektrumlarından elde edilenlerle karşılaştırılarak tanımlandı. 4.10. İstatistiksel Hesaplamalar

          Sonuçlar, ortalama ± SD olarak ifade edilir. Gruplar arasındaki farklılıklar Student t -testi ile karşılaştırıldı . Gruplar içindeki farklılıklar, tekrarlanan ölçümler iki yönlü Kaplan-Meier tahmincisi ile analiz edildi ve p < 0.05, istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

          Git: Teşekkür

          ZEISS Axio Imager A2 mikroskopisi, Ulusal Bilim Konseyi, Eğitim Bakanlığı ve Chung Shan Tıp Üniversitesi tarafından desteklenen Chung Shan Tıp Üniversitesi Enstrüman Merkezinde gerçekleştirilmiştir.

          Git: Yazar Katkıları

          Kavramsallaştırma, N.-MT; metodoloji, X.-FH ve K.-FC; yazılım, X.-FH, S.-CL ve K.-FC; doğrulama, X.-FH, S.-CL ve K.-FC; biçimsel analiz, X.-FH ve K.-FC; soruşturma, X.-FH ve K.-FC; kaynaklar, C.-YH, C.-YL ve J.-CW; veri iyileştirme, X.-FH, K.-FC ve N.-MT; yazı—orijinal taslak hazırlama, X.-FH, C.-YH ve N.-MT; yazma—inceleme ve düzenleme, X.-FH, G.-TS, C.-YH ve N.-MT; görselleştirme, N.-MT; denetim, N.-MT; proje yönetimi, N.-MT; fon alımı, C.-YH ve N.-MT Tüm yazarlar, makalenin yayınlanan versiyonunu okudu ve kabul etti.

          Git: Finansman

          Çalışma, Tayvan Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'ndan MOST 105-2320-B-040-025 ve MOST 109-2320-B-040-012 araştırma hibesi ile desteklenmiştir.

          Git: Çıkar çatışmaları

          Herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

          Git: Dipnotlar


          Numune Bulunabilirliği: Mevcut olmayan bileşiklerin numuneleri yazarlardan temin edilebilir.



          Git: Referanslar

          1. Bray F., Me JF, Soerjomataram I., Siegel R., Torre LA, Jemal A. Küresel kanser istatistikleri 2018: 185 ülkede 36 kanser için dünya çapında GLOBOCAN insidans ve mortalite tahminleri. CA Kanser J. Clin. 2018; 68 :394–424. doi: 10.3322/caac.21492. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          2. Ikeda M., Morizane C., Ueno M., Okusaka T., Ishii H., Furuse J. Hepatosellüler karsinom için kemoterapi: Mevcut durum ve gelecek perspektifleri. Jpn. J. Clin. Onkol. 2017; 48 :103–114. doi: 10.1093/jjco/hyx180. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          3. Raoul JL, Forner A., ​​Bolondi L., Cheung TT, Kloeckner R., De Baere T. Hepatoselüler karsinom tedavisi için TACE'nin güncellenmiş kullanımı: Klinik kanıtlara dayanarak nasıl ve ne zaman kullanılacağı. Kanser Tedavisi. Rev. 2019; 72 :28–36. doi: 10.1016/j.ctrv.2018.11.002. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          4. Kudo M. Hepatoselüler Karsinom için Sistemik Tedavi: 2017 Güncellemesi. Onkoloji. 2017; 93 :135–146. doi: 10.1159/000481244. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          5. Mak L., Cruz-Ramón V., Chinchilla-López P., Torres HA, LoConte NK, Rice JP, Foxhall LE, Sturgis EM, Merrill JK, Bailey HH, ve diğerleri. Hepatoselüler Karsinomun Küresel Epidemiyolojisi, Önlenmesi ve Yönetimi. NS. Soc. klinik. Onkol. eğitim Kitap. 2018; 38 :262-279. doi: 10.1200/EDBK_200939. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          6. Etik DO, Suna N., Boyacıoğlu S. Hepatoselüler Karsinomun Yönetimi: Önleme, Sürveyans, Tanı ve Evreleme. Tecrübe. klinik. Nakil. 2017; 15 :31–35. doi: 10.6002/ect.TOND16.L9. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          7. Kinghorn AD, Farnsworth N., Soejarto D., Cordell G., Swanson S., Pezzuto J., Wani M., Wall M., Oberlies NH, Kroll D., ve diğerleri. Bitki Kaynaklı Antikanser Ajanların Keşfi için Yeni Stratejiler. Eczacılık Biol. 2003; 41 :53-67. doi: 10.1080/1388020039051744. [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          8. Dai J., Mumper RJ Bitki Fenolikleri: Ekstraksiyon, Analiz ve Bunların Antioksidan ve Antikanser Özellikleri. Moleküller. 2010; 15 :7313–7352. doi: 10.3390/moleküller15107313. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          9. Fitsiou E., Pappa A. Yunanistan'da Yetiştirilen Aromatik Bitkilerden Uçucu Yağların ve Diğer Ekstraktların Antikanser Aktivitesi. Antioksidanlar. 2019; 8 :290. doi: 10.3390/antiox8080290. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          10. Lin S.-R., Chang C., Hsu C., Tsai M., Cheng H., Leong MK, Sung P., Chen J., Weng C.-F. Kanser tedavisine potansiyel adjuvanlar olarak doğal bileşikler: Klinik öncesi kanıtlar. Br. J. Pharmacol. 2019; 177 :1409–1423. doi: 10.1111/bph.14816. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          11. Shinde U., Phadke A., Nair A., ​​Mungantiwar A., ​​Dikshit V., Saraf M. Cedrus deodara (Roxb.) Loud'un anti-inflamatuar ve analjezik aktivitesi üzerine çalışmalar. odun yağı. J. Etnofarmakol. 1999; 65 :21–27. doi: 10.1016/S0378-8741(98)00150-0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          12. Sharma PR, Shanmugavel M., Saxena AK, Qazi GN Cedrus deodarain insan kanser hücrelerinden sinerjistik bir lignan bileşimi ile apoptoz indüksiyonu. Fitoterapi Arş. 2008; 22 :1587–1594. doi: 10.1002/ptr.2511. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          13. Shashi B., Jaswant S., Madhusudana RJ, Kumar SA, Nabi QG Cedrus deodara'dan yeni bir lignan bileşimi, insan lösemi Molt-4 ve HL-60 hücrelerinde apoptozu ve erken nitrik oksit oluşumunu indükler. Nitrik. Oksit. 2006; 14 :72-88. doi: 10.1016/j.niox.2005.09.09. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          14. Shid X., Liu N., Zhang J., Hu P., Shen W., Fan B., Ma Q., Wang X. Cedrus deodara'nın çam iğnelerinden toplam flavonoidlerin ekstraksiyonu ve saflaştırılması, anti-tümöre katkıda bulunur laboratuvar ortamında. BMC Tamamlayıcı. Alternatif. Med. 2016; 16 :245. doi: 10.1186/s12906-016-1249-z. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          15. Singh S., Shanmugavel M., Kampasi H., Singh R., Mondhe D., Rao J., Adwankar M., Saxena A., Qazi G. Antikanser Aktiviteye sahip Cedrus deodara Stem Wood'dan Kimyasal Olarak Standartlaştırılmış İzolatlar. Bitki Med. 2007; 73 :519–526. doi: 10.1055/s-2007-967185. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          16. Saxena A., Saxena AK, Singh J., Bhushan S. Doğal antioksidanlar, insan lösemi HL-60 hücrelerinde Cedrus deodara'dan yeni bir lignan bileşimi olan AP9-cd'nin antikanser potansiyelini sinerjik olarak arttırır. Kimya Biol. Etkileşim. 2010; 188 :580–590. doi: 10.1016/j.cbi.2010.09.029. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          17. Tiwari AK, Srinivas PV, Kumar SP, Rao JM Cedrus deodara'dan serbest radikal süpürücü aktif bileşenler. J. Agric. Gıda Kimyası 2001; 49 :4642-4645. doi: 10.1021/jf010573a. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          18. Chaudhary A., Sood S., Kaur P., Kumar N., Thakur A., ​​Gulati A., Singh B. Cedrus deodara'dan Antifungal Sesquiterpenes. Bitki Med. 2011; 78 :186–188. doi: 10.1055/s-0031-1280264. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          19. Uehara A., Tommis B., Belhassen E., Satrani B., Ghanmi M., Baldovini N. Cedrus atlantica odun esansiyel yağının koku aktif bileşenleri. Fitokimya. 2017; 144 :208–215. doi: 10.1016/j.phytochem.2017.09.017. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          20. Dakir M., El Hanbali F., Mellouki F., Akssira M., Benharref A., Del Moral JFQ, Barrero AF, Del Moral JFQ Antibakteriyel diterpenoids from Cedrus atlantica. Nat. Ürün Araş. 2005; 19 :719–722. doi: 10.1080/14786410512331330675. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          21. Martins DF, Emer AA, Batisti A., Donatello N., Carlesso MG, Martins DF, Venzke D., Micke GA, Pizzolatti MG, Piovezan A., et al. Cedrus atlantica esansiyel yağının solunması, bir fare postoperatif ağrı modelinde azalan ağrı modülasyon yollarının aktivasyonu yoluyla ağrı davranışını hafifletir. J. Etnofarmakol. 2015; 175 :30–38. doi: 10.1016/j.jep.2015.08.048. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          22. Brigitte Bressac KMG, Liang TJ, Isselbacher KJ, Wands JR, Öztürk M. İnsan hepatoselüler karsinomunda anormal yapı ve p53 geninin ifadesi. Proc. Natl. Acad. bilim AMERİKA BİRLEŞİK DEVLETLERİ. 1990; 87 : 1973–1977. doi: 10.1073/pnas.87.5.1973. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          23. Chen C.-Y., Liu T.-Z., Liu Y., Tseng W.-C., Liu RH, Lu F.-J., Lin Y.-S., Kuo S.-H. , Chen C.-H. 6-Shogaol (Zencefilden Alkanone), Oksidatif Stres Aracılı Kaspaz-Bağımlı Mekanizma yoluyla İnsan Hepatomu p53 Mutant Mahlavu Alt Hattının Apoptotik Hücre Ölümünü İndükler. J. Agric. Gıda Kimyası 2007; 55 :948–954. doi: 10.1021/jf0624594. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          24. Liu, Li W., Tan N., Zhang Z., Liang JJ, Brown RE Akt-mTOR-p70S6K yolunun hepatoselüler karsinomda anjiyogenezde aktivasyonu. Onkol. Cum. 2008; 20 :713–719. doi: 10.3892/veya_00000064. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          25. Yang S., Liu G. Hepatosellüler karsinomda Ras/Raf/MEK/ERK yolunun hedeflenmesi. Onkol. Lett. 2017; 13 :1041-1047. doi: 10.3892/ol.2017.5557. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          26. Zhang S.-Y., Li X.-B., Hou S.-G., Sun Y., Shi Y.-R., Lin S.-S. Cedrol, P13K/Akt sinyal yolu yoluyla A549 küçük hücreli olmayan akciğer karsinomu hücrelerinde otofajiyi ve apoptotik hücre ölümünü, mitokondriyal transmembran potansiyelinin kaybını ve ROS oluşumunu indükler. Int. J. Mol. Med. 2016; 38 :291–299. doi: 10.3892/ijmm.2016.2585. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          27. Zhan P., Ji Y.-N., Yu L.-K. TP53 mutasyonu, hepatosellüler karsinomalı hastalarda kötü bir sonuçla ilişkilidir: Bir meta-analizden kanıt. HepatoBiliyer Cerrahi Nutr. 2013; 2 :260–265. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ Google Akademik ]
          28. Wysocki PJ Hepatosellüler kanserin hedefli tedavisi. Uzman Görüşü. Araştırın. İlaçlar. 2010; 19 :265–274. doi: 10.1517/13543780903514110. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          29. Matter M., Decaens T., Andersen JB, Thorgeirsson SS Hepatosellüler karsinomda mTOR yolunu hedefleme: Mevcut durum ve gelecekteki eğilimler. J. Hepatol. 2013; 60 :855-865. doi: 10.1016/j.jhep.2013.11.031. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          30. Kunter I., Erdal E., Nart D., Yılmaz F., Karademir S., Sağol O., Atabey N. AKT'nin aktif formu, hepatosellüler karsinomda hücre proliferasyonunu ve apoptoza yanıtı kontrol eder. Onkol. Rep. 2013; 31 :573-580. doi: 10.3892/veya.2013.2932. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          31. Huynh H. Hepatosellüler karsinomda moleküler hedefli tedavi. Biyokimya. farmakol. 2010; 80 :550–560. doi: 10.1016/j.bcp.2010.03.034. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          32. Strzalka W., Ziemienowicz A. Proliferatif hücre nükleer antijeni (PCNA): DNA replikasyonu ve hücre döngüsü düzenlemesinde önemli bir faktör. Anne. Bot. 2010; 107 :1127–1140. doi: 10.1093/aob/mcq243. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          33. Masood R., Cai J., Zheng T., Smith D., Hinton DR, Gill PS Vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF), VEGF reseptörü pozitif insan tümörleri için bir otokrin büyüme faktörüdür. Kan. 2001; 98 :1904–1913. doi: 10.1182/kan.V98.6.1904. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          34. Sporn MB, Roberts AB Otokrin büyüme faktörleri ve kanser. Nat. Hücre Biol. 1985; 313 :745–747. doi: 10.1038/313745a0. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          35. Muto J., Shirabe K., Sugimachi K., Maehara Y. Hepatosellüler karsinomda anjiyogenezin gözden geçirilmesi. hepatol. Araş. 2014; 45 :1–9. doi: 10.1111/hepr.12310. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          36. Finn RS, Zhu AX Hepatosellüler karsinomda anjiyogenezi hedefleme: VEGF ve bevacizumab'a odaklanın. Uzman Rev. Antikanser. orada. 2009; 9 :503–509. doi: 10.1586/era.09.6. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          37. He Y.-H., Li M.-F., Zhang X.-Y., Meng X.-M., Huang C., Li J. NLRC5, AKT/VEGF-A sinyalini düzenleyerek hücre çoğalmasını destekler hepatosellüler karsinomda yol. Toksikoloji. 2016: 47–57. doi: 10.1016/j.tox.2016.06.012. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          38. Hoshida Y., Toffanin S., Lachenmayer A., ​​Villanueva A., Minguez B., Llovet JM Hepatoselüler Karsinomda Moleküler Sınıflandırma ve Yeni Hedefler: Son Gelişmeler. Semin. Karaciğer Dis. 2010; 30 :035–051. doi: 10.1055/s-0030-1247131. [ PMC ücretsiz makale ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]
          39. Zhang G., Li Z., Wan X., Zhang Y., Zhu R., Liu Z., Ji D., Zhang H., Wu F., Tian H., et al. Theanine ve Türevi, (R)-2-(6,8-Dibromo-2-oxo-2H-chromene-3-carboxamido ile Met/EGFR/VEGFR-Akt/NF-κB Yollarını Düzenleyerek İnsan Hepatoselüler Karsinom Büyümesinin Bastırılması )-5-(etilamino)-5-oksopentanoik Etil Ester (DTBrC) J. Agric. Gıda Kimyası 2016; 64 :7002–7013. doi: 10.1021/acs.jafc.6b02509. [ PubMed ] [ CrossRef ] [ Google Akademik ]

          Yorum yap


          • #6

            Cedrus libani'nin öz odunundaki uçucu yağ bileşenleri ve Lübnan'dan Cedrus atlantica
            Mevcut araştırmanın ana odak noktası, Lübnan sedirini diğer sedir türlerinden ayırmaktır. NSCedrus libani ve Cedrus'un öz odunundan hidro-damıtma ile elde edilen uçucu odun yağıatlantica, GC/MS ile analiz edildi. α-, β-, γ-izomerleri olan on dört bileşen tanımlanmıştır.himachalen ve himachalol (%75) baskındı.α-, β- ve (E) ve (Z) izomerlerinin daha küçük miktarlarıγ-atlanton da mevcuttu.

            ANAHTAR KELİMELER: Cedrus libani - Cedrus atlantica - Kalp odunu - Odun yağı - Uçucu yağ.

            “Lübnan” adı “Beyaz” anlamına gelir veher zaman olan dağ zirvelerinden doğmuşturkarla kaplı ve/veyakireçtaşı kayalıkları. Lübnan sedirinden söz edildiİncil'de (eski Ahit) 75 kez vegüç ve istikrar sembolü olarak kullanılır. daha öncekez, Lübnan sedirleri geniş bir alanı kapladı.Lübnan dağları. Böylece sedir olduLübnan'ın Sembolü. Sedirin çeşitli kullanımları vardırodun yağı. Cüzzamlıların temizliğinde ve kırmızı düve, sedir ağacı ve çördük ile bağlantılı olarakkullanıldı (Levililer 14:4-52; Sayı 9:6). YağLübnan sedirlerinden elde edilenMısır'ın eski Firavunlarını ve modernbilim adamları odun sedir yağının antioksidan özelliklerini kanıtladılar. Birinin gövdesiRoma kralları Noha, sedir yağıyla kaplıydı.500 yıl geçmiş ve sedir ağacı yağının koruyucu özelliklerinden dolayı bakımlı kalmıştır.

            SEDRUS LİBANI
            Cedrus libani 1 kısa boylu çok yıllık bir ağaçtır.ve geniş gövde, yatay olarak uzanan kalın dallar ve piramit şeklinde geniş bir korona (Lübnan bayrağında gördüğümüz gibi) oluşturuyor. BuldukBcharri ormanında bu form ve kesimden kaynaklanırson şube erken. yan dallarbüyümek ve gelişmek, böylece çok yıllık ağaç olacak“Ie” formunu alın (sembolik formun adı:Yaprakların renginin olduğu Kültivar-Stenokomakoyu yeşil).

            SEDRUS ATLANTİKA
            Cedrus atlantica'nın doğal yaşam alanı, Cezayir ve Fas dağları.2 Yıla doğru 1840 ağaçlandırma ve ağaçlandırma sırasında tanıtıldı evinde ekim operasyonu. Cedrus atlantica bir özellikle güzel bir görünüme sahip ağaç yaşlı. Birçok küçük Atlantik sedir ağacı kolaylıkla kırık ve bu nedenle ince dallı dallara sahiptir. Atlantik sedirleri Lübnanlılardan ayırt edilebilir açık yeşil yapraklarıyla sedir ağacı, Lübnanlılar ise sedir yaprakları koyu yeşildir.



            Biyolojik Aktivite
            Sedir ağacı yağının kür de dahil olmak üzere çeşitli kullanımları vardır.cüzzamdan.3Bu nedenle, sentetik olarak kimyasal ve klinik çalışmalarroman gelişimi için doğal ilaçların yanı sıraşu anda anti-ülserojenik ajanlar yapılıyor.4, 5Bu tür doğal kaynakların taranmasında Yeşilata veHalkta kullanılan bitkilerden başlamaya karar verilen Shibatailaç. Bu amaçla birkaç araştırma yaptılarTürkiye'deki saha araştırmalarımız sırasında (Haziran1997) ve Cedrus dahil olmak üzere birçok bitkininlibani A. Rich, birkaç kişinin tedavisi için kullanılırülser çeşitleri.6, 7 tarafından elde edilen sıvı katranCedrus atlantica'nın odununun yıkıcı damıtılmasının cade'nin en iyi yağı olduğu belirtilmiş ve Fransız kodeksinde tanınması önerilmiştir. NSCedrus atlantica'nın uçucu yağının çokEscherichia coli, Candida albicans'a karşı aktif veCorynebactreium türleri.8 Himachalol, sedir ağacının ana spazm önleyici bileşeni olarak tanımlanmıştır.wood.9 In vitro araştırmalar allohimachalol tanımladıen aktif bileşen olarak. Kökün uçucu yağıHimalaya sedirinden elde edilen odun da benzer şekilde güçlütest mantarına karşı toksisite Heminthosoporiumoryzae. Bu durumda, saf yağ mantarı 2 saniyede öldürdü.Yağ, çok çeşitli mantar öldürücü aktivite sergiledive ticari mantar öldürücü kadar aktif bulunduajanlar. niceliksel farklılıklar göz önüne alındığında,Uçucu maddelerin üretimi aşağıdakilere bağlıdır:büyüme dönemi ve bitkinin yaşı, örnekleme içinterpenoid maddelerin analizi yapıldıdinlenme döneminde (Kasım'danMart)

            Öz
            Odun aromatiktir ve bilinmektedir.uzun yıllar boyunca uçucu bir yağın elde edilebileceğitalaşın buharla damıtılmasıyla. kalp ahşapCedrus libani ve Cedrus atlantica örnekleriHadath Eljebeh-Tanourine rezervinden toplanan vekabuğundan ayrıldı ve küçük parçalara ayrıldıparçacıklar. Uçucu yağın üretimindenöz odun, hidro damıtma ile elde edildi.Cedrus libani odunu (verim ağ/ağ %0.75) ve odunCedrus atlantica (verim ağ/ağ %0.65). gerekliyağlar, bir Perking Elmer kullanılarak GC/MS ile analiz edildiBir VG 70-70 kütlesine bağlı Sigma 3B kromatografıCP mumu 51 kılcal kolon ile donatılmış spektrometre,50°C ile 240°C arasında programlanmış sıcaklık2°C/dk. Mono-, sesqui- ve diterpenler iyi yapıcılardır.kozalaklı türleri birbirinden ayırt etmek için.10Himachalol, C. libani'nin özel bir üreticisi olarak görünmektedir.ve C. atlantica; buna göre, α-, β- eklemeliyiz,cedrus cinsinin yapıcıları olarak γ-Himachalene (Tablo Ive Şekil 1). C. libani'nin bazı türlerininve C. atlantica oldukça benzerdir, özellikle koniler, yapraklar, tomurcuklar ve bunların mono-, sesqui- vediterpenler. Bu türlerin konsantrasyonlarısırasında bir yıl artırmak ve başka bir yıl azaltmakuyku dönemi. C. libani'nin kimliğiC. libani'nin diğerinden ayırt edilmesini gerektirirbölgede yetişen sedirler, özellikle C. atlantica. Bazı seskiterpenler, özellikleHimachalene, kullanılan önemli bir üründür.parfüm endüstrisi. Ayrıca α-, β-, γ-atlanton gibi bazı oksijenli seskiterpenler de vardır.önemli anti-inflamatuar farmasötik ürünlerin yanı sıra önemli anti-kanser ürünlerinin temeli olankatkı maddeleri.

            Referanslar
            1. Chancy R, William J. Ayın ağacı: Cedrus libani. 1993;13:26-7.2. Plattier M, Teisserie P. Connaissance de L'huile katkısıessentielle de cedre de l'Atlas. 1972, s.131-43.3. Manzoor-i-kuda M, Slaque MA. Cedrus deodora'nın Bileşeni(sevgili ağaç). Bölüm I. Dewarene ve dewarol izolasyonu. J Bilim İnd.Res 1964;6:201-3.4. Harzemasah H. Cedrus libani-rich I'in kimyası üzerine çalışmalar.1987;41:27-38.5. Harzemasah H. Cedrus libani-rich II'nin kimyası üzerine araştırmalar.1978;41:73-5.6. Yeşilada E, Gürbus I, Shibata H. Anti-Helicobacter pylori aktivitesi için Türk anti-ülserojenik halk ilaçlarında tarama. JEtnofarmakol 1999;66:289-93.7. Yeşilada E, Fugita T. Bazı Türk şifalı bitkilerinin taranmasıantiülserojenik aktiviteleri. J Phytother Res 1993;7:236-64.8. Morris JA, Khettry A, Seitz EW. Soya fasulyesi ve enflasyon. J Am YağıChem Soc 1979;56:595-9.9. Dhar ML, Dhar MM, Dahwan BN, Mehrotra BN, Ray C. Indian J ExpBiol 1986;6:232.10. Mouhamad I, Moussa JS. Yapraklardan Anti bakteriyel Diterpenlerve Juniperus Excelsa tohumları. Phytother Res1992;6:261-4.

            Yorum yap

            Hazırlanıyor...
            X